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辽宁省烟草专卖局科技攻关项目(无)
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1
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相关作者:
李颖
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安梦楠
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李颖
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中国烟草科学
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2013
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烟草抗PVY^N突变株SN01的SRAP-PCR反应体系的建立与优化
2013年
采用正交试验对烟草抗PVYN突变株SN01幼嫩叶片的SRAP-PCR反应体系中5个主要因素(dNTPs、Mg2+、Taq DNA聚合酶、引物和DNA)进行了优化以建立合适的SRAP反应体系。结果表明,在20μL的反应体系中,各因素的最佳加入量分别是:dNTPs(2.5 mmol/L)3.2μL、Mg2+(25 mmol/L)1.6μL、Taq DNA聚合酶(2.5 U/μL)0.16μL、引物(10μmol/L)0.6μL、DNA模板120 ng。对该SRAP-PCR反应程序中的退火温度和循环次数筛选表明,最佳退火温度为57℃,循环次数为35次。该优化体系的建立,为进一步对烟草抗PVYN突变株SN01的抗病基因研究提供了可靠基础。
李杰
朱丹
李颖
安梦楠
赵秀香
吴元华
关键词:
烟草
SRAP-PCR
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