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国家自然科学基金(39970693)

作品数:12 被引量:41H指数:4
相关作者:沈关心朱慧芬邵静芳杨敬曹利民更多>>
相关机构:华中科技大学无锡市第三人民医院内蒙古农业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 12篇中文期刊文章

领域

  • 11篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 6篇蛋白
  • 4篇抗体
  • 3篇受体
  • 3篇铁蛋白
  • 3篇转铁蛋白
  • 3篇转铁蛋白受体
  • 3篇基因
  • 2篇单链
  • 2篇单链抗体
  • 2篇体外
  • 2篇嵌合
  • 2篇嵌合抗体
  • 2篇肿瘤
  • 2篇细胞
  • 2篇免疫
  • 2篇核酸
  • 2篇反义
  • 2篇反义核酸
  • 2篇肝癌
  • 2篇靶向

机构

  • 10篇华中科技大学
  • 3篇无锡市第三人...
  • 2篇内蒙古农业大...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇江汉大学

作者

  • 8篇沈关心
  • 5篇朱慧芬
  • 3篇杨敬
  • 3篇邵静芳
  • 3篇曹利民
  • 3篇张悦
  • 2篇戴国仪
  • 2篇黄文广
  • 2篇王晓娟
  • 2篇周春
  • 2篇叶庆
  • 1篇杨道锋
  • 1篇徐永健
  • 1篇王志华
  • 1篇王骞
  • 1篇卢志贤
  • 1篇潘宇红
  • 1篇王硕
  • 1篇黄宏
  • 1篇张珍祥

传媒

  • 2篇中国肿瘤生物...
  • 2篇华中科技大学...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇南通医学院学...
  • 1篇华中医学杂志
  • 1篇同济医科大学...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇中华血液学杂...
  • 1篇Chines...
  • 1篇Journa...

