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国家自然科学基金(30560104)

作品数：13 被引量：66H指数：5
相关作者：冉雪琴王嘉福杜智勇林尖兵覃成更多>>
相关机构：贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室黔东南民族职业技术学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金贵州省优秀青年科技人才计划贵州省科技厅农业攻关项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 12篇农业科学
  • 3篇生物学

主题

  • 9篇基因
  • 6篇山羊
  • 5篇贵州白山羊
  • 5篇白山羊
  • 3篇多态
  • 3篇多态性
  • 3篇基因多态性
  • 3篇BMP15
  • 3篇GDF9
  • 3篇GDF9基因
  • 2篇蛋白
  • 2篇香猪
  • 2篇激素
  • 2篇繁殖
  • 2篇SSCP
  • 2篇BMP15基...
  • 1篇凋亡
  • 1篇凋亡蛋白
  • 1篇痘病
  • 1篇痘病毒

机构

  • 13篇贵州大学
  • 2篇贵州省农业生...
  • 1篇黔东南民族职...

作者

  • 13篇王嘉福
  • 13篇冉雪琴
  • 3篇覃成
  • 3篇林尖兵
  • 3篇杜智勇
  • 2篇周泽晓
  • 2篇李景
  • 1篇吴拥军
  • 1篇王红珍
  • 1篇代新兰
  • 1篇关会敏
  • 1篇张嘉伟
  • 1篇胡倩
  • 1篇刘金娟
  • 1篇琚四美
  • 1篇徐霖
  • 1篇杜航

传媒

  • 2篇畜牧与兽医
  • 2篇中国畜牧杂志
  • 1篇黑龙江畜牧兽...
  • 1篇中国兽医杂志
  • 1篇Curren...
  • 1篇中国家禽
  • 1篇生理学报
  • 1篇Zoolog...
  • 1篇山地农业生物...
  • 1篇西南农业学报
  • 1篇中国畜牧兽医

