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国家自然科学基金(30560108)

作品数:9 被引量:22H指数:4
相关作者:刘淑英王宇齐景伟李建云韩敏更多>>
相关机构:内蒙古农业大学更多>>
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文献类型

  • 9篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 9篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 9篇腺瘤病
  • 9篇绵羊
  • 9篇绵羊肺腺瘤病
  • 9篇肺腺瘤病
  • 7篇绵羊肺腺瘤病...
  • 7篇病毒
  • 5篇内源性绵羊肺...
  • 3篇ENJSRV
  • 2篇原位
  • 2篇原位杂交
  • 2篇蒙古羊
  • 2篇克隆
  • 2篇NM
  • 1篇蛋白结构
  • 1篇蛋白结构预测
  • 1篇原位杂交检测
  • 1篇杂交检测
  • 1篇实验室
  • 1篇受体
  • 1篇探针

机构

  • 9篇内蒙古农业大...

作者

  • 9篇刘淑英
  • 4篇齐景伟
  • 3篇徐萌杰
  • 3篇王宇
  • 2篇梁化春
  • 2篇韩敏
  • 2篇张文广
  • 2篇李建云
  • 1篇赖双英
  • 1篇吴晓莉
  • 1篇柴局
  • 1篇邢晋凌
  • 1篇李金泉
  • 1篇马学恩
  • 1篇吴江鸿

传媒

  • 3篇中国预防兽医...
  • 1篇中国兽医杂志
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇畜牧兽医学报
  • 1篇内蒙古农业大...
  • 1篇中国兽医科学
  • 1篇Virolo...

