国家自然科学基金(30070748) 作品数:13 被引量:105 H指数:6 相关作者: 连锋 朱洪生 朱伟 郑家豪 黄日太 更多>> 相关机构: 上海第二医科大学附属仁济医院 江苏大学 上海交通大学医学院附属仁济医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 上海市科学技术委员会资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
骨髓间质干细胞移植对梗死心肌的影响 2006年 目的探讨自体骨髓间质干细胞移植对梗死心肌基本结构及心肌收缩力的影响。方法贵州香猪24只,随机分为对照组和实验组,每组12只。抽取骨髓3 mL,按照W ak itan i方法培养出骨髓间质干细胞,经5-氮胞苷诱导后,5-溴脱氧尿苷标记备用。开胸结扎左冠状动脉前降支后,实验组第三代自体骨髓间质干细胞分别注射至结扎的左冠状动脉前降支和远端多点注入急性心肌梗死区域;对照组以同样方法注射DMEM。术后3、6周取标本,组织切片染色,观察组织基本结构;体外药物刺激离体肌条,检测心肌收缩情况。结果VG染色显示实验组胶原纤维融合较少,组织结构排列基本处于有序状态。实验组心肌收缩力明显高于对照组(P<0.001),且随时间推移恢复程度增加(P<0.05)。结论自体骨髓间质干细胞梗死心肌移植可以增加心肌细胞的收缩力,调节组织内胶原纤维的含量和组成,防止心室重构,从而起到对心肌基本结构的保护作用。 连锋 朱洪生 薛松 吴学军 张谷兰 王小妹关键词:骨髓间质干细胞 心肌梗死 胶原纤维 心肌收缩力 骨髓间质干细胞移植 骨髓间质干细胞体外转化为肌细胞的研究 被引量:17 2002年 目的 采用骨髓间质干细胞 (MSCs)体外转化为肌细胞 ,为心衰的干细胞移植治疗提供新的细胞材料。方法 抽取贵州香猪骨髓液 3ml,按照Wakitani的方法培养骨髓间质干细胞 ,经5 氮胞苷 (5 azacytidine)刺激 2 4h后 ,进行结蛋白 (desmin) ,肌球蛋白重链 (MHC)免疫组织化学 ,透射电镜鉴定。结果 骨髓间质干细胞经 5 aza刺激后 ,部分细胞呈梭形 ,结蛋白 ,肌球蛋白重链阳性 ,有多核肌管形成 ,透射电镜可见明显的肌丝形成。结论 骨髓间质干细胞可在体外的环境下向肌细胞转化 。 连锋 朱洪生 郑家豪 朱伟 钟竑 郑林 朱平 张丽敏关键词:骨髓细胞 肌纤维 结蛋白 肌球蛋白重链 猪骨髓间质干细胞体外分离,培养鉴定及向肌细胞转化的探索 被引量:6 2003年 为建立一种稳定的体外分离,培养及鉴定自体骨髓间质干细胞的方法,抽取贵州香猪骨髓液3ml,以1×106细胞浓度培养,2 d后得到贴壁生长的细胞,约10 d后进行传代培养,传代周期约为5-7 d。选原代及10次传代后的贴壁细胞向成骨细胞及肌细胞转化。原代及传代培养的贴壁细胞为纺锤形细胞。两种细胞在体外特殊诱导环境下可定向分化为成骨细胞及肌细胞。通过本方法培养得到的细胞经长期传代后仍具有多能转化活性,确系骨髓间质干细胞。 连锋 朱洪生 朱伟 钟竑 郑林关键词:骨髓间质干细胞 体外分离 骨髓间质干细胞移植对香猪急性心肌梗死后心肌结构和心功能的影响 被引量:12 2004年 目的 移植自体骨髓间质干细胞 ( BMSCs)到香猪急性心肌梗死区内 ,研究移植 BMSCs对心肌结构和心功能的影响。 