广东省社会发展攻关项目(2002C30405)
- 作品数：10 被引量：41H指数：4
- 相关作者：樊慧珍黄文杰于化鹏梁昆马立人更多>>
- 相关机构：广州军区广州总医院南方医科大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：广东省社会发展攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- DNA探针杂交快速检测肺炎链球菌和流感嗜血杆菌被引量：12
- 2005年
- 目的建立一种早期快速检测肺炎链球菌和流感嗜血杆菌的分子生物学方法。方法采用聚合酶链反应(PCR)合成肺炎链球菌和流感嗜血杆菌特异的DNA探针和细菌16SrRNA的通用探针,并用生物素标记DNA探针,分别与细菌、病毒和真菌DNA杂交。并将该方法评价临床样本的检测。结果聚合酶链反应分别扩增出263、351、370bp三种DNA探针,肺炎链球菌和流感嗜血杆菌只与其对应的探针杂交,细菌通用探针和病毒、真菌间无交叉反应。该法可检测出1ng细菌DNA,100份痰标本利用该方法检测出11份肺炎链球菌和8份流感嗜血杆菌,其阳性率高于痰培养。结论该方法简便、快速、特异,具有较高的应用价值,可应用于临床检测。
- 樊慧珍于化鹏黄文杰
- 关键词：DNA探针肺炎链球菌流感嗜血杆菌
- 反向斑点杂交快速检测肺炎链球菌被引量：10
- 2004年
- 目的:建立一种利用DNA探针快速检测肺炎链球菌的反向斑点杂交方法。方法:在肺炎链球菌特异的自溶素基因序列内设计引物,聚合酶链反应合成1段263bp的DNA探针,然后用生物素标记的细菌DNA与该探针行反向斑点杂交,并将该方法应用于痰样本的检测。结果:所合成的探针具有高度特异性,与其他细菌间无交叉反应,该方法能检测出10ng细菌DNA。50份痰标本肺炎链球菌培养阳性者8份,杂交阳性者12份,PCR阳性者18份。结论:反向斑点杂交具有快速、敏感、特异的优点,对肺炎链球菌的快速诊断有重要意义。
- 樊慧珍黄文杰梁昆于化鹏
- 关键词：反向斑点杂交肺炎链球菌DNA探针聚合酶链反应
- DNA探针在呼吸机相关性肺炎病原学检测中的诊断价值被引量：2
- 2006年
- 目的建立一种早期、快速检测呼吸机相关性肺炎致病菌的分子生物学方法。方法采用聚合酶链反应合成铜绿假单胞菌、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌和流感嗜血杆菌这5种细菌的特异DNA探针和细菌16SrRNA的通用探针,分别与生物素标记的细菌、病毒和真菌DNA杂交。杂交法和培养法同时检测100份痰液标本。结果所合成的DNA探针具有高度特异性,与其他细菌、病毒、真菌间无交叉反应。该方法可检测出1 ng细菌DNA。杂交法阳性率显著高于培养法。结论所合成的DNA探针敏感性高,特异性强,具有较高的应用价值,可应用于临床标本检测。
- 樊慧珍于化鹏黄文杰邓火金
- 关键词：DNA探针
- 反向斑点杂交法快速检测嗜肺军团菌被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨早期、快速检测嗜肺军团菌的方法。方法 根据嗜肺军团菌特异的巨噬细胞感染增强子mip基因设计引物 ,通过聚合酶链反应合成一段特异的 2 6 0bp长链DNA探针 ,采用反向斑点杂交法检测生物素标记细菌DNA ,并应用于痰标本的检测。结果 所合成的 2 6 0bpDNA探针具有高度特异性 ,只和嗜肺军团菌杂交 ,与其他细菌、真菌、病毒无交叉反应 ,该探针最低可检测出 1ng的细菌DNA。杂交法和培养法分别检测 10 0份痰标本 ,两者的阳性率分别为 8%和 2 %。结论 该方法快速、特异 ,对嗜肺军团菌的早期诊断具有较高的应用价值。
- 樊慧珍黄文杰于化鹏张力
- 关键词：嗜肺军团菌痰标本斑点杂交法细菌DNADNA探针
- 应用DNA探针检测甲氧西林耐药葡萄球菌被引量：3
- 2006年