年份

  • 4篇2009
  • 2篇2008
  • 2篇2007
  • 2篇2006
9 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)及其受体Hyal-2在妊娠蒙古绵羊子宫和孕体的表达
为了明确内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)是否在蒙古绵羊的发育过程中发挥作用以及在绵羊肺腺瘤病致瘤过程中可能发挥的作用,本试验利用RT-PCR和组织原位杂交技术对enJSRV及其受体Hya1-2在妊娠绵羊的子宫和孕体的...
徐萌杰刘淑英吴晓莉齐景伟
关键词:内源性绵羊肺腺瘤病毒受体原位杂交蒙古绵羊
文献传递
内源性绵羊肺腺瘤病毒NM株pol基因的克隆与序列分析被引量:3
2007年
参照GenBank中内源性绵羊肺腺瘤病毒enJS56A1株pol基因序列设计了2对引物。应用PCR技术特异性地扩增出病毒的pol基因片段,将其克隆到PMD19-T载体后测序。应用计算机软件将测定序列与内源性南非代表毒株enJS56A1(AF153615)的pol基因序列比较,核苷酸同源性为99.3%,推导出的氨基酸同源性为95.0%。与外源性南非代表株JSRV-SA(M80216)的pol基因序列比较,核苷酸同源性为99.0%,氨基酸同源性为99.3%。这也是我国首次报道的内源性绵羊肺腺瘤病毒pol基因序列,为我国科研工作者进行更深入的研究奠定基础。
王宇刘淑英韩敏李建云
关键词:内源性绵羊肺腺瘤病毒克隆
绵羊肺腺瘤病的病理学及RT-PCR诊断被引量:4
2009年
对呼和浩特市四子王旗某种羊场的疑似绵羊肺腺瘤病的4只病羊,通过临床诊断、病理组织学观察,PCR、RT-PCR和半巢式PCR技术对疑似病羊进行检测诊断。结果显示:(1)"小推车试验"时有鼻液流出;(2)剖检时可见肺肿大实变,切开肺脏时可见大量泡沫状液体从切面渗出;(3)病理组织学观察肺脏有大小不一的腺瘤灶,而且肺泡上皮细胞呈乳头状增生;(4)根据GenBank中登录的绵羊肺腺瘤病毒全序列(AF105220),设计合成3对特异性引物和3条巢式引物,经RT-PCR、PCR及半巢式PCR法扩增并测序,利用RT-PCR和PCR分别扩增出与预期大小一致的条带U3(175bp)、env(225bp)、gag(300bp),序列分析表明与引起该病的绵羊肺腺瘤病毒序列同源性较高,分别达97.2%、96.5%、94.4%。应用半巢式引物扩增片段分别为U3(133bp)、env(178bp)、gag(275bp)。经过以上方法确诊该羊场的疑似病例为绵阳肺腺瘤病。
梁化春齐景伟刘淑英徐萌杰
关键词:绵羊肺腺瘤病绵羊肺腺瘤病毒病理学
Cloning and Sequence Analysis of Genome from the Inner Mongolia Strain of the Endogenous Betaretroviruses (enJSRV)被引量:4
2008年
In order to amplify the complete genome of enJSRV from the strain of Inner Mongolia (enJSRV-NM), we used enJSRV-specific and JSRV-specific DNA probes in dot blot hybridization. Seven pairs of primers were designed based on Genbank sequences. Seven fragments were obtained by PCR and were cloned into the PMD19-T vectors. The recombinant plasmids were sequenced and analyzed. The results showed that the genome was 7 942 bp in length and contained four overlapping open reading frames corresponding to the gag, pro, pol and env genes as well as an additional open reading frame (orf-x) that overlaps the 3' end of the pol gene. The nucleotide acid sequences of the enJSRV-NM loci were compared with the sequences of South Africa enJS56A1 strain (Accession No. AF153615) and USA JSRV21 strain (Accession No. AF105220). The nucleotide acid identities were 99.2% and 92.3% respectively. Two zinc fingers were found in the NC region in the predicted amino acid sequence. However, the YXXM motif, which is a reliable molecular marker for the infectious exogenous virus, was not found in the TM region. It was found that the enJSRV-NM region was 90%-98% identical at the amino acid level to its exogenous infectious counterparts in most of the retroviral genome. This is the first nucleotide sequence of enJSRV reported in P.R China. The resource work has provided a wide range of information useful not only for expression genomics and annotation of genomic DNA sequence, but also for further research on the clinical diagnosis of OPA.