方法 将 2 4只贵州香猪采用计算器随机法分为实验组 ( n=12 )和对照组 ( n=12 ) ,抽取香猪自体骨髓 ,经体外分离出 BMSCs并培养和经 5 -氮胞苷 ( 5 - azacytidine)转化 ,利用结扎左前降支 ( L AD)的方法建立急性心肌梗死动物模型 ,经 L AD和梗死区多点注射的方法将实验组香猪注射 BMSCs(细胞总数 2× 10 6 个 ) ,对照组注射等量的细胞培养液。 3周和 6周后 ,用超声心动图 ( UCG)观察两组移植后心肌结构和心功能改变的情况。 结果 实验组左心室射血分数、左心室短轴缩短率和室壁增厚率明显高于对照组 ;左心室室壁、室间隔厚度和心室腔的大小在两组之间也存在明显差别 ,实验组室壁和室间隔厚度明显大于对照组 ,而心室腔小于对照组。 结论 BMSCs梗死区心肌移植后可减轻心室重构的进程 ,减轻心肌的变薄程度 ,使心室腔未明显扩大。 BMSCs移植还可增加心肌的收缩力 。 朱洪生 黄日太 连锋 陶如琦 郑家豪关键词:骨髓间质干细胞 细胞移植 香猪 急性心肌梗死 心肌结构 BMSCS 骨髓间质干细胞诱导为神经细胞的研究进展 被引量:5 2002年 孙晓春 姚堃 许文荣关键词:骨髓 间质干细胞 神经细胞 骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞的实验研究 被引量:24 2002年 目的采用骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞 ,为心衰的干细胞移植治疗提供新的细胞材料。 方法抽取贵州香猪骨髓液 3ml,按照Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞 ,经 5 -氮胞苷刺激 2 4h后 ,进行结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ、连接蛋白 - 4 3免疫组化 ,电镜鉴定。 结果骨髓间质干细胞经 5 -氮胞苷刺激后 ,部分细胞呈梭形 ,结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ、连接蛋白 - 4 3免疫组化阳性 ,电镜示梭形细胞有明显的肌丝 ,细胞核呈单椭圆形 ,位于细胞中央。 结论骨髓间质干细胞可在体外的环境下向心肌细胞转化 。 朱洪生 连锋 朱伟 钟竑 郑林 朱平关键词:骨髓间质干细胞 体外转化 心肌细胞 肌球蛋白重链 骨髓间质干细胞在梗死心肌移植后心肌再生的实验研究 被引量:1 2006年 目的:研究骨髓间质干细胞在梗死心肌移植后的心肌再生作用。方法:贵州香猪24只,随机分为对照组(C组),实验组(E组)。抽取骨髓液3m l,按照W ak itan i的方法培养出骨髓间质干细胞,经5-氮胞苷诱导后,B rdU标记备用。开胸结扎冠状动脉前降支,自体骨髓间质干细胞分别经局部注射和结扎的左冠状动脉前降支远端灌注移植入自体急性心肌梗死区域,C组以DMEM对照。术后3,6周取心肌标本行免疫组化、电镜检测。结果:梗死区域可观察到标记的骨髓间质干细胞,这些细胞能表达肌球蛋白重链(MHC),缝隙连接蛋白-43(Cx-43),心肌特异性肌钙蛋白I(cTnT I),电镜下有肌丝形成。结论:骨髓间质干细胞在梗死心肌内移植具有分化再生的能力。 连锋 朱洪生 薛松 吴学军 张谷兰 王小妹关键词:骨髓间质干细胞 心肌梗死 细胞移植 心肌再生 移植途径对骨髓间质干细胞梗死心肌移植疗效的影响 2009年 目的探讨自体骨髓间质干细胞(MSCs)不同移植途径对梗死心肌心肌收缩力、血管新生及胶原更新的影响。方法贵州香猪32只,随机分为对照组(C组)、冠状动脉移植组(A组)、局部注射组(T组)、局部注射+动脉移植组(A+T组)。