国家自然科学基金(30560103)
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 相关作者：娜仁花旭日干梁磊更多>>
- 相关机构：内蒙古农业大学内蒙古大学内蒙古医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 受精素β基因mRNA在绵羊睾丸组织中的表达
- 2007年
- 利用RT-PCR法和原位杂交技术,研究受精素βmRNA在睾丸和附睾中的表达特征。结果显示,受精素βmRNA只有在睾丸组织中表达,并且主要分布在精细管上皮圆形精细胞中,而附睾不同部位均无表达。上述结果表明,受精素βmRNA是睾丸特异性表达的精子膜蛋白。
- 娜仁花旭日干
- 关键词：原位杂交绵羊
- 内蒙古白绒山羊Izumo蛋白的基因编码区cDNA序列扩增及结构初步分析被引量：2
- 2012年
- 目的对内蒙古白绒山羊精子膜蛋白Izumo的基因编码区cDNA序列进行扩增并对其结构作初步分析。方法以已知的内蒙古白绒山羊Izumo部分基因序列为模板，采用cDNA末端快速扩增技术扩增3’端和5’端未知序列，钓取基因编码区，并分析编码区氨基酸序列。结果经序列扩增和拼接，得到1035bp的Izumo编码区cDNA序列，后者编码由344个氨基酸组成的蛋白。氨基酸序列中包含免疫球蛋白样结构域。Izumo编码区的疏水性平均值为-0．181。找到4个位于Izumo蛋白胞外区的潜在磷酸化位点。结论进一步确定Izumo属于免疫球蛋白超家族的一员，初步认为Izumo是一种亲水性蛋白，根据潜在磷酸化位点的位置，推断磷酸化可能不是Izumo蛋白发挥作用的机制。
- 梁磊娜仁花
- 乳酸脱氢酶-C4基因mRNA在绵羊睾丸和附睾中的表达研究被引量：2
- 2006年
- 实验检测3乳酸脱氢酶-C4基因mRNA在绵羊睾丸和附睾中的表达情况。提取绵羊睾丸组织、附睾头、体、尾部组织总RNA,以此为模板,逆转录合成cDNA,自行设计引物,PCR扩增出347bp的目的DNA。然后,将目的片段克隆入T载体,通过菌液PCR和重组质粒酶切,鉴定重组质粒中的目的DNA。再经序列分析鉴定目的片段。同时,以β-actin为内参照物,进行RT-PCR半定量分析,比较在睾丸、附睾头、体、尾部组织中的表达量。结果表明:乳酸脱氢酶-C4在绵羊睾丸中表达量最多,尾部中表达不明显。
- 娜仁花旭日干
- 关键词：RT-PCRMRNA表达绵羊
- 内蒙古白绒山羊Izumo mRNA在睾丸及附睾组织中的表达
- 2014年
- 目的 研究精子膜特异性蛋白Izumo基因mRNA在内蒙古白绒山羊睾丸和附睾组织中的表达.方法 采用逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）法对内蒙古白绒山羊Izumo基因的部分片段进行重新克隆.然后重新设计一对引物,利用RNA印迹技术,以非放射性地高辛标记法对引物进行处理,制成地高辛标记DNA探针,与绒山羊睾丸和附睾头、体、尾部组织的总RNA进行杂交.结果 RT-PCR扩增产物片段大小与预期的788 bp相符.RNA印迹试验中,标记的探针浓度为100 pg/μl,检测结果显示Izumo mRNA在内蒙古白绒山羊睾丸和附睾头、体、尾部组织均有表达.结论 内蒙古白绒山羊睾丸和附睾组织均可表达Izumo mRNA,从而为进一步研究Izumo在人类精卵融合中的作用奠定了基础.
- 梁磊娜仁花
- 关键词：睾丸附睾
- 绒山羊精子特异性膜蛋白Izumo的克隆及其序列分析
- 2010年
- 精子膜蛋白Izumo在精卵融合的过程中具有重要的作用。为了探讨Izumo基因在内蒙古白绒山羊精卵融合中的作用,根据GenBank中发表的牛的核苷酸序列,设计并合成了扩增Izumo基因的1对引物,经RT-PCR扩增获得了Izumo基因部分序列,并对Izumo基因进行了克隆和序列分析。结果显示,获得484 bp的Izumo基因cDNA序列,与牛的Izumo基因同源性高达98%。
- 梁磊娜仁花
- 关键词：克隆
- 绵羊fertilin β基因编码区的钓取与结构分析被引量：4
- 2007年
- Fertilin β与精卵的结合和融合有密切关系。为探讨fertilin β蛋白在绵羊受精过程中的作用机理,采用RACE技术,首次钓取了该基因的编码区。结果绵羊fertilin β基因的编码区cDNA全长为2,217bp。同源性分析显示,绵羊的fertilin β氨基酸序列与牛、猪和人的fertilin β具有79.4%、66.7%和58.1%的同源性。系统发育分析表明,绵羊fertilin β与牛属于同一分支,并且也显示了绵羊和牛分类地位最近,这和传统的分类一致。Fertilin β蛋白结构域分析显示,绵羊fertilin β去整合素识别序列为TDE,与牛的序列相同。除了上述三肽序列外,紧随X-D/E-E的ECD保守序列,从而形成了X-D/E-ECD五肽保守序列,在绵羊fertilin β中该五肽序列为TDECE。
- 娜仁花旭日干
- 关键词：绵羊RACE技术系统发育
- 精子受精抗原-1(FA-1) mRNA在绵羊睾丸和附睾中的表达被引量：2
- 2006年
- 本研究通过RT-PCR检测了该基因在绵羊睾丸和附睾中的表达情况。首先,提取绵羊睾丸组织、附睾头、体、尾部组织总RNA,以此为模板,反转录合成cDNA,自行设计引物,PCR扩增出462 bp的目的DNA。然后,将目的片断克隆入T载体,通过菌液PCR和重组质粒酶切,鉴定重组质粒中的目的DNA。再经序列分析鉴定目的片断。同时,以β-actin为内参照物,进行RT-PCR半定量分析,比较精子受精抗原(FA-1)在睾丸、附睾头、体、尾组织中的表达量。结果表明,FA-1在绵羊睾丸和附睾中均表达。
- 娜仁花旭日干
- 关键词：RT-PCRMRNA表达