年份

  • 3篇2004
  • 5篇2003
  • 3篇2002
  • 1篇2001
12 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
Survivin反义RNA真核表达载体的构建及鉴定被引量:1
2003年
王晓娟戴国仪王国华朱慧芬张悦沈关心
关键词:白血病SURVIVIN反义核酸
转铁蛋白受体介导的肝癌靶向性HSV-tk/GCV系统的构建及体外效应研究被引量:2
2003年
目的 :构建肝癌靶向性 HSV- tk/ GCV基因转移系统 ,并研究其在体外对肝癌细胞的杀伤效应。方法 :体外培养通过基因重组技术构建和表达抗转铁蛋白受体 ( Tf R)人 -鼠嵌合抗体的转染瘤细胞 D2 C5 .6,诱导裸鼠( Balb/ c,nu/ nu)产生腹水并纯化 ;以蛋白质连接因子 -水溶性碳二亚胺 ( EDC)介导 Tf R的抗体与多聚左旋赖氨酸的连接 ( Ab- PL L ) ,与 p EBAF/ tk按比例混匀 ,得到 Ab- PL L - p ETAF/ tk基因转移系统 ;分别转染不同的细胞株进行体外效应研究 :人肝癌细胞株 Hep G2、SMMC772 1,人肺癌细胞株 5 49,观察给予不同浓度的更昔洛韦 ( GCV)随时间延长的细胞改变情况 ,用 MTT法检测 GCV对不同细胞的杀伤作用。结果 :分析型酸性尿素凝胶电泳证实抗 Tf R的抗体与 PL L成功连接 ;体外杀伤实验显示 :经 Ab- PL L - p ETAF/ tk基因转移系统处理的 3种细胞对 GCV表现出不同的敏感性。 Hep G2细胞 ( CD71 ,AFP )对 GCV很敏感 ,低浓度的 GCV( 1mg/ L )处理 3 d,即可使细胞生长抑制率达到 74.8% ,SMMC772 1细胞 ( CD71 ,AFP+ )对 GCV低度敏感 ,A5 49( CD71- ,AFP- )对 GCV不敏感。结论 :Tf R介导的肝癌靶向性 HSV- tk/ GCV基因转移系统构建成功 ;
曹利民王骞潘宇红陈蓉芳卢志贤马志兰祝建中沈关心
关键词:肝癌TK基因靶向性转铁蛋白受体体外效应
双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统的构建及体外效应研究被引量:1
2002年
目的:构建高靶向性基因转移及表达系统,并研究其介导HSV-tK/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法:通过重组技术分别构建anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白表达载体ScFv-GAL4-pET28a及合AFP启动子、GAL4特异性识别序列(GAL4rec)的HSV-tk真核表达载体pEBAF/tk-GAL4rec。IPTC诱导后,利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tk-CAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肿瘤细胞株HepG2,SMMC7721及A549。潮霉素筛选后,MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。结果:双酶切鉴定、SDS-PAGE电泳及测序分别证明anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白及重组pEBAF/tk-CAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中,高分泌AFP(845ng/ml)的HepG2/tk细胞对GCV很敏感,且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关;而低分泌AFP(2ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感;不分泌AFP的A549/tk细胞则不敏感。结论:双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建成功,并显示出很好的靶向性。
王骞曹利民周华荣朱慧芬张悦邵静芳杨敬沈关心
关键词:HSV-TK基因转铁蛋白受体肝癌
PROGNOSTIC SIGNIFICANCE OF EXPRESSION OF SURVIVIN IN ACUTE LEUKEMIA被引量:3
2002年
Objective: To investigate the expression of survivin gene and its significance in acute leukemia. Methods: The expression of surviving in 134 acute leukemia patients and 4 leukemia cell lines was detected by RT-PCR and immunofluorescence analysis. Results: We detected survivin expression in 78 of 134 acute leukemia patients and all the cell lines but not in normal controls and anemia patients. Survivin gene expression correlated with a lower white blood cell count, which was 11×109/L and 48×109/L in the positive and negative group respectively (P<0.01 by the Mann-Whitney test). In 55 cases of FAB M1/M2/M3, it was associated with leukemic cell maturation(P<0.01 by the Fisher test). Survivin expression was strongly related to survival time of acute leukemia patients (P<0.05). Conclusion: These data suggest that survivin expression may be considered as a new unfavorable prognostic factor for acute leukemia due to its important role in apoptosis inhibition that influences disease outcome.
王晓娟戴国仪曹利民王国华朱慧芬张悦沈关心