- 目的建立一种快速检测葡萄球菌和甲氧西林耐药葡萄球菌的斑点杂交技术。方法设计金黄色葡萄球菌nuc基因、甲氧西林耐药mecA基因、葡萄球菌tuf基因的特异引物,用聚合酶链反应合成其特异DNA探针,并用生物素标记,分别与固定在硝酸纤维素膜上的标准菌株和临床分离株模板DNA杂交,观察其敏感性和特异性。结果3对引物分别扩增出270bp、310bp、370bp3种DNA探针,均具有高度特异性。50株金黄色葡萄球菌tuf、nuc基因均为阳性,mecA基因阳性者22株。30株表皮葡萄球菌tuf基因均为阳性,nuc基因均为阴性,mecA基因阳性者9株。而其他非葡萄球菌与3种DNA探针杂交结果均为阴性。该方法可检测出1ng细菌DNA。结论斑点杂交技术检测耐甲氧西林葡萄球菌快速、有效,具有较高的应用价值。
- 樊慧珍于化鹏黄文杰邓火金
- 关键词：DNA探针杂交葡萄球菌甲氧西林耐药性
- 反向斑点杂交法快速检测肺炎支原体被引量：5
- 2005年
- 目的:探讨早期、快速检测肺炎支原体的方法。方法:根据肺炎支原体特异的P1基因设计引物,通过聚合酶链反应合成一段特异的162bp长链DNA探针,采用反向斑点杂交法检测生物素标记支原体DNA,并应用于痰标本的检测。结果:所合成的162bpDNA探针具有高度特异性,只和肺炎支原体杂交,与其它细菌、真菌、病毒无交叉反应,该探针最低可检测出1ng的DNA。杂交法和培养法分别检测100份痰标本,两者的阳性率分别为12%和2%。结论:该方法快速、特异,对肺炎支原体的早期诊断具有较高的应用价值。
- 樊慧珍于化鹏黄文杰
- 关键词：肺炎支原体DNA探针反向斑点杂交法肺炎支原体聚合酶链反应生物素标记
- 探针杂交法快速检测耐甲氧西林葡萄球菌被引量：1
- 2005年
- 樊慧珍于化鹏黄文杰龙军
- 关键词：耐甲氧西林葡萄球菌甲氧西林耐药性杂交法Β内酰胺类抗生素青霉素结合蛋白PBP2A
- 铜绿假单胞菌oprI基因的反向斑点杂交检测法被引量：8
- 2004年
- 目的建立一种早期快速检测铜绿假单胞菌的方法。方法根据铜绿假单胞菌特异的oprI基因设计引物,聚合酶链反应合成特异探针,光敏生物素标记细菌DNA,应用反向斑点杂交法检测铜绿假单胞菌。结果所合成的探针具有高度特异性,能鉴别铜绿假单胞菌,与其他细菌、病毒、真菌间无交叉反应。该方法能检测出100 ng细菌DNA。结论反向斑点杂交法具有快速、特异的优点,对铜绿假单胞菌的早期检测具有重要意义。
- 樊慧珍黄文杰梁昆方怡马立人刘耀清
- 关键词：铜绿假单胞菌呼吸道感染
- 两种DNA探针在肺炎链球菌DNA检测中的应用价值
- 2005年
- 目的研究寡核苷酸探针和长链DNA探针在肺炎链球菌检测中的诊断价值。方法合成肺炎链球菌特异的21bp寡核苷酸探针和263bp长链DNA探针并用生物素标记,两种探针分别与细菌全染色体DNA进行斑点杂交,比较两种探针检测痰液标本的敏感性和特异性,并与痰培养法比较。结果寡核苷酸探针和263bp探针检测肺炎链球菌基因组DNA的敏感性分别是100ng和1ng。培养法和杂交法同时检测100份痰标本,培养法、21bp探针和263bp探针的阳性检出率分别是7%、6%和17%。结论263bp长链DNA探针是检测肺炎链球菌DNA的较佳选择。
- 樊慧珍于化鹏黄文杰唐银丽
- 关键词：探针肺炎链球菌杂交
- 反向斑点杂交法检测流感嗜血杆菌核酸
- 2004年
- 目的 探讨早期、快速检测流感嗜血杆菌的方法。方法 应用流感嗜血杆菌编码外膜蛋白特异的P6基因设计引物 ,通过聚合酶链反应合成特异探针 ,采用反向斑点杂交法检测生物素标记DNA ,并应用于痰标本的检测。结果 只有流感嗜血杆菌扩增出 35 1bp的DNA片段 ,该探针能检测出 10ng的细菌DNA ,与其他细菌、病毒、真菌无交叉反应。该方法和培养法分别检测 5 0份痰标本 ,两者的阳性率分别为 30 %和 2 2 %。结论 该方法快速、特异 。
- 樊慧珍黄文杰梁昆方怡马立人刘耀清
- 关键词：反向斑点杂交法聚合酶链反应
