浙江省科技厅国际合作项目(2008C14G2150010)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：谭晓华杨磊狄春红陈佳红陈彬更多>>
- 相关机构：杭州师范大学石河子大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅国际合作项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 细胞穿膜肽pep-1与vMIP-Ⅱ的融合表达与纯化被引量：4
- 2010年
- 细胞穿膜肽是一类能携带大分子物质进入细胞的短肽,其穿膜能力不依赖经典的胞吞作用。本研究构建了含有细胞穿膜肽pep-1和病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ(viral macrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)的融合表达质粒pET15b-pep-1-vMIP-Ⅱ,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS中经IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定出可溶性的融合蛋白pep-1-vMIP-Ⅱ。通过对IPTG浓度、温度等诱导表达条件进行优化,确定在IPTG浓度为0.2mmol/L、28℃下诱导7h可溶性蛋白的表达量相对较高,经Ni-NTA亲和层析,超滤除盐纯化获得高纯度的融合蛋白pep-1-vMIP-Ⅱ,将该蛋白作用于Hela细胞,激光共聚焦显微镜观察结果显示该融合蛋白能够携带目的基因穿透细胞膜。本文结果将为进一步研究vMIP-Ⅱ的功能和细胞穿膜肽技术的应用奠定基础。
- 罗燕谭晓华狄春红程建兵陈佳红杨磊
- 关键词：PEP-1原核表达
- RNA干扰和HIV-1被引量：1
- 2010年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指由短双链RNA诱导的同源RNA降解过程或者是指诱导DNA甲基化的方式对其同源序列的基因表达进行干涉的过程。传统观念认为,这种现象发生在转录后水平又称为转录后基因沉默(post-transcriptional gene silence,PTGS)。然而,最近研究表明,干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)是一些甲基化转移酶活化的起始信号,能在转录水平调控(沉默)基因的表达(transcriptional gene silence,TGS)。该机制广泛存在于从酵母到哺乳动物的细胞中,能调节多种生物学的过程。新近的研究表明细胞和病毒miRNA(vmiRNA)都能调节病毒的复制;还有研究表明有些病毒,比如HIV-1,可以直接调控细胞内的RNA干扰的能力。RNA干扰有可能成为一种新的防治HIV-1感染的基因治疗方法,本文就RNA干扰作用机制以及在HIV-1感染方面的应用进行综述。
- 陈彬杨磊谭晓华
- 关键词：HIV-1小干扰RNARNA干扰微小RNA甲基化
