国家自然科学基金(30070742)
- 作品数:7 被引量:22H指数:2
- 相关作者:王为忠李孟彬李开宗季刚张洪伟更多>>
- 相关机构:第四军医大学西京医院西安工业学院第四军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- OX34预防大鼠小肠移植急性排斥反应被引量:1
- 2006年
- 目的:探讨可溶性抗CD2 mAb(OX34)在大鼠小肠移植(SBT)急性排斥反应中的治疗作用.方法:将两种近交系大鼠(SD,W istar)72只随机分为A,B,C,D 4组,A组为对照组(n=18)行虚拟手术,给予普通饲料喂养;B组(n=18)行同系小肠移植(iso-strain SBT),术后常规补液,给予抗生素;C组(n=18)行不同品系小肠移植(aniso-strain SBT),术后处理同B组;D组(n=18)行不同品系小肠移植,术后除常规补液、给予抗生素外,同时给予OX34.各组于术后3,5,7 d取材.行病理学及流式细胞术(FCM)检测.结果:手术后C组移植受体存活时间及外周血CD2阳性T淋巴细胞表达率较其他3组差异有统计学意义(P<0.05).移植肠病理学检查均有从轻度至重度急性排斥反应的发生.D组部分受体于术后5,7d出现轻度急性排斥反应.A,B组未见明显排斥反应发生.结论:OX34可有效抑制急性排斥反应的发生.
- 季刚林艳王为忠管文贤牛卫博
- 关键词:小肠移植CD2急性排斥反应
- 异种血清对猪血管内皮细胞适应模型的影响
- 2006年
- 目的:观察胎牛血清对PAEC适应模型的影响。方法:以猪自体血清原代培养PAEC并传代,接种于96孔板后分别以5%正常人血清(NHS组)、胎牛血清(FCS组)和补体灭活的胎牛血清(FCS+C组)诱导6d,加入25%正常人血清,以MTT比色法检测细胞的存活率,并以免疫组化的方法观察各组HO-1的表达情况。结果:NHS组和FCS+C组细胞存活率均升高,同对照组相比差异显著,两组间亦有差异,HO-1表达均增加。FCS组与对照组无差异。结论:质量不佳的胎牛血清或补体灭活不充分的胎牛血清会干扰PAEC适应模型的诱导。
- 李孟彬王为忠李开宗张洪伟季刚沈新
- 关键词:内皮动物免疫组织
- 建立猪血管内皮细胞对人血清适应的模型及其评估被引量:2
- 2007年
- 目的:观察人免疫球蛋白G、免疫球蛋白M和正常人AB型血清诱导猪血管内皮细胞适应状态的效果。方法:实验于2002-05/2003-02在解放军第四军医大学分子生物学实验室完成。①正常人AB型血清和猪血清制备:取健康AB血型成年人血,每次50mL,置于干燥管内,垂直静置6h,3000r/min离心10min,取上清。操作4℃条件下进行,以保证补体的活性。获得血清于-20℃保存备用,用前0.22μm滤膜过滤除菌。猪血清制备同上。②猪血管内皮细胞培养、纯化及鉴定:取体质量3kg实验用乳猪,自左侧髂总动脉向心侧插入大隐静脉导管20cm,注射肝素500U后持续滴注含肝素抗生素盐水(肝素1×105U/L,青霉素4×107U/L),取腹主动脉和胸主动脉,以4℃含肝素抗生素盐水冲洗管腔和外膜后注入37℃预热的10g/LⅠ型胶原酶,消化5min后收集消化液,以1000r/min离心5min,收集细胞放于CO2孵箱内培养并传代,第3代以后不再使用抗生素。在光学显微镜下观察细胞生长形态,进行培养细胞类型的鉴定。③正常人血清对猪血管内皮细胞溶解试验:将猪血管内皮细胞制成浓度5×106L-1的细胞悬液,接种于96孔培养板,每孔200μL,培养至第4天细胞基本铺满培养板底部后加入含正常人AB型血清的培养液,终浓度分别为5%、10%、25%、40%,以相应浓度猪血清为对照,每组各取3孔。放入37℃孵箱内孵育2h后以四唑盐比色试验测各孔的吸光度值。④猪血管内皮细胞对人血清适应模型的建立及评估:培养猪血管内皮细胞,分别以免疫球蛋白G、免疫球蛋白M和低浓度正常人AB型血清诱导猪血管内皮细胞6d,以四唑盐比色法检测细胞存活率,并以免疫组化方法检测其血红素氧合酶1表达的情况。结果:①接种细胞形态呈圆形、三角形或短梭形,胞体丰满、胞浆均匀、核仁清晰。部分细胞呈团块样,大部分细胞为单细胞分布,其间混杂有少许血细胞,说明培养细胞为血管
- 李孟彬王为忠李开宗张洪伟季刚沈新
- 关键词:异种移植内皮细胞
- 简易旋转持续静脉输液装置的研制被引量:3
- 2005年
- 目的:研制简易、可靠的用于大鼠可旋转持续静脉输液的装置.方法:利用肝素帽及一次性注射器等临床常用材料设计制作一种旋转持续静脉输液装置,用于40只行小肠移植术的受体大鼠,观察在不影响大鼠自由活动情况下维持长期静脉输液的效果,以验证该装置的可靠性和实用性.结果:该装置能够维持34只小肠移植术后大鼠试验期间的静脉输液,最长时间达38d,未出现脱管、缠绕、堵塞等情况.结论:该旋转持续静脉输液装置可以满足大鼠1mo左右的持续静脉输液的需要,而且材料易得,制作简单.
