国家自然科学基金(31301584) 作品数:10 被引量:33 H指数:3 相关作者: 王海波 张昭其 苏新国 李璐 庞学群 更多>> 相关机构: 广东食品药品职业学院 华南农业大学 山东海能科学仪器有限公司 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 理学 更多>>
CBF冷应答途径基因在热处理诱导的香蕉果实抗冷性中的作用 被引量:1 2016年 【目的】探讨CBF/DREB(C-repeat binding transcription factor/dehydrate responsive element binding factor)冷应答途径在热处理诱导香蕉抗冷性中的作用,为研究香蕉果实中CBF冷应答途径的信号转导过程提供参考依据。【方法】从香蕉基因组数据库(http://banana-hub.southgreen.fr/)中挑选CBF冷应答途径的7个基因序列,分别设计特异引物,利用实时荧光定量PCR分析这7个基因在热处理诱导的香蕉抗冷性中的表达模式。【结果】香蕉果实MaICE在7℃处理1 h时,表达迅速升高并达到最大值,DREB类基因(MaDREB1D、MaDREB1E、MaDREB1G和MaDREB3)在7℃处理1 h时,均存在一个表达高峰,MaCOR413在7℃下4 h时有一个表达高峰。这些结果表明,香蕉果实中在7℃低温胁迫下中存在CBF冷应答途径,即ICE(inducer of CBF expression)-CBF-COR(Cold-regulated genes)通路。香蕉果实CBF冷应答途径的7个基因表达均在热处理(52℃,3 min)后0.5 h迅速达到最大值,进一步研究发现,香蕉果实经热处理后于7℃低温贮藏5 d时,MaDREB1D、MaDREB1E、MaDREB2C、MaDREB3和MaCOR413的表达均强于对照。【结论】7℃低温胁迫下MaICE、DREB类基因、MaCOR413表达依次增强,说明低温下香蕉果实中存在CBF冷应答途径。CBF冷应答途径相关基因表达增强可能参与了热处理诱导采后香蕉果实的抗冷性。 王海波 李璐 苏新国 张昭其 庞学群关键词:香蕉果实 抗冷性 基于气相离子迁移谱检测热激处理的香蕉挥发性物质 被引量:12 2019年 为了探讨热激处理诱导香蕉果实产生抗冷性的机制,利用热激处理(52℃热水浸泡3 min)采后香蕉果实,之后将香蕉果实置于20℃下贮藏3 h,采用气相离子迁移谱检测香蕉的挥发性物质,接着将香蕉果实置于7℃下贮藏7 d,测定冷害指数。结果表明,热激处理后0.5 h(H-0.5 h)的香蕉果皮挥发性成分及含量与对照基本一致,热激处理后1.5 h(H-1.5 h)的香蕉果皮挥发性成分及含量与对照差异最大,热激处理后3 h(H-3 h)的样品组分与对照差异较大。热激处理后1.5 h明显降低了己二酮、乙酸异戊酯、苯甲醛、丁酸乙酯、4-甲基苯酚、1-戊醇、1-丁醇、2-戊酮、糠醇等组分的含量,相反,热激处理后1.5 h增加了3-甲基-3-丁烯-1-醇、苯乙醛、戊酮-2,3-二酮、3-甲基-2-丁醇等组分的含量。主成分分析结果表明,两个主成分的累计贡献率高达76.5%,H-1.5 h样品的挥发性组分含量与对照、H-0.5 h和H-3 h的组分含量差异较大。进一步研究发现,热激处理能明显降低7℃冷藏香蕉果实的冷害指数。香蕉经热激处理后1.5 h的上述挥发性物质的短暂而迅速的变化,推测其可能是作为一个信号,它可能在热处理诱导香蕉抗冷性中起到重要调控作用。 