吉林省重大科技攻关项目(200402032222)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 植物防御素D1基因玉米种子特异表达载体构建及在玉米中的转化
- 作物病害多达数百种,几乎所有作物在生长期内都会遭到不同程度的危害,培育抗病新品种是防治植物病害的根本途径。抗菌肽(antibacterial peptides)是生物体产生的一类具有强抗菌作用的阳离子多肽,是生物先天免疫...
- 王俊玲王巍王丕武
- 文献传递
- 酸性蛋白酶pepB基因植物表达载体的构建及在玉米中的转化
- 酶制剂作为一种无毒无任何副作用的绿色饲料添加剂,其应用正越来越广泛,有些营养学家甚至认为酶制剂应该作为家禽日粮的必不可少的组成成分。酸性蛋白酶是一类能够在微酸条件下水解动植物蛋白质的蛋白水解酶,由于其最佳反应PH较低(1...
- 王巍王俊玲王丕武
- 文献传递
- 酸性蛋白酶pepB基因植物表达载体的构建及在玉米中的转化被引量：2
- 2009年
- 以黑曲霉基因组DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增了酸性蛋白酶pepB基因序列,并将其克隆到pMD18-TVector上,对重组子进行了PCR检测和限制性内切酶分析并测序。DNA序列分析表明:克隆片段长为1340bp,与已发表的pepB基因序列同源性达99.85%。将pepB基因片段插入到带有耐盐基因的表达载体pCAMBIA1301-BADH上,构建了无抗生素选择标记的重组质粒pB-pepB-35S,从而得到了植物表达载体,该载体利用耐盐基因BADH替代抗生素基因作为筛选标记。通过花粉管通道法将其导入玉米自交系,获得了转基因植株,并得到了转化植株的种子。
- 王巍王丕武王俊玲付永平兰磊杨金慧
- 关键词：玉米基因转化
- 植物防御素D1基因种子特异表达载体构建及在玉米中的转化被引量：1
- 2010年
- 以绿豆基因组DNA为模板,通过PCR技术扩增了绿豆防御素D1基因序列,与GenBank中绿豆防御素基因的相应片段有99.08%同源性,克隆片段长为355bp。将种子特异启动子sbeIIb和D1基因插入到带有耐盐基因的表达载体pCAMBIA1301-BADH中,构建了无抗生素选择标记的种子特异表达载体pSBEIIb-D-B,该载体是利用耐盐基因BADH替代抗生素基因作为筛选标记,消除了对环境及肠道微生物的潜在威胁。将该载体利用超声波辅助农杆菌介导法转化了2个玉米自交系丹598、988的愈伤组织,经分化诱导出苗后进行PCR检测,证明得到转基因阳性植株,相对转化率最高达到7.8%。
- 王俊玲王丕武王巍付永平马建兰磊牛亚玲
- 关键词：玉米防御素表达载体构建转基因技术