- 李孟彬赵平歌王为忠李开宗张溪罗兰
- 关键词:输液装置小肠移植全胃肠外营养
- 大鼠小肠移植排斥反应时外周血T淋巴细胞上CD2分子的表达被引量:2
- 2006年
- 目的探讨大鼠小肠移植急性排斥反应时外周血T淋巴细胞上CD2分子的表达。方法实验分3组进行,A组为假手术对照组(n=18),给予普通饲料喂养;B组(n=18)行SD大鼠到SD大鼠的同系小肠移植,术后常规补液,给予抗生素;C组(n=18)行SD大鼠到Wistar大鼠的小肠移植,术后处理同B组。各组于术后3、5、7d取肝素抗凝血,行流式细胞术检测,同时取移植肠组织,进行病理学检查。结果术后C组动物的存活时间为(7.0±2.1)d,B组为(33.3±2.3)d,A组>90d,C组与A、B组相比,差异有统计学意义(P<0.05);术后3、5、7d的外周血CD2阳性T淋巴细胞,A组分别为70.2%、69.8%和70.3%;B组为71.3%、69.7%和70.2%;C组为95.6%、88.1%和81.2%,C组各时点的CD2阳性细胞均高于A、B组相应时点(P<0.05);C组移植肠可见排斥反应的病理改变,且随术后时间的延长逐渐加重。结论小肠移植术后发生急性排斥反应时外周血CD2阳性T淋巴细胞表达率升高;术后早期CD2表达率的突然增高,提示可能发生急性排斥反应。
- 季刚林艳王为忠管文贤牛卫博
- 关键词:小肠
- 自制旋转持续静脉输液装置在大鼠同种异体小肠移植排斥模型构建中的应用被引量:2
- 2009年
- 背景:构建大鼠小肠移植模型是研究小肠移植排斥反应的重要基础,实验中对动物无法进行长期持续的静脉输液成为延误实验顺利开展的最大障碍。目的:将自制旋转持续静脉输液装置与大鼠异位小肠移植模型相结合,验证输液装置的可靠性和动物模型的稳定性。设计、时间及地点:随机区组,对照观察实验,于2008-03/06在解放军第四军医大学西京医院消化病研究所全军医学重点实验室完成。材料:选用健康雄性近交系F344/NCrl BR大鼠48只为供体,LEW/Crl大鼠48只为受体,建立同种异体节段性异位小肠移植模型。方法:将移植后的大鼠以随机化完全区组设计分为3组(n=16):对照组、输液组和他克莫司治疗组。对照组大鼠仅行小肠移植,移植前后不做持续静脉输液。输液组大鼠给予持续输注肠外营养液。他克莫司治疗组持续输注肠外营养液+静脉注射他克莫司0.5mg/(kg·d)。主要观察指标:移植后观察移植大鼠的一般状况和存活时间,并于移植后3,5,7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=3)进行组织病理学检查,每组剩余的大鼠作存活时间观察,观察期限为5周。结果:对照组大鼠平均存活时间为(5.4±1.7)d,手术成功率56.3%。采用旋转输液装置的输液组和他克莫司治疗组大鼠手术成功率为90.6%,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。输液组大鼠平均存活(7.2±2.8)d,最终全部死于急性排斥反应。他克莫司治疗组剩余大鼠的输液时间>30d,存活时间超过5周,与对照组和输液组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组和输液组大鼠术后3,5,7d移植肠组织病理学检查分别符合轻、中、重度排斥反应。他克莫司治疗组大鼠术后3,5,7d未见明显排斥反应征象。结论:旋转持续静脉输液装置制作简单,固定安全可靠,能成功地为研究大鼠连续输液30d以上,与异位小肠移植模型联合应用,能建立稳定可靠的排斥反应模
- 杨建军李孟彬王为忠王映梅张洪伟
- 关键词:输液装置小肠移植物排斥全胃肠外营养
- 力肽及精氨酸在大鼠移植肠缺血再灌注损伤治疗中的作用被引量:13
- 2002年
- 目的 探讨 L -精氨酸 (L - Arginine,L - Arg)和力肽在大鼠小肠移植 (small bowel transplantation,SBT)缺血再灌注损伤中的治疗作用和协同效应 .方法 将 6 4只大鼠随机分为 4组 ,对照组 (n=16 )行虚拟手术 ,给予普通饲料喂养 ;s TPN组 (n=16 )行同系小肠移植 (syngeneic SBT) ,接受传统的肠外营养 ;d TPN组 (n=16 )行同系小肠移植 ,接受力肽强化的全胃肠外营养 (total parenteral nutrition,TPN) ;a TPN组 (n=16 )行小肠移植 ,给予加用 L - Arg和力肽的肠外营养 .各组于术后 2 0 m in和术后 8d(POD8)取材 .结果 小肠移植术后 2 0 min,移植肠中度缺血再灌注损伤表现 ,移植肠粘膜一氧化氮 (nitric oxid,NO)水平降低 ,丙二醛 (malondialde-hyde,MDA)含量升高 .术后 8d,a TPN组移植肠粘膜 NO水平高于对照组及 d TPN组 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ,d TPN组及 a TPN组移植肠粘膜谷氨酰胺 (glutamine,Gln)含量均高于 s TPN组 (P<0 .0 1,P<0 .0 1) ,a TPN组较显著 ;d TPN组及 a TPN组移植肠的绒毛高度、粘膜厚度均明显大于 s TPN组 .结论 大鼠在接受同系异体小肠移植术后 ,力肽强化的肠外营养液可促进移植小肠粘膜结构的修复 ,L- Arg可增强力肽对移植肠粘膜修复的作用 .
- 李孟彬王为忠李开宗张溪宋维亮罗兰
- 关键词:小肠移植L-精氨酸力肽全胃肠外营养