黑龙江省卫生厅科研项目(2006-360)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：张宇雯肇晓光刘兴汉董兴丽马洪星更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学哈尔滨医科大学附属第五医院大庆油田总医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 抗菌肽SMAP-29衍生物的原核表达及纯化被引量：3
- 2008年
- 目的利用大肠杆菌表达系统表达具有抗菌活性的SMAP-29衍生物,一步亲和层析法进行纯化。方法化学合成经改造的抗菌肽SMAP-29衍生物,纸片扩散法检测抗菌活性后,人工并用合成抗菌肽SMAP-29衍生物基因序列,克隆到表达载体pTYB11上,转化大肠埃希菌BL-21(DE3),酶切和测序鉴定后,用异硫代β-D-半乳糖昔(isopropylβ-D-thiogalactoside IPTG)诱导表达融合蛋白。经几丁质亲和层析柱纯化。结果化学合成的抗菌肽SMAP-29衍生物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌具有一定的抑菌作用,SMAP-29衍生物的编码基因按正确方向和序列插入表达载体,融合蛋白的表达量达到大肠杆菌蛋白总量的40%,几丁质亲和层析后获得了可溶性SMAP-29衍生物。结论成功构建了以融合蛋白形式表达的抗菌肽SMAP-29衍生物大肠杆菌基因工程菌,克服了抗菌肽对宿主菌的毒性,实现了用大肠杆菌高效表达和一步亲和层析纯化,为进一步检测活性及临床应用奠定了基础。
- 肇晓光马洪星张宇雯董兴丽刘兴汉
- 关键词：抗菌肽原核表达纯化