关键词:SURVIVINRT-PCRPROGNOSIS
The Expression of the Apoptosis-Suppressive Gene bcl-2 in the Tissue of Colon Carcinoma被引量:2
2002年
The role of bcl 2 in the pathogenesis of colorectal tumor were studied. The exp ression of bcl 2 in the colorectal carcinoma and incisional edge tissue of tumo r was detected by using SABC method. The results showed that the positive rate o f bcl 2 was 69.6 % in colorectal carcinoma and 47.6 % in the incisional edge ti ssue respectively, with the difference being very significant ( P =0.001). B cl 2 positive rate was associated with Dukes' stage, but had nothing to do with histological classification. It was concluded that bcl 2 might play a signific ant role in the development of colorectal carcinoma.
黄文广姚璇
关键词:IMMUNOHISTOCHEMISTRY
抗转铁蛋白受体单链抗体原核表达载体的构建和表达被引量:4
2004年
目的 构建抗转铁蛋白受体 (TfR)单链抗体原核表达载体 ,为进一步研究其效应奠定基础。方法 从抗TfR单克隆抗体重链和轻链可变区基因的克隆载体 pGEM T VH和 pGEM T VL中扩增重链可变区 (VH)和轻链可变区 (VL)基因 ,用重叠延伸PCR的方法 ,在VH和VL基因间引入连接短肽 (Linker) ,构建VH Linker VL的单链抗体 (singlechainFv ,scFv)基因。经NcoⅠ和NotⅠ酶切后亚克隆到原核分泌型表达载体pUC19/119上 ,转化和筛选后 ,阳性细菌经IPTG诱导表达。间接免疫荧光法 (IFA)及抗体封闭试验鉴定其抗体活性。结果 凝胶电泳可见重叠延伸PCR扩增产物约 70 0bp条带 ,SDS PAGE鉴定表达产物的分子量为 2 7kD左右 ,与scFv的理论值一致 ,IFA及抗体封闭试验证明表达产物有抗人TfR的活性。结论 本研究成功地构建并表达了抗人TfRscFv ,为抗人TfRscFv的应用奠定了基础。
朱慧芬杨道锋沈关心周春
关键词:单链抗体原核表达跨膜糖蛋白
组蛋白去乙酰化酶1在人肺癌组织中的表达被引量:3
2003年
目的 探讨原发性肺癌组织中组蛋白去乙酰化酶 1(HDAC1)的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学法和原位杂交法 ,分别测定 2 8例肺癌组织及其癌旁肺组织中HDAC1表达。结果 在 2 8例肺癌组织中HDAC1的蛋白质和mRNA的A值分别为 0 2 1± 0 0 2 ,0 18± 0 0 3 ,而其癌旁肺组织中HDAC1的蛋白质和mRNA的A值分别为 0 16± 0 0 2 ,0 11± 0 0 1,两者相比差异均有显著性意义 ,P <0 0 5。
黄宏张珍祥徐永健
关键词:组蛋白去乙酰化酶1肺癌免疫组织化学原位杂交癌组织
结直肠癌MMP-7的表达及对微血管生成和肿瘤转移的影响被引量:4
2004年
目的 探讨结直肠癌基质金属蛋白酶 7(MMP 7)的表达及对微血管生成和转移的影响。方法 应用免疫组织化学SP法 ,检测 5 6例结直肠癌组织及 8例正常组织MMP 7的表达和微血管密度 (MVD)及其与临床病理参数的关系。结果 在 5 6例结直肠癌组织中MMP 7的阳性表达率为 73.2 % ,MVD值为 36 .4 1± 5 .76 ,与对照组比较差异有极显著性意义(P <0 .0 1)。MMP 7的表达与淋巴结转移、Dukes分期有相关性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;结直肠癌的MVD值与分化程度、Dukes分期、淋巴结转移均有显著相关性 (P <0 .0 1) ;MMP 7表达阳性的结直肠癌组织MVD值明显高于MMP 7表达阴性者 (P <0 .0 1)。结论 MMP 7的表达和微血管生成与结直肠癌侵袭转移密切相关 ,联合检测MMP 7和MVD对结直肠癌的治疗、预后判定有一定的价值。
黄文广刘琪黄汉菊
关键词:结直肠癌基质金属蛋白酶-7微血管密度肿瘤转移
抗CD71人-鼠嵌合抗体(D2C)的构建和表达被引量:5
2003年
目的 :构建抗CD71人 鼠嵌合抗体的真核细胞表达载体并在真核细胞中表达嵌合抗体。方法 :将鼠源性抗CD71单抗 (75 79)重、轻链可变区基因 (VH 和VL)分别克隆至含有人IgG轻、重链恒定区的表达载体pγ Expr和pκ Expr中 ;将嵌合表达载体 (Chi75 79 pγ Expr和Chi75 79 pκ Expr)经电转染技术共转染至真核细胞 (SP2 0 )中。结果 :经ELISA法检验阳性转染瘤细胞培养上清 ,证明其表达蛋白产物中同时具有人IgG重链恒定区 (Cγ)和轻链恒定区 (Cκ)蛋白 ;通过间接免疫荧光流式细胞术 (FCM)和间接免疫荧光显微技术 ,证明该表达产物能够特异性识别和结合表达于靶细胞表面的CD71分子。结论 :抗CD71人 鼠嵌合抗体 (D2C)在体外真核细胞表达成功。
王硕蒋琳叶庆朱慧芬杨敬邵静芳沈关心
关键词:人-鼠嵌合抗体
胃肠道恶性肿瘤患者手术前后免疫功能的变化被引量:3
2001年
为了解手术对胃肠道恶性肿瘤患者细胞免疫功能和体液免疫功能的影响 ,以 2 1例胃癌、结直肠癌患者作自身对照研究 ,检测手术前后血清中肿瘤坏死因子 - α、可溶性白介素 - 2受体、Ig G、Ig M、Ig A、C3 和 C4的含量。与术前相比 ,患者术后第 1d血清肿瘤坏死因子 - α及可溶性白介素 - 2受体无明显改变 ,术后第 7d均明显减少 (P<0 .0 1) ;术后第 7d血清中 Ig G无明显改变 ,Ig M明显升高 (P<0 .0 1) ,Ig A升高 (P<0 .0 5 ) ,C3 、 C4无明显改变。证实胃肠道恶性肿瘤患者免疫功能低下与肿瘤负荷状态有关 ,切除肿瘤可使患者的细胞免疫功能得到改善 ,也可使体液免疫功能得到部分改善。
黄文广张鹏沈关心
关键词:胃肠肿瘤细胞免疫体液免疫
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