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国家自然科学基金(39970667)

作品数:17 被引量:41H指数:5
相关作者:胡孝素王雅静马莹卜玲毅敬保迁更多>>
相关机构:四川大学华西医科大学川北医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 17篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 18篇医药卫生

主题

  • 9篇原虫
  • 9篇利什曼原虫
  • 8篇克隆
  • 8篇基因
  • 5篇分离株
  • 4篇杜氏利什曼原...
  • 4篇基因克隆
  • 3篇滴虫
  • 3篇阴道
  • 3篇阴道毛滴虫
  • 3篇毛滴虫
  • 3篇酶链反应
  • 3篇聚合酶
  • 3篇聚合酶链反应
  • 3篇合酶
  • 2篇蛋白基因
  • 2篇疫苗
  • 2篇外膜蛋白
  • 2篇外膜蛋白基因
  • 2篇腺苷酸

机构

  • 11篇四川大学
  • 6篇华西医科大学
  • 4篇川北医学院
  • 2篇山西医科大学
  • 2篇郑州市第五人...
  • 1篇成都中医药大...
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇郧阳医学院

作者

  • 11篇胡孝素
  • 8篇王雅静
  • 6篇马莹
  • 4篇卜玲毅
  • 4篇敬保迁
  • 3篇易桃林
  • 3篇戴保民
  • 3篇毕世樑
  • 3篇廖琳
  • 2篇帖超男
  • 2篇乔中东
  • 2篇芦殿梅
  • 2篇郑学礼
  • 2篇刘佩娜
  • 2篇游自立
  • 2篇王敏
  • 2篇谢辉
  • 2篇王子龙
  • 1篇章涛
  • 1篇何泼

传媒

  • 6篇中国寄生虫学...
  • 2篇中国人兽共患...
  • 2篇预防医学情报...
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇华西医科大学...
  • 1篇寄生虫与医学...
  • 1篇实用寄生虫病...
  • 1篇热带医学杂志
  • 1篇Chines...
  • 1篇四川大学学报...
  • 1篇中国动物学会...