Yu WANGShu-ying LIUJian-yun LIMin HANZhen-ling WANG
关键词:斑点杂交突变菌株
绵羊基因组中内源性绵羊肺腺瘤病毒相关序列的确定被引量:1
2009年
绵羊都含有与绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)密切相关的15~20拷贝内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)相关序列。宿主可利用内源性病毒来预防致病性反转录病毒的感染,一些内源性病毒可以有效地干扰相关外源性病毒的复制。本试验通过分子生物学手段确定了蒙占绵羊基因组中含有enJSRV6和enJSRV10两个内源性病毒基因而内蒙古白绒山羊中未发现。通过比较内、外源病毒LTR序列的酶切图谱,获得专一作用外源性病毒的核酸内切酶MspI、TfiI、BsaWI,如果将酶切与聚合酶链式反应(PCR)相结合,不需要经过测序就可分辨enJS—RV和外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV),形成“酶切-PCR”检测技术,将为绵羊肺腺瘤病的快速诊断提供了新的手段。
吴江鸿张文广刘淑英李金泉
关键词:蒙古羊绵羊肺腺瘤病毒
内源性绵羊肺腺瘤病毒NM株gag基因的克隆、序列分析及蛋白结构预测被引量:8
2007年
提取内源性绵羊肺腺瘤病毒内蒙古分离株(NM)总DNA,参照GenBank中内源性绵羊肺腺瘤病毒enJS56A1株gag基因序列设计1对引物。应用PCR技术特异性地扩增出病毒的gag基因片段,将其克隆到pMD19-T载体中进行测序得到完整的gag基因序列,并用DNAStar软件进行序列分析,分析结果表明,与内源性南非代表毒株enJS56A1(AF153615)的gag基因序列比较,核苷酸同源性为98.9%。推导出的氨基酸同源性为98.4%。与外源性美国代表株JSRV21(AF105220)的gag基因序列比较,核苷酸同源性为89.6%,氨基酸同源性为94.8%。利用生物信息学软件对其蛋白结构进行预测,结果表明gag-enJSRV-NM为一结构松散的蛋白分子,这也是我国首次报道的内源性绵羊肺腺瘤病毒的gag基因的全序列,为我国科研工作者进行更深入的研究奠定了基础。
王宇刘淑英韩敏李建云
关键词:内源性绵羊肺腺瘤病毒GAG基因克隆
内源性绵羊肺腺瘤反转录病毒的研究进展
2006年
从内源性绵羊肺腺瘤反转录病毒(enJSRV)与外源性绵羊肺腺瘤反转录病毒(exJSRV)基因组结构的比较、enJSRV与绵羊肺腺瘤病(OPA)的关系、enJSRV在羊体内的表达及其系统发育分析等方面综述了enJSRV的研究进展,旨在为早期诊断及预防OPA提出新方法,为揭示该病的分子发病机理及探索其基因治疗提供新思路。
王宇刘淑英
关键词:绵羊肺腺瘤病
绵羊肺腺瘤病实验室诊断报告被引量:5
2008年
以乌兰察布市某种羊场的疑似病羊为研究对象,采用临床诊断、镜检观察及PCR法检测患病羊是否患有绵羊肺腺瘤病。结果显示:①"小推车试验"时有鼻液流出;②剖检时可见肺实变,体积明显增大,表面出现大量形态不规则的灰白色结节,切开肺脏时可见大量泡沫状液体从切面渗出;③显微镜下观察,疑似患病羊的肺脏有大小不一的腺瘤灶,且肺泡上皮细胞呈乳头状增生,肺泡腔内充满巨噬细胞,病灶中央的细胞核溶解,胞浆中有空泡,呈坏死状;④根据GenBank中已发表的外源性绵羊肺腺瘤病毒的基因组全序列,设计合成3对特异性引物,对病料样品进行PCR扩增并将其产物测序,结果表明扩增出的片段为178bp、226bp、301bp,同源性分析表明这3段序列与引起该病的病原即绵羊肺腺瘤病毒基因组序列同源性最高分别为97.2%、96.5%、94.4%,与相对应的内源性病毒序列最高分别为73%、69.5%、85.4%,以上4方面诊断该病例为绵羊肺腺瘤病。其中所建立的PCR诊断方法具有快速、特异、敏感等特点,为绵羊肺腺瘤病的快速诊断提供了新的手段。
梁化春邢晋凌刘淑英徐萌杰
关键词:绵羊肺腺瘤病PCR
绵羊肺腺瘤病毒JSRV-2基因探针的制备与原位杂交检测被引量:3
2006年
用地高辛随机引物法标记外源性exJSRV特异的JSRV-2片段,制备探针,用原位杂交法检测自然感染绵羊肺腺瘤病(OPA)的病肺组织中JSRV-NM的RNA及前病毒DNA,结果表明OPA患羊肺肿瘤细胞的胞浆和核内都有JSRV-2基因mRNA的表达,同时也检测到了前病毒DNA,而相应的阴性对照无阳性信号,证实外源性JSRV-NM病毒具有特异性的DNA探针在检测致瘤性前病毒在宿主细胞中的整合具有可信度。
刘淑英齐景伟马学恩
关键词:绵羊肺腺瘤病毒探针原位杂交
内源性绵羊肺腺瘤病毒基因在蒙古羊染色体上的分布研究
2009年
本研究旨在探究内源性绵羊肺腺瘤病毒基因在蒙古羊染色体上的分布情况。参照已登入GenBank中的内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV,登录号为DQ838493)序列,设计合成1对引物,PCR扩增gag基因的部分片段,用地高辛标记制备探针,利用荧光原位杂交(FISH)技术检测enJSRV在蒙古羊染色体上的分布。结果表明,用en-JSRV的gag基因合成的DNA探针在蒙古羊中期分裂相的6条染色体上均有杂交信号,分别为1q45、1p23、2q41、3q23、6q13、9q22和14q25,其中在6和9号染色体上出现有较强的荧光信号。结果提示,在6和9号染色体上这2个位点上有多拷贝的enJSRV基因,1q45、1p23、2q41、3q23、和14q25拷贝数少,这与内源性绵羊肺腺瘤病毒进化有关。
柴局齐景伟刘淑英张文广赖双英李金泉
关键词:蒙古羊ENJSRVFISH染色体
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