抽取骨髓3ml,按照Wakitani方法培养出MSCs,经5-氮胞苷诱导后,5-溴脱氧尿苷(Brdu)标记备用。开胸结扎左冠状动脉前降支后,自体MSCs分别经结扎前降支远端灌注、局部注射、局部注射+动脉灌注移植入自体急性心肌梗死区域,对照组以同样方法注射不含细胞的等量培养液(DMEM)。术后3、6周取标本,免疫组化检测组织血管新生、体外药物刺激离体肌条检测心肌收缩情况和血浆Ⅲ型胶原N端肽(PinNP)活性。结果MSCs移植后3周A、T、A+T组心肌收缩恢复[(48.6±5.9)%,(42.1±6.2)%,(56.9±5.1)%]、血管新生(19.6±4.3,17.1±4.0,23.2±5.5)、血浆PⅢNP活性[(4.6±0.5)μg/L,(5.9±0.7)μg/L,(3.9±0.3)μg/L]较C组[(37.9±5.4)%,13.2±3.8,(8.7±0.8)μg/L]明显改善(P均〈0.01),且随时间推移恢复程度增加,以A+T组为最显著(P均〈0.05)。结论局部注射+冠状动脉灌注是较为理想的MSCs移植方式。 连锋 薛松 吴学军 张谷兰 王小妹 朱洪生关键词:骨髓间质干细胞 心肌梗死 骨髓间质干细胞移植对心肌再生的影响 被引量:1 2005年 目的研究移植骨髓间质干细胞(MSCs)对梗死区心肌和血管再生的影响。方法抽取香猪骨髓,体外分离MSCs,经5-氮胞苷(5-aza)转化。结扎冠状动脉左前降支(LAD),经LAD和梗死区注射MSCs;对照组注射培养液。3周和6周后,行单光子发射型计算机断层(SPECT)心肌显像检查。结果SPECT显像,对照组心肌有明显的充盈缺损;实验组细胞移植3周后在梗死区内有岛状的灌注显像区,6周后这些区域相互之间以及与正常心肌之间发生融合。心肌灌注显像,实验组评分高于对照组(P<0.01)。结论MSC移植可再生心肌组织和血管。经LAD注射结合多点局部注射的方法可使移植细胞均匀分布于整个心梗区,促进再生的心肌组织与宿主心肌组织之间产生融合。 黄日太 朱洪生 连锋 郑家豪 黄钢 刘建军关键词:骨髓间质干细胞移植 单光子发射型计算机断层 5-氮胞苷 显像检查 正常心肌 移植细胞 骨髓间质干细胞移植梗死心肌后细胞因子分泌及对血管新生的影响 被引量:10 2004年 目的 研究骨髓间质干细胞 (MSCs)移植梗死心肌后细胞因子的分泌及其对血管新生的作用。 方法 贵州香猪 2 4只 ,按照计算器随机数法随机分为对照组、实验组。抽取骨髓液 3ml,按照 Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞 ,经 5 -氮胞苷 (5 - aza)诱导后 ,5 -溴脱氧尿苷 (Brd U)标记备用。开胸结扎左冠状动脉前降支 ,自体骨髓间质干细胞分别经局部注射和结扎的左冠状动脉前降支远端灌注移植入自体急性心肌梗死区域 ,对照组以 DMEM作对照。术后 3周、6周取标本 ,免疫组织化学法、计算机图象分析检测组织血管内皮生长因子 (VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)和 因子表达。 结果 实验组梗死区 3周、6周 b FGF、VEGF灰度值明显高于对照组 (P<0 .0 1) ,微血管计数明显增多 (P<0 .0 1)。 结论 自体骨髓间质干细胞移植梗死心肌后能分泌 VEGF、b FGF,诱导血管新生。 连锋 朱洪生 黄日太 郑家豪 吴学军 张谷兰 王小妹关键词:骨髓间质干细胞移植 心肌梗死 细胞因子 血管新生