王海波 邓宝仲 吴榕榕 沈玲儿 郭嘉怡 任芳关键词:热激 香蕉 挥发性物质 热处理提高采后果蔬抗冷性的机理分析 被引量:9 2015年 低温贮藏是采后果蔬最有效并且应用最广泛的一种保鲜技术,但是一些对低温敏感的水果和蔬菜,在低温贮藏中容易发生冷害现象,给采后果蔬造成重大的损失。热处理作为一种安全高效的物理处理措施,已被广泛应用于提高采后果蔬的抗冷性。目前多数研究集中在热处理对采后果蔬贮藏品质的影响以及对采后果蔬生理生化的影响,而热处理提高果蔬抗冷性的机理以及关键信号途径尚不太清楚。对热处理提高采后果蔬抗冷性可能存在的机理进行分析,表明热处理诱导的果蔬抗冷性与细胞膜完整性、活性氧信号、热激蛋白、精氨酸途径、糖代谢等因素相关。这些因素具有共同的特点:热处理最终均是通过诱导增强抗氧化酶体系的活性、维持细胞膜的完整性,从而提高了果蔬的抗冷性。 王海波 张昭其 邓鸿铃 苏新国关键词:果蔬 抗冷性 热激处理后低温贮藏下香蕉果实的挥发物成分分析 被引量:2 2020年 为探讨热激处理诱导香蕉果实产生抗冷性的机理,利用热激处理(52℃热水浸泡3 min)香蕉果实,之后将香蕉果实置于7℃下贮藏。采用气相离子迁移谱检测香蕉果实的挥发物,测定香蕉果实冷害指数。结果表明,与对照组和H+7℃4 h处理组相比,7℃4 h处理组明显降低了丁酸乙酯、己二酮、2,3-丁二酮、甲基丙醛、羟基丙酮、3-甲基丁酸、芳樟醇等19种成分的含量,明显增加了乙醇、三乙胺、2-己醇、戊酮-2,3-二酮、苯乙醛、2-丁酮、3-甲基-3-丁烯-1-醇等30种成分的含量。与对照组和7℃4 h处理组相比,H+7℃4 h处理组明显增加了1-戊醇、糠醇、4-甲基苯酚、2-戊酮等13种组分的含量。根据主成分分析,H+7℃4 h处理组与对照组的组分含量比较接近,而与7℃4 h处理组的组分含量差异较大。进一步研究发现,热激处理能明显减轻7℃冷藏香蕉果实的冷害症状,推测这13种成分含量的迅速增加可能在热处理诱导香蕉抗冷性中起到重要调控作用。 王海波 邓宝仲 吴榕榕 沈玲儿 郭嘉怡 任芳关键词:热激 香蕉 挥发物 CBF冷信号通路基因在热处理诱导的香蕉抗病性中的作用 被引量:1 2018年 探讨CBF(C-repeat binding transcription factor/dehydrate responsive element binding factor,DREB)冷信号基因在热处理诱导香蕉抗病性中的作用。从香蕉基因组数据库(http://banana-genome.cirad.fr/)中挑选CBF冷信号通路的7个基因序列,分别设计特异引物,利用实时定量PCR分析这7个基因在热处理诱导的香蕉抗病性中的基因表达情况,探讨冷信号基因在热处理诱导的采后香蕉抗病性中所起到的作用。在5~8 d时,对照组香蕉果实的MaICE基因表达量较高,病害胁迫和热处理诱导的抗病效果没有诱导MaICE基因的上调。接种炭疽病后MaDREB3基因表达量与对照组的差异不明显,推测MaDREB3没有响应病害胁迫,但是接种炭疽病菌对冷信号通路基因MaDREB1D、MaDREB1E、MaDREB1G、MaCOR413有一定的诱导作用。热处理能够提高采后香蕉果实的抗病能力,病害胁迫对CBF冷信号通路基因MaDREB1D、MaDREB1E、MaDREB1G、MaCOR413的表达有一定的增强作用,推测CBF冷信号通路基因可能在一定程度上参与了热处理诱导的抗病性提高。 李璐 张昭其 庞学群 王海波关键词:香蕉 抗病性 电子自旋共振法与可见分光光度法对比测定葛根黄酮抗氧化性 被引量:3 2014年 采用电子自旋共振法(ESR)对葛根黄酮4个提取样(CEP1,CEP2,CEP3,CEP4)抗氧化性能进行研究,同时采用可见分光光度法进行对比实验。