黑龙江省自然科学基金(200927)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 相关作者：李海涛杨秀芹翟春媛牛艳春李金铃更多>>
- 相关机构：东北农业大学黑龙江省农业科学院东北林业大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪TLR4基因的变异位点分析被引量：6
- 2011年
- Toll样受体4(TLR4)主要识别革兰氏阴性菌表面的脂多糖,其基因变异可能改变宿主对脂多糖(LPS)的免疫反应。研究利用克隆、测序的方法在TLR4基因的外显子3寻找变异位点,并利用PCR-SSCP方法对寻找到的部分错义突变进行群体遗传学分析,确定不同基因型在猪种间的分布规律。结果表明:共寻找到11个点突变,其中8个是错义突变,分别导致蛋白质多肽链141、168、204、321、343、516、535、567位氨基酸发生了L/Q、P/L、L/H、R/H、Q/K、F/S、L/F、L/P替代;对其中3个错义突变位点(611 bp、962 bp、1 027 bp)的群体遗传学分析表明,在各多态位点,基因型的分布在野猪、北京黑猪、民猪、杜洛克、长白猪和大白猪6个中外猪种间存在极显著差异(P<0.01)。
- 翟春媛杨秀芹李海涛李金铃刘娣
- 关键词：PCR-SSCP
- 猪TLR3基因A1116T点突变功能初步分析被引量：2
- 2011年
- 为了确定猪TLR3基因A1116T错义突变的生物学效应,研究其与猪疾病抗性/易感性的关系,本研究采用重叠延伸PCR和定点突变技术构建不同等位基因的真核表达载体,采用双荧光素酶检测分析系统及Real-timePCR方法在体外培养的细胞中研究不同等位基因在信号转导中的作用。成功地构建了野生型和突变型TLR3的真核表达载体,双荧光素酶检测分析表明突变型活化转录因子NF-κB、激活ISRE的能力都减弱;Real-time PCR分析表明突变型诱导转录IL-6的能力下降。结果表明该点突变影响猪TLR3的信号转导能力。
- 邢明伟翟春媛李海涛杨秀芹
- 关键词：突变信号转导
- 民猪、长白猪TLR5基因变异的比较分析被引量：1
- 2012年
- 为了进一步研究Toll样受体5(TLR5)基因与疾病抗性/易感性的关系,试验以抗病性具有明显差异的民猪和长白猪为试验材料,采用PCR产物直接测序的方法,比较分析TLR5基因的变异情况。结果表明:猪TLR5 c.834 T>G点突变在2个品种间的分布具有极显著差异(P<0.01),民猪以G为优势等位基因,长白猪以T为优势等位基因,在该群体中没有发现GG纯合体。TLR5 c.834 T>G点突变很可能与民猪抗病性强有关。
- 杨秀芹牛艳春李海涛刘娣
- 关键词：民猪长白猪基因变异
- 猪TLR4基因可变剪接体的鉴定被引量：6
- 2011年
- 为合理、有效地利用民猪资源进行抗病育种,本研究利用重叠延伸RT-PCR结合巢式PCR法扩增民猪TLR4基因,寻找可变剪接体;利用竞争性RT-PCR方法研究各可变剪接体的组织表达情况。获得了猪TLR4基因3个可变剪接体(其中2个是未见报道的),并且鉴定出一类特殊的剪接模式——外显子内部的部分片段被单独剪除,该类型在动物中尚属首次发现;组织表达分析表明3个可变剪接体普遍表达。TLR4基因存在着复杂的剪接机制,也暗示着其功能的复杂性。
- 杨秀芹翟春媛李海涛刘娣
- 关键词：民猪可变剪接
- 野猪Toll样受体基因的结构和功能鉴定被引量：1
- 2011年
- Toll样受体（Toll-like receptors,TLRs）是介导天然免疫和获得性免疫的病原模式识别受体（Pattern recognition receptor,PRRs）,能识别表达在病原微生物上高度保守的病原相关分子模式（Pathogen associated molecular patterns,PAMPs）,并通过一定的信号转导途径引起核内相关基因的表达,启动和调节机体的免疫反应。
- 杨秀芹李海涛徐扬翟春媛马建章刘娣
- 关键词：野猪克隆
- 猪TLR5基因定点突变表达载体构建被引量：1
- 2012年
- TLR5特异识别细菌鞭毛蛋白,在机体免疫反应中发挥重要作用,人TLR5基因突变能影响蛋白功能并与一些疾病的易感性密切相关。研究采用RT-PCR方法克隆了猪TLR5基因的全长编码区;采用PCR介导的定点突变技术得到该基因137(G/A)和1205(C/T)位点突变的两个变异体;以pcDNA3.1+为载体成功构建野生型(TLR5-WT-pcDNA3.1+)和突变型(TLR5-G137A-pcDNA3.1+和TLR5-C1205T-pcDNA3.1+)真核表达重组质粒。研究结果可为下一步细胞水平上的突变功能分析提供基础。
- 李海涛陈月婵牛艳春李朋刘娣杨秀芹
- 关键词：定点突变真核表达载体