年份

  • 2篇2012
  • 1篇2010
  • 3篇2009
  • 4篇2008
  • 2篇2007
  • 1篇2006
共 13 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
贵州白山羊BMP15基因多态性研究被引量：11
2007年
骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP15)基因是控制Belclare和Cambridge等绵羊的高繁殖力主效基因,BMP15蛋白中单个氨基酸的改变直接影响绵羊的产卵率和产羔数。采用RFLP和SSCP技术检测BMP15基因中绵羊高繁殖力突变类型FecXG和FecXB在贵州白山羊中的分布。结果表明,在贵州白山羊样品中没有检测到BMP15基因的FecXG突变,说明该突变在贵州白山羊中的自然发生率非常低;在贵州白山羊高产母羊和公羊中检测到BMP15的FecXB突变,以杂合的AB基因型存在,低产母羊中没有检测到该突变,提示BMP15基因的FecXB突变可能是影响贵州白山羊繁殖力的因素之一。
林尖兵杜智勇覃成王嘉福冉雪琴
关键词：贵州白山羊繁殖力BMP15基因
贵州白山羊GDF9基因外显子2的多态性研究被引量：17
2008年
生长分化因子9(GDF9)是卵母细胞分泌的生长因子,对早期卵泡的生长和分化起重要的调节作用。采用RFLP和SSCP方法检测贵州白山羊GDF9基因外显子2的单核苷酸多态性,结果表明:在所有检测样本中均未发现GDF9基因的FecGH突变;在高繁殖率(3羔以上/胎)母羊和公羊中检测到8个杂合的AB基因型,其中5个为高产的母羊,3个为公羊。碱基序列分析证实GDF9基因编码区第1189bp位点的碱基由G突变为A,该位点位于外显子2中,导致活性肽第79位缬氨酸突变为异亮氨酸(V79I),但在低繁殖率(1~2羔/胎)母羊中没有发现该突变。虽然贵州白山羊GDF9基因中G1189A突变的发生率仅为5%,但该位点编码的氨基酸与FecGH突变(S77F)仅相隔1个氨基酸,因此推测GDF9基因中的G1189A突变可能与贵州白山羊的高繁殖力有关。
杜智勇林尖兵覃成王嘉福冉雪琴
关键词：贵州白山羊GDF9基因RFLPSSCP
榕江香猪生长激素基因的鉴定及功能分析(英文)被引量：13
2006年
生长激素是调节动物生长的主要激素。本研究应用聚合酶链式反应技术从榕江香猪的基因组文库中分离出1．903kb生长激素基因。克隆的生长激素基因由五个外显子和四个内含子组成。榕江香猪生长激素基因的碱基序列与已知四个国外猪种和9个中国地方猪种之间的同源性为97%～99%,其间的差异主要集中在内含子2和4。通过限制性内切酶(Dde I,Nar I,Bsm NI)分析,鉴定出榕江香猪生长激素基因的五个多态性位点,分别位于5’-侧翼区274(T/C)位点,外显子2的622(G/A)和631 (G/A)位点,内含子2中的841(T/C)以及外显子4中的1358(A/G)位点。同时,1358(A/G)位的碱基必变导致榕江香猪生长激素成熟肽第108位异亮氨酸替换,三维结构分析表明,异亮氨酸的存在可能导致生长激素与受体间亲合力降低。
李景冉雪琴王嘉福
关键词：生长激素基因
贵州白山羊GDF9基因编码区1007位点的多态性被引量：3
2009年
生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)基因是卵母细胞分泌的生长因子,调节卵泡的早期生长和分化。对贵州白山羊GDF9基因的研究结果显示,编码区1007位碱基与已知山羊不同。为了研究1007位点对贵州白山羊繁殖力的影响,采用锚定PCR对GDF9基因外显子2第18位氨基酸密码子所在区域进行了扩增、克隆测序和基因型分析,结果表明,GDF9基因编码区1007位点表现出C/T多态性,使成熟肽第18位氨基酸为丙氨酸/缬氨酸替换;低产母羊均为杂合基因型,高产母羊中90%为杂合基因型,高产羊群与低产羊群之间基因型频率差异不显著(P>0.05),表明GDF9基因1007位点的多态性与贵州白山羊产羔数之间没有直接的相关性。
周泽晓冉雪琴王嘉福
关键词：贵州白山羊GDF9基因SNP位点
贵州竹乡乌骨鸡Ghrelin基因的克隆及原核表达被引量：1
2008年
采用特异性引物自贵州黑羽乌骨鸡胃部组织克隆了Ghrelin的基因,基因全长2330bp,含有4个外显子,3个内含子。采用RT-PCR技术,获得了Ghrelin cDNA片段(563bp),序列分析推测,通过可变剪切可产生两段mRNA,cDNA编码区与基因组中的编码区完全一致。黑羽乌骨鸡Ghrelin基因与已知鸡种比较有13～18个碱基不同,相似性为99.1%～99.3%,但其氨基酸序列完全一样,表明禽类的Ghrelin多肽高度保守。将其中Ghrelin编码区亚克隆到原核表达载体pTYB11中,经序列测定碱基序列正确,获得重组质粒pTYB11/G。在IPTG的诱导下,重组质粒在大肠杆菌ER2566中获得表达。当OD600=0.5,IPTG为浓度1mmol/L,诱导5小时的表达量最高,融合蛋白占细胞总蛋白的40%。采用几丁质结合的预装柱对表达产物进行纯化,产率约为5mg/L培养液。
代新兰冉雪琴王嘉福
关键词：乌骨鸡GHRELIN基因原核表达
贵州白山羊Bmp15和Gdf9基因多态性及其编码蛋白的进化分析(英文)被引量：6
2009年
