国家自然科学基金(30070732)
- 作品数:6 被引量:6H指数:2
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- 相关机构:四川大学华西医院川北医学院附属医院四川省卫生管理干部学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
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- 果蝇晚三龄幼虫脑神经元的快速分离与鉴定被引量:4
- 2006年
- 目的探索果蝇晚三龄幼虫脑神经元急性分离的新方法,并对分离制备的脑细胞进行形态学观察和电生理学记录。方法解剖果蝇晚三龄幼虫脑组织,用胶原酶化学消化并辅以机械微振荡法分离制备单个细胞,用果蝇细胞培养液适当孵育。在倒置相差显微镜下对其进行形态学观察和分类,结合全细胞膜片钳技术对其电生理学特征进行初步研究。结果成功制备出三类大小和形态各异、活性较好的果蝇脑神经元,未见神经胶质细胞;以三型细胞为电生理学研究对象,记录到五种类型的全细胞外向钾电流。结论新建立的果蝇晚三龄幼虫脑细胞急性分离方法简便易行,稳定可靠。
- 刘洋廖大清罗南富张贞雄刘进
- 关键词:果蝇脑神经元急性分离膜片钳
- 果蝇中枢神经元胰蛋白酶急性分离方法被引量:2
- 2006年
- 目的:探索果蝇脑神经元胰蛋白酶急性分离的新方法。方法:解剖果蝇晚三龄幼虫脑组织,用胰蛋白酶化学消化并辅以机械微振荡法分离制备单个细胞,用果蝇细胞培养液适当孵育。在倒置相差显微镜下对其进行形态学观察和分类,结合全细胞膜片钳技术对其电生理学特性进行初步研究。结果:该方法成功制备出三类大小和形态各异、活性较好的果蝇脑神经元,未见神经胶质细胞;以三型细胞为电生理学研究对象,记录到五种类型的全细胞外向钾电流。结论:我们建立的果蝇晚三龄幼虫脑细胞急性分离方法简便易行,稳定可靠。
- 刘洋罗南富廖大清张贞雄李良文刘进
- 关键词:果蝇神经元急性分离膜片钳
- 对吸入麻醉药敏感性不同的果蝇幼虫脑神经元钙激活钾电流的研究被引量:1
- 2007年
- 目的神经元的兴奋性受钙激活钾电流(IKCa)调节,利用膜片钳技术,研究对吸入麻醉药具有不同敏感性的果蝇幼虫脑神经元的IKCa。方法分离制备对吸入麻醉药敏感(S)、耐药(R)和野生(H)果蝇品系脑神经元,以膜片钳技术记录其全细胞IKCa。结果在果蝇晚三龄幼虫脑神经元上只记录到外向钾电流,未见其他电流成分。三品系脑神经元膜电容(细胞大小)差异无显著性(P>0.05),而全细胞IKCa峰值差异有显著性:耐药>野生>敏感(P<0.05)。结论果蝇幼虫脑神经元IKCa峰值在三品系之间差异有显著性,这种差异可能解释三品系果蝇的不同耐药特性。
- 刘洋倪锦罗南富廖大清刘进
- 关键词:果蝇膜片钳钙激活钾电流作用位点
- 七氟醚对吸入麻醉药敏感性不同的果蝇幼虫中枢神经元钾通道的影响被引量:1
- 2010年
- 目的以钾通道为切入点,利用膜片钳技术探讨吸入麻醉药的作用机制。方法分离制备对吸入麻醉药敏感(S)、耐药(R)和野生(H)果蝇品系脑神经元,以膜片钳技术观察临床有效浓度七氟醚对其全细胞钾电流的影响。结果1MAC七氟醚使三品系Ⅲ型钾电流的Ipeak值显著增加:S(19±2)%>H(13±2)%>R(8±2)%;使钾电流的恢复曲线显著上移;不改变钾离子的平衡电位。2MAC七氟醚使三品系Ⅲ型钾电流的Ipeak值显著增加:S(36±4)%>H(24±2)%>R(14±1)%。3MAC的七氟醚能使Ⅲ型钾电流稳态失活曲线显著右移。结论钾离子通道可能是吸入麻醉药的中枢作用位点之一。
- 刘洋廖大清罗南富刘进
- 关键词:七氟醚果蝇钾电流
- 对吸入麻醉药敏感性不同的果蝇脑神经元钾电流的研究
- 2006年
- 目的:以对吸入麻醉药具有不同敏感性的果蝇幼虫脑神经元为模型,利用膜片钳技术记录其钾电流,探讨吸入麻醉药的作用机制。方法:分离制备对吸入麻醉药敏感(S)、耐药(R)和野生(H)果蝇品系脑神经元,以膜片钳技术记录其全细胞钾电流。实验数据以“均数±标准差”表示,SPSS软件进行统计分析。结果:在果蝇晚三龄幼虫脑神经元上只记录到外向钾电流,未见其它电流成分。三品系脑神经元大小(细胞膜电容)没有显著性差异(P>0.05),而电流峰值有显著性差异:敏感>野生>耐药(P<0.05)。结论:钾通道可能是吸入麻醉药的中枢作用位点之一。
- 刘洋李彩群廖大清刘进
- 关键词:果蝇膜片钳钾通道电流
- 对吸入麻醉药敏感性不同的果蝇幼虫中枢神经元钾通道的研究被引量:1
- 2008年
- 目的以果蝇为动物模型,利用膜片钳技术探讨钾通道在吸入麻醉药作用机制中的地位。方法以酶解和血清孵育的方法分离制备敏感(S)、野生(H)和对七氟醚耐药(R)果蝇晚三龄幼虫脑神经元,以膜片钳技术记录其全细胞钾电流,并对电流进行单、双指数拟合,根据失活时间常数和电流幅值大小,将钾电流分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ型。结果三品系中,Ⅰ和Ⅱ型钾电流的峰值电流(Ipeak)和失活时间常数(τ1)差异无统计学意义;Ⅲ和Ⅳ型钾电流的Ipeak差异有统计学意义(P<0.05):S>H>R;Ⅳ型钾电流τ1差异有统计学意义(P<0.05):S=H>R;Ⅴ型钾电流(钙激活钾电流)的Ipeak差异有统计学意义(P<0.05):R>H>S。结论钾通道可能是吸入麻醉药七氟醚的中枢作用位点之一。
- 刘洋刘洋罗南富廖大清
- 关键词:果蝇膜片钳技术钾通道吸入麻醉药