将4份样品与1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)溶液混合,分别置于电子顺磁共振波谱仪与可见分光光度计中检测。结果表明:在ESR测定法里,不同的反应时间,同一份样品对DPPH·的清除率和质量浓度成正比例关系,在质量浓度为60 mg/L时,自由基的清除率有显著的提高。ESR处理时间30 min,60%乙醇洗脱液葛根冻干粉自由基清除率可以达到100%。ESR法能更灵敏、更准确地测定自由基清除效果。 李银花 王海波 李洪燕关键词:抗氧化性 MaHSFA1和MaHSP70在热处理诱导香蕉抗冷性中的作用 被引量:2 2016年 【目的】探讨MaHSFA1和MaHSP70基因在热处理诱导香蕉抗冷性中的作用,为有效延长香蕉贮运期提供参考依据。【方法】从香蕉基因组数据库(http://banana-genome.cirad.fr/)中搜索到MaHSFA1和MaHSP70基因序列,分别设计特异引物,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测这2个基因在香蕉热处理和低温贮藏中的表达情况。【结果】MaHSFA1基因与其他物种的HSFA1基因同源性较低,仅在HSF DNA-bind区域的保守性很高;MaHSP70基因含有一个HSPA1-2,6-8-like NBD区域,且与其他物种的HSP70基因同源性很高。7℃冷藏诱导香蕉果实的MaHSFA1和MaHSP70基因表达量整体上呈下降趋势。经52℃热水处理诱导的MaHSFA1基因表达增强,且在热激处理后0.5 h有一个小高峰;在7℃低温贮藏过程中,经热处理后的MaHSFA1基因表达量在贮藏4.0 h时迅速升高至最大值,之后又迅速下降;MaHSP70基因表达量在热激处理后0.5 h迅速升高至最大值,约是对照处理(未经热激处理)的4倍,之后逐渐下降。在整个试验过程中除7℃贮藏120.0 h外,其他时段热激处理的MaHSFA1和MaHSP70基因表达量均高于对照处理。【结论】采后香蕉果实的抗冷性与MaHSFA1和MaHSP70基因表达增强密切相关,生产上可通过热处理提高香蕉果实的抗冷性,进而延长贮运期。 王海波 李璐 苏新国 张昭其 庞学群关键词:香蕉 抗冷性 MaCaM在采后香蕉果实温度胁迫及后熟中的作用 被引量:2 2015年 【目的】研究香蕉Ca M在温度胁迫及香蕉果实后熟过程中的表达模式,了解Ca M在增强香蕉果实对温度胁迫的适应性作用,解释Ca M参与调控香蕉果实褪绿转黄的机制。【方法】通过比对NCBI数据库中已有物种的Ca M氨基酸序列,设计兼并引物。采用热硼酸法,从香蕉果皮中提取总RNA,通过RT-PCR与RACE方法扩增目的基因。利用DNAMAN软件和NCBI网站对Ca M的氨基酸序列进行氨基酸比对和同源树分析。利用地高辛探针合成试剂盒(PCR DIG Probe Synthesis Kit)合成特异基因带有DIG标记的探针,使用Northern杂交法对Ma Ca M在采后香蕉果实温度胁迫及后熟中的表达规律进行分析。钙离子螯合剂EGTA及钙信号恢复处理采用香蕉果皮离体培养,采用真空渗透的方法对香蕉果皮进行试剂处理,利用色差计测定颜色h值。【结果】从香蕉果皮中克隆得到一个Ca M,长648 bp,编码138个氨基酸,命名为Ma Ca M(登录号:HM061077),序列分析表明,Ma Ca M包含4个EF-Hand钙离子结合区域,与Ma Ca M、Os Ca M、Zm Ca M、At Ca M3、Ta Ca M1-2等基因同源性极高。