BMP15和GDF9是转化生长因子β(TGFβ)超家族的成员,对绵羊的繁殖性状有直接的调节作用,从中发现的多个高产突变位点直接提高了排卵数和产羔数。在之前的研究中,作者从贵州白山羊中找到了一个高产突变位点。为了进一步揭示Bmp15和Gdf9基因突变与繁殖性状之间的关系,对贵州白山羊Bmp15和Gdf9基因编码区进行了克隆,以人BMP7的晶体结构为模板构建了贵州白山羊BMP15和GDF9成熟肽的三维模型。贵州白山羊Bmp15和Gdf9基因分别编码394和453个氨基酸的蛋白前体。对BMP15和GDF9成熟肽序列进行分析发现,除了之前确认的BMP15中的FecXB突变(S99I)和GDF9中的V79I突变之外,还从贵州白山羊的BMP15和GDF9成熟肽分别发现7个和3个位点突变。其中,BMP15成熟肽的S32G、N66H、S99I/P99I和G107R突变可能影响二聚体与受体的结合;GDF9成熟肽的P78Q和V79I影响二聚体与I型受体的亲和力,将值得进一步深入研究。对Bmp15和Gdf9基因编码的蛋白前体序列进行聚类分析,结果显示在鱼类到哺乳类的进化过程中,BMP15出现长度逐渐增加的现象,以BMP15成熟肽N端长度增加为主。这种演变可能使BMP15对低排卵哺乳动物繁殖力的控制更为灵敏。该文的研究结果为贵州白山羊Bmp15和Gdf9基因变异与繁殖力的关系提出了合理的解释,并支持这两个因子是贵州白山羊高产性状重要调节因子的观点。
冉雪琴林尖兵杜智勇覃成王嘉福
关键词：BMP15GDF9基因贵州白山羊
猪源大肠杆菌志贺样毒素2型突变体B亚基与LTB基因的融合与表达被引量：1
2007年
猪水肿病的主要毒力因子是志贺样毒素的2型突变体(Stx2e),毒素的A亚基是有毒的酶活性单位,B亚基无毒,介导毒素与受体的结合。为了增加B亚基的免疫原性,采用重叠PCR将猪源志贺样毒素Ⅱ型突变体B亚单位(Stx2e B)连接至热敏肠毒素的B亚单位(LTB)成熟肽N末端,获得Stx2e B与LTB相连的融合蛋白基因Stx2e B-LTB。融合基因克隆到表达载体pQE30中,在IPTG的诱导下,融合基因在大肠杆菌中获得表达,表达量占细菌总蛋白的8%。融合蛋白的获得为猪水肿病基因工程亚单位疫苗的制备、猪水肿病的预防奠定了基础。
王红珍冉雪琴吴拥军王嘉福
关键词：大肠杆菌热敏肠毒素基因融合
山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的表达与细胞凋亡的相关性被引量：2
2012年
以贵州本地分离纯化的山羊痘病毒为试验材料,感染Vero细胞,通过台盼蓝、吖啶橙/溴乙锭荧光染色分析细胞的死亡及凋亡比例;经特异性PCR从山羊痘病毒基因组中分离出山羊痘病毒抗凋亡蛋白样基因,基因长531bp,含有完整的编码框,与绵羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的相似性为97%,因此确定为山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因。进一步研究山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因在Vero细胞中的表达,结果显示,病毒感染Vero细胞24h时没有检测到凋亡现象,山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的mRNA水平最高;感染48h时,Vero细胞的凋亡率上升到13%,山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的表达量随之下降。结果表明,山羊痘病毒抗凋亡蛋白基因的表达量与Vero细胞的凋亡呈负相关,有助于病毒在细胞内的生存和侵染等过程。
关会敏冉雪琴姬志林王嘉福
关键词：山羊痘病毒基因表达
香猪雌激素受体α、β基因cDNA的克隆及分析被引量：2
2008年
本文采用RT-PCR技术,分别从香猪的子宫和卵巢总RNA中扩增了雌激素受体α和β(ERα、ERβ)两种cDNA,分别长1788bp和1581bp,包括起始密码子和终止密码子,碱基序列与大白猪的ERα、ERβ基因的相似性为99.3%和99.6%。ERα、ERβ两个基因编码595、526个氨基酸,N-末端的20、24个氨基酸残基为信号肽,成熟肽序列与大白猪之间均有4个氨基酸不同。三维结构分析发现,与大白猪相比,香猪ERα成熟肽第192、231位氨基酸由Ser、Met变为Gly、Thr,位于DNA结合结构域,成熟肽438位氨基酸由Val变为Gly,位于ERα的配体结合结构域;ERβ成熟肽中,167位和360位氨基酸由Asp和Phe变为Glu和Pro,位于受体的DNA结合域和配体结合域,这五个位点的氨基酸替代可能影响ERs蛋白与雌激素受体应答元件、雌激素等配体的结合,改变相关基因的转录效率,并可能影响香猪的卵巢、子宫等繁殖系统的发育,与香猪的低繁殖力有关。
刘金娟王嘉福冉雪琴
关键词：香猪雌激素受体Α雌激素受体ΒCDNA
贵州黑马羊无角间性综合征座位的分子检测被引量：4
2010年
为了筛选出黑马羊羊群中对羊群有危害且无经济价值的无角间性羊,试验选取不同性状的羊只采用PCR分子标记技术进行检测,从大量的特异性PCR引物中选出可以进行筛选的1对引物。结果表明:以有角黑山羊和黑马羊基因组为模板,用该引物可扩增出413 bp的片段,无角间性羊样本没有扩增片段,因此能够有效区分无角间性羊样本。说明试验建立的检测方法可作为无角间性综合征(PIS)基因座位的分子标记。
琚四美张嘉伟杜航徐霖冉雪琴王嘉福
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