年份

  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 1篇2007
  • 1篇2003
  • 7篇2002
  • 2篇2001
  • 4篇2000
  • 1篇1999
17 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶基因真核表达载体的构建与鉴定被引量:1
2008年
目的构建阴道毛滴虫氢化酶体腺苷酸激酶(adenynate kinase,AK)基因真核表达载体并予以鉴定。方法根据AK基因已知序列设计合成一对引物,应用PCR技术从阴道毛滴虫基因组DNA中扩增出AK基因,并将其克隆入pMD18-T Simple载体。阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR鉴定后,用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。应用BLAST软件辅助分析所测基因与Genbank中阴道毛滴虫氢化酶体AK序列的同源性。克隆载体PMD-18T-AK经限制性内切酶BamHI和XbaI双酶切,得到含这2个酶切位点之AK DNA片段,T4连接酶连接到含有这2个酶切位点的真核表达载体pcDNA3.1(+),构建出重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-AK,经凝胶电泳鉴定、酶切鉴定、PCR鉴定证实DNA片段大小的正确性。结果经凝胶电泳鉴定、酶切鉴定、PCR鉴定证实含大小正确的AK DNA片段。结论成功地构建了基因真核表达载体。
帖超男王雅静谢辉毕世樑刘佩娜廖琳
关键词:阴道毛滴虫腺苷酸激酶基因克隆真核表达载体
我国不同流行区内脏利什曼原虫分离株kDNA的PCR-SSCP分析被引量:14
1999年
目的: 分析我国不同类型流行区内脏利什曼原虫 (L.d.) 分离株kDNA。方法: 应用利什曼原虫属特异引物13A, 13B及据杜氏利什曼原虫四川人分离株kDNA 微环特异片段序列设计合成的引物Ⅰ、引物Ⅱ, PCR扩增不同流行区利什曼原虫分离株kDNA, 获特定片段, 进行SSCP分析。结果: 用引物Ⅰ和引物ⅡPCR扩增内脏利什曼原虫分离株kDNA, 在同样试验条件下, 山丘地区和荒漠地区L.d. 分离株扩增出297 bp 特定片段, 而平原地区L.d.分离株及新疆皮肤利什曼原虫未扩增出297 bp 特定片段。将上述各虫株的297 bp 特定片段进行SSCP分析, 可见两个山丘地区的L.d.分离株ssDNA 迁移率相同, 而与荒漠地区新疆771分离株则相差较大。用引物13A, 13BPCR 扩增平原地区的L.d.山东分离株和L.d.江苏分离株、山丘地区的L.d.汶川分离株、L.d.甘肃分离株,均扩增出120 bp 特定片段。经SSCP分析,平原地区的L.d.山东分离株和L.d.江苏分离株的ssDNA迁移率完全相同; 山丘地区的L.d.汶川分离株和L.d. 甘肃分离株ssDNA迁移率相同, 但与平原地区者明显不同;
郑学礼胡孝素陈建平
关键词:利什曼原虫PCR-SSCP
赖型钩端螺旋体及澳洲型钩端螺旋体的ompL_1和flaB_2抗原基因序列分析
2002年
目的 构建赖型钩端螺旋体 0 17株及澳洲型钩端螺旋体 6 0 7株外膜蛋白抗原基因om pL1和内鞭毛抗原基因flaB2 的重组质粒 ,并分别对ompL1及flaB2 基因进行序列分析。方法 通过聚合酶链反应扩增ompL1及flaB2 ,并将其分别克隆到pcDNA3.1/Myc His(+)载体T7启动子下游 ,构建抗原基因表达质粒 ,进行序列测定分析。结果 序列分析显示赖型钩体 0 17株与澳洲型钩体 6 0 7株的ompL1相同碱基 94 9个 (98.85 % ) ,碱基变异 11个 (1.15 % ) ;flaB2 的相同碱基 82 3个 (96 .94 % ) ,碱基变异 2 6个(3.0 6 % ) ,呈很高的保守性。结论 赖型钩体 0 17株与澳洲型钩体 6 0 7株的ompL1及flaB2
王敏戴保民
关键词:外膜蛋白基因
我国内脏利什曼病山丘疫区与平原疫区利什曼原虫SSUrDNA多变区序列分析被引量:7
2000年
[目的 ]分析我国内脏利什曼病 (VL)山丘疫区与平原疫区利什曼原虫 (L .d )分离株小亚基核糖体DNA (SSUrDNA)多变区的序列差异。 [方法 ]nDNA进行PCR扩增 ,将扩增出的SSUrDNA基因的特异片段克隆于 pGEMR TEasyVector上 ,采用通用引物M 13进行PCR扩增 ,全自动测序仪测序。 [结果 ]序列分析显示 ,扩增的 5株利什曼原虫SSUrDNA序列大小均为 392bp ;序列差异均发生在两个独特序列区 (UQ Ⅰ和UQ Ⅱ ) ;山丘疫区L .d甘肃分离株和四川分离株均在UQ Ⅱ区上有 2个相同的碱基突变 ,L .d甘肃分离株UQ Ⅰ区上有 1个碱基突变 ;无移码突变。 [结论 ]山丘疫区分离株与平原疫区分离株之间的碱基序列有差异 ,平原疫区L .d山东分离株与婴儿利什曼原虫 (L .infantum)
卜玲毅胡孝素敬保迁易桃林
PROTECTION AGAINST LEPTOSPIROSIS BY IMMU NIZATION WITH PLASMID DNA ENCODING 33 kDa ENDOFLAGELLIN OF L.INTERROGANS SEROVAR LAI被引量:1
2000年
To evaluate how the efficacy of DNA inocutation affects the ability to raise protective immunity against Leptospira. [WT5”BX]Methods.[WT5”BZ] A pair of oligonucleotide primers were designed to amplify the endoflagellar gene of L. interrogans sensu stricto serovar lai. An approximately 840bp fragment was generated with PCR and inserted into VR1012, a plasmid DNA expression vector, after the fragment and VR1012 were digested respectively with EcoRV and Sal I. A recombinant plasmid designated as VR1012+flaB2 was obtained. The vector, VR1012 consits of a pUC18 backbone with the cytomegalovirus(CMV) IE1 enhancer, promoter, and intron A, transcription regulatory elements and the BGH polyadenylation sequences driving the expressing of leptospiral endoflagellar gene of L. interrogans sensu stricto serovar lai. Plasmid encoding leptospiral endoflagellin gene was injected into quadriceps of NZW rabbits. [WT5”BX]Results.