Northern杂交结果表明,热激(52℃,3 min)处理香蕉果实0.5 h后,Ma Ca M表达迅速增强;香蕉果实在冷害温度(7℃)下放置10 d,Ma Ca M在冷藏的第7—10 d表达逐渐增强,当采后香蕉果实先经热激处理再放入7℃下贮藏,Ma Ca M表达在第4天和第7天强于7℃处理;乙烯催熟处理诱导香蕉Ma Ca M表达逐渐增强;30 mmol·L-1钙离子螯合剂EGTA处理在一定程度上抑制了香蕉果实的后熟,同时也抑制了Ma Ca M的表达。而在EGTA处理的同时,利用30 mmol·L-1 Ca Cl2进行钙信号恢复处理,能一定程度地恢复香蕉果实的正常后熟,也恢复了Ma Ca M的表达。【结论】Ma Ca M能增强香蕉果实对温度胁迫的适应性;Ma Ca M作为一种调控因子参与了香蕉果实后熟的褪绿转黄过程。 王海波 龚家建 苏新国 张昭其关键词:香蕉果实 后熟 CAM 基因表达 温度胁迫 MaCaM和MaCAMTA3基因在热处理诱导香蕉抗冷性中的作用 被引量:3 2018年 为了探讨MaCaM和MaCAMTA3基因在热处理诱导香蕉抗冷性中的作用,将香蕉经52℃热水处理3 min后于7℃贮藏5 d,测定脯氨酸含量,利用实时荧光定量PCR分析MaCaM和MaCAMTA3基因在香蕉热处理和低温贮藏中的表达情况。结果表明,香蕉果实经热激处理后在7℃贮藏时,其脯氨酸含量一直明显高于对照处理。7℃低温诱导香蕉果实的MaCaM基因表达在1 h迅速升高至最大值,之后又在4 h迅速下降,后期维持在一个较低的水平。而经热激处理后在7℃贮藏的香蕉果实,其MaCaM基因表达高峰推迟出现在4 h,除7℃贮藏1、4 h外,热激处理的MaCaM基因表达均高于对照。热处理能诱导香蕉果实MaCAMTA3基因表达在处理后3 h内迅速增强,7℃贮藏下MaCAMTA3基因表达呈现先下降后上升再下降的趋势,而经过热激处理后在7℃贮藏的香蕉果实,除7℃贮藏1、4 h外,其MaCAMTA3基因表达均高于对照。MaCaM和MaCAMTA3基因表达增强可能参与了热处理诱导香蕉果实产生的抗冷性。 王海波 李璐 苏新国 张昭其 庞学群关键词:香蕉 脯氨酸 抗冷性 EGTA结合热处理对香蕉果实CBF冷应答途径相关基因表达的影响 被引量:1 2018年 【目的】探讨EGTA[乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸]结合热处理对香蕉果实CBF冷应答途径相关基因表达的影响,为研究热处理提高香蕉果实抗冷性的机理提供理论参考。【方法】分别采用热处理(HWD)和EGTA结合热处理(EGTA+HWD)两种方法处理香蕉果实,将处理的香蕉果实置于20℃恒温箱中贮藏3.0 h,然后置于7℃恒温箱中冷藏120.0 h,期间定期采集香蕉果皮,利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测MaDREB1D、MaDREB2C、MaDREB3和MaCOR413基因在20和7℃下不同取样时间点的表达情况。【结果】HWD处理的香蕉果实MaDREB1D、MaDREB2C、MaDREB3和MaCOR413基因在20℃贮藏0.5 h时表达量迅速升高,之后又迅速降低,7℃冷藏下这4个基因的表达量整体上呈升高趋势。与HWD处理相比,EGTA+HWD处理明显抑制MaDREB1D基因在20℃贮藏0.5 h时的表达,也降低了MaDREB1D基因在7℃冷藏过程中的表达量;EGTA+HWD处理的MaDREB2C、MaDREB3和MaCOR413基因在20℃贮藏和7℃冷藏中的表达量一直维持在较低水平。【结论】EGTA能抑制香蕉果实CBF冷应答途径相关基因的表达,推测钙信号参与香蕉果实CBF冷应答途径。 王海波 李璐 苏新国 张昭其关键词:香蕉 EGTA 基因