国家林业局948项目(2011-Z11)
- 作品数:5 被引量:6H指数:2
- 相关作者:龚晖池洪树柯翎刘晓东林天龙更多>>
- 相关机构:福建省农业科学院福建农林大学中山大学更多>>
- 发文基金:引进国际先进农业科技计划福建省自然科学基金福建省财政专项“福建省农业科学院科技创新团队建设基金”更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 小瓜虫疫苗研究进展及突破方向——访美小瓜虫研究机构思考被引量:2
- 2012年
- 小瓜虫病是世界范围内严重危害淡水养殖鱼类的主要寄生虫病。美国农业部水生动物健康研究所、佐治亚大学兽医学院和康奈尔大学兽医学院3家研究机构在鱼类小瓜虫病及疫苗研究方面走在世界前列。为提升我国鱼类寄生虫研究水平,我们访问了此3家小瓜虫病研究机构,并与美国小瓜虫研究学者进行了交流。在总结了访美收获的基础上,介绍了小瓜虫的研究进展,并就我国小瓜虫疫苗研究需要的科研设施建设、突破的主攻方向及国内外合作提出了建议。
- 潘厚军林天龙李安兴赵飞吴淑勤
- 关键词:小瓜虫病疫苗
- 刺激隐核虫在褐牙鲆上的传代及其生活史观察被引量:1
- 2014年
- 为保存从福建省长乐市褐牙鲆上分离的刺激隐核虫,并了解其生物学特性,以褐牙鲆为宿主鱼,在水温22~24℃时,对刺激隐核虫进行传代,详细观察其生活史及各阶段的形态结构,比较不同温度处理的包囊孵化率和孵出幼虫的感染能力,分别采集感染后2周和4周的褐牙鲆血清做阻动试验.目前已成功进行了40个周期的刺激隐核虫传代保种,每个周期8~10 d,表明褐牙鲆可作为刺激隐核虫的模式宿主鱼.观察包囊的形态结构,发现少数包囊中存在疑似滋养体并做旋转运动的圆形原生质体.包囊5℃冷藏2个月后刺激隐核虫的孵化率下降至7.6%,用1 000个5℃冷藏后孵化的幼虫感染褐牙鲆,未检出滋养体.免疫血清阻动试验表明,感染后2周和4周的褐牙鲆血清对幼虫的阻动效价分别为1∶320和1∶1 280,说明体液免疫在抵抗刺激隐核虫的感染中发挥了重要作用.
- 池洪树龚晖柯翎刘晓东林天龙
- 关键词:刺激隐核虫褐牙鲆传代鱼类免疫
- 刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备与特性分析
- 2017年
- 为获得刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体并初步分析单抗特性,提取刺激隐核虫幼虫膜蛋白,免疫Balb/c小鼠,取脾细胞与SP2/O细胞融合,以间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞。通过ELISA方法检测单克隆抗体的亚类及效价;通过SDS-PAGE和western blot分析单抗特异性结合的蛋白,并以串联质谱方法对所识别条带进行鉴定;采用免疫荧光法分析单抗的抗原结合位点和特异性。结果得到3株能稳定分泌刺激隐核虫幼虫膜蛋白抗体的细胞株(5D11AG5、5H9BG3、6E11CE7)。这3株细胞株产生的抗体亚型均为IgM,ELISA效价分别为1∶3200、1∶25600、1∶51200。单抗5D11AG5和单抗5H9BG3株能够识别~35kDa的刺激隐核虫幼虫膜蛋白线性抗原表位,单抗5D11AG5所识别的蛋白与数据库中刺激隐核虫表面抗原蛋白、嗜热四膜虫微管蛋白(tubulin)的肽段具有较高覆盖率。免疫荧光结果显示单抗5D11AG5和单抗5H9DG3识别部位主要在虫体表面近胞口的前端,而单抗6E11CE7识别虫体表面外膜。刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体的制备,为刺激隐核虫功能性蛋白的筛选、纯化和功能分析提供了条件。
- 池洪树刘晓东郑在予龚晖柯巧珍林能锋
- 关键词:刺激隐核虫幼虫膜蛋白单克隆抗体白点病
- 3株刺激隐核虫的ITS-1序列与部分HSP70序列分析被引量:3
- 2013年
- 经形态学观察,初步判断从福建长乐、福鼎和宁德三都澳三地患“白点病”的牙鲆、青石斑鱼、大黄鱼鱼鳃和体表上分离收集的寄生虫为刺激隐核虫Cryptocaryon irritans Brown。提取基因组DNA,对ITS-1序列进行PCR扩增、克隆、测序和序列分析,结果显示:3株刺激隐核虫的ITS-1序列完全一致,与广东番禺PYH4.12株(DQ270010)、日本Wakayama分离株(AB608054)、台湾嘉义Chiayi株(AF490381)等序列同源性为100%,与NCBI数据库中其他刺激隐核虫分离株的ITS-1序列的同源性为90.62%~99.22%,可以鉴定3株虫均为刺激隐核虫。进一步对刺隐核虫HSP70基因部分序列进行PCR扩增和序列分析,结果显示:3株虫间序列差异很小,说明福建省不同养殖模式、不同宿主得到的刺激隐核虫高度同源。
- 池洪树刘晓东柯翎龚晖
- 关键词:刺激隐核虫ITS白点病HSP70
- 刺激隐核虫抑动抗原生物学信息及抗原特性分析被引量:1
- 2014年
- 对刺激隐核虫抑动抗原基因进行生物学信息分析,利用抗原表位多肽制备了鼠源抗抑动抗原抗体,并研究其抗原特性。试验结果表明:利用表位串联多肽所制备的鼠源抗抑动抗原抗体包含有针对刺激隐核虫抑动抗原的特异性抗体,为刺激隐核虫单克隆抗体和疫苗的制备奠定了基础。
- 柯翎池洪树龚晖
- 关键词:刺激隐核虫抗体