[WT5”BZ]This resulted in the generation of specific leptospiral antibody with high ELISA titer (1:32768) in the rabbits. Immuno/protection was performed in guinea pigs without adjuvant. The group“VR1012+flaB2” showed higher survival rate(90%,9/10 animals),compared with the group “VR1012 lack flaB2” and the group “normal saline”. [WT5”BX]Conclusion.[WT5”BZ]The technique of DNA vaccine has potential advantages over certain other vaccine preparation technologies. However whether DNA vaccine will be useful for vaccine development remains to be tested.
戴保民
新疆皮肤利什曼病病原体SSUrRNA基因克隆与序列分析被引量:1
2000年
[目的 ]分析新疆皮肤利什曼病病原体SSUrRNA基因序列 ,为该病原体种株鉴定分析提供实验依据。[方法 ]应用利什曼原虫特异引物R2 2 2及R333,PCR扩增SSUrRNA基因多变区的片段 ,克隆于T Easyvector,并以双脱氧链末端终止法进行序列测定 ,用DNASIS软件和GenBank微机联网检索分析所测XJCLP、L infantum及L tropicaSSUrRNA基因序列。[结果 ]XJCLP、L infantum及L tropicaSSUrRNA基因插入片段长度均为 394bp。XJCLP与L tropicaSSUrRNA基因 394bp序列存在 3个点突变 ,两者有 391个碱基相同 ,相似性为 99 2 %。XJCLP与L infantumSSUrRNA基因序列存在 3个点突变及 1个移码突变 ,两者有 390个碱基相同 ,类似性为99 0 %。L infantum与L tropica的SSUrRNA基因序列存在 1个移码突变 ,相似性为 99 7%。XJCLP、L infantum及L tropicaSSUrRNA基因序列一级结构与RNA二级结构均不同。经用GenBank检索本次所测XJCLP、L infantum及L tropicaSSUrRNA基因序列 ,该GenBank内尚无同类 394bp的SSUrRNA基因序列。[结论 ]XJCLP、L infantum及L tropica的SSUrRNA基因 394bp序列一级结构 ,二级结构存在差异。
郑学礼胡孝素杨文天章涛敬保迁
关键词:皮肤利什曼病克隆病原体
我国山丘疫区杜氏利什曼原虫LACK保护性抗原基因克隆和序列分析被引量:4
2002年
利什曼原虫的LACK抗原是利什曼原虫的蛋白激酶C受体的同源物 ,是新发现的一种抗原蛋白。本实验用分子克隆的方法获得我国山丘疫区杜氏利什曼原虫编码LACK保护性抗原的基因片段 ,测序并对其序列分析比较。我国山丘疫区杜氏利什曼原虫 (L dSC10 )LACK抗原基因片段的大小为 94 2bp ,与GenBank中LACK的核苷酸序列一致性在 94 %以上 ,呈高度同源性 ;推导的氨基酸序列与GenBank中LACK的氨基酸序列一致性达 95 %以上 ,具有高度保守性 ;该蛋白质属于WD蛋白家族 ,有重要的生物学意义。
卜玲毅胡孝素易桃林
关键词:利什曼原虫聚合酶链反应克隆
问号赖型钩端螺旋体内鞭毛蛋白与外膜蛋白基因融合DNA疫苗载体的构建被引量:1
2002年
目的 为增强问号赖型钩端螺旋体 (钩体 0 17株 ) DNA疫苗内鞭毛蛋白基因 (fla B2 )与外膜抗原基因 (omp L1 )的免疫保护作用 ,构建一种能表达 fla B2 与 om p L1 蛋白融合蛋白的 DNA疫苗载体。方法 通过聚合酶链反应分别扩增 0 17钩体 fla B2 与 omp L1 片段并进行融合 ,获得的嵌合基因 om p L1 - fla B2 中含有 10个氨其酸的中间接头序列 ,以维持其空间构象。结果 经酶切鉴定 ,证实有一 1.8kb片段插入载体 ,其 fla B2 及 om p L1 DNA测序结果与文献报道的一致。结论 表达 0 17株钩体 fla B2 与 om p L1 抗原融合蛋白的
王敏戴保民游自立方之茂王雅静
关键词:外膜蛋白基因融合DNA疫苗
利什曼原虫中国分离株SSU rDNA多变区序列分析被引量:7
2001年
目的分析我国荒漠、山丘疫区利什曼原虫分离株的 SSU r DNA多变区序列差异。方法 n DNA进行PCR扩增 ,将扩增出的 SSU r DNA基因的特异片段克隆于 p GEMR-T Easy Vector上 ,采用通用引物 M1 3进行 PCR扩增 ,全自动测序仪测序。结果序列分析显示本文报道的荒漠、山丘疫区的 2株利什曼原虫 (L.d.XJ771、L.d.SC6)的 SSU r DNA序列大小均为 3 92 bp;序列差异发生在两个独特序列区 (UQ- 和 UQ- ) ,无移码突变 ;与 Gene Bank中的利什曼原虫比较分析 ,同源性在 98%以上。结论我国荒漠、山丘疫区利什曼原虫分离株之间的 SSU r DNA多变区的碱基序列有差异 ;荒漠疫区分离株 L.d.XJ771与国际标准株 L.d.DD8的 SSU r
卜玲毅胡孝素敬保迁马莹易桃林
关键词:利什曼原虫聚合酶链反应克隆基因变异
Dipstick法诊断黑热病患者28例被引量:10
2000年
马莹胡孝素K.P.Chang
关键词:黑热病
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