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上海市教委科研基金(11YZ89)

作品数:2 被引量:0H指数:0
相关作者:王全喜魏兰珍田丽芳郭正红更多>>
相关机构:上海师范大学更多>>
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相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇启动子
  • 1篇转录
  • 1篇转录调控
  • 1篇抗体
  • 1篇抗体制备
  • 1篇克隆
  • 1篇基因
  • 1篇基因启动子
  • 1篇集胞藻
  • 1篇集胞藻680...
  • 1篇发菜

机构

  • 2篇上海师范大学

作者

  • 2篇魏兰珍
  • 2篇王全喜
  • 1篇郭正红
  • 1篇田丽芳

传媒

  • 1篇西北植物学报
  • 1篇植物研究

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2012
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
发菜NdhK的抗体制备与蛋白表达
2012年
发菜是一种陆生蓝藻,分布于一些干旱和半干旱区域。其NADPH脱氢酶(NDH-1)是一种重要的光合膜蛋白复合体,参与CO2吸收、围绕光系统Ⅰ的循环电子传递和细胞呼吸。为研究该物种中ndhK基因的功能,本研究利用特异性引物,通过PCR方法从发菜中扩增ndhK基因并克隆到原核表达载体pET-32a上,得到表达载体pET-32a-ndhK,将其转入大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,得到分子量大小为43 kDa的融合蛋白NdhK。随后,采用亲和层析,对融合蛋白进行纯化回收,并以此回收蛋白作为抗原进行免疫,制备NdhK的多克隆抗体。最后,利用Western blot蛋白免疫印迹对所得抗体的特异性进行验证。从而为进一步探索发菜ndhK基因的功能以及发菜中NDH-1复合体各亚基的作用进行前期准备。
郭正红魏兰珍王全喜
关键词:发菜多克隆抗体蛋白表达
集胞藻6803中ndhK基因启动子结构与功能的初步分析
2013年
ndhK是蓝藻NDH-1复合体的1个亚基编码基因,其表达受低浓度CO2和高光的诱导,对于蓝藻应对低CO2胁迫起着重要的作用。为进一步阐明ndhK基因的转录调控机制,本研究利用5′-RACE(Rapid Amplification of cDNAEnds,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了该基因的转录起始位点,利用生物信息学预测发现ndhK基因含有4个可能的启动子,构建了含增强型黄色荧光蛋白报告基因的启动子探针型载体,并利用蛋白免疫印迹的方法进行检测。结果表明:在集胞藻6803的ndhK基因上游的-374~-274bp,-438~-374bp,-604~-543bp,+1~+52bp区域具有较高的启动子活性,而-543~-440bp区域则可能存在1个抑制ndhK基因表达的转录因子。
田丽芳魏兰珍王全喜
关键词:启动子转录调控
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