国家自然科学基金(31101488)
- 作品数：1 被引量：6H指数：1
- 相关作者：王磊钱岑叶恭银方琦更多>>
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- Charharacterization of the serine proteinase and its homolog genes specifically expressed by venom gland of a pupal endoparasitoid, Pteromalus puparum
- ＜正＞Serine proteinaes（SPs）and their homologs（SPHs）constitute a large family of proteolytic proteinase.They play...
- Yu ZhuYang LiuQi FangGong-Yin Ye
- 文献传递
- 蝶蛹金小蜂毒液丝氨酸蛋白酶抑制剂Pp Serpin 4的克隆与表达模式研究
- 寄生蜂是重要的农业害虫天敌,在生物防治中发挥着相当重要的作用,寄生蜂在产卵过程中,伴随有毒液、类病毒颗粒、多分DNA病毒、畸形细胞等寄生因子一并注入寄主体内,通过调控寄主免疫反应和寄主的生长发育,以保护其子代能够在寄主体...
- 刘洋方琦叶恭银
- 关键词：蝶蛹金小蜂菜粉蝶毒腺
- 文献传递
- 丽蝇蛹集金小蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂基因nvpp-1和nvpp-2的功能研究被引量：6
- 2013年
- Pacifastin蛋白酶抑制剂在昆虫免疫与发育中起着重要作用。为了明确其在寄生蜂中的相关功能,本研究分别克隆获得编码丽蝇蛹集金小蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂开放阅读框的cDNA序列nvpp-1和nvpp-2,序列长度分别为723和888 bp,分别编码240和295个氨基酸残基。预测结果表明,nvpp-1和nvpp-2推导氨基酸序列N端均含一个长度为17个氨基酸残基的信号肽序列。序列分析和进化树构建结果表明,NVPP-1和NVPP-2分别含有5个和4个典型的Pacifastin保守结构域,并与疑黑瘤姬蜂Pimpla hypochondriaca毒液蛋白CVP4聚为一类。实时荧光定量RT-PCR结果表明,nvpp-1和nvpp-2于该蜂雌蜂各组织中均发生转录,且在胸、腹部残体(解剖后腹部剩余部分)和毒器官中的转录水平较高;于毒器官中,其在羽化初期(0和1 d)转录水平较高,其转录水平显著降低。Western blot结果表明,NVPP-1和NVPP-2均只在毒液中被大量检出,在其他待测组织中均未被检出,而刚羽化时(0 d)其在毒液中含量较低。利用pET-28a(+)载体分别对nvpp-1和nvpp-2进行了原核表达,并对重组表达产物进行纯化。分别测定重组NVPP-1和NVPP-2对4种不同丝氨酸蛋白酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶、蛋白酶K和弹性蛋白酶)的抑制效果,结果表明,重组NVPP-1和NVPP-2分别能显著抑制糜蛋白酶和胰蛋白酶活性。同时还分别测定了两种重组蛋白对寄主家蝇蛹血淋巴自身的酚氧化酶活性及原酚氧化酶激活反应的影响,结果表明,重组蛋白对家蝇蛹血淋巴原酚氧化酶激活反应亦有抑制效果,但其均不能显著影响血淋巴自身的酚氧化酶活性。综上所述,丽蝇蛹集金小蜂毒液中含有Pacifastin蛋白酶抑制剂NVPP-1和NVPP-2,分别为糜蛋白酶抑制剂和胰蛋白酶抑制剂家族成员,均能显著影响寄主家蝇蛹血淋巴原酚氧化酶激活反应,从而削弱寄主体液免疫水平。本研究所获结果加深了我们对昆虫尤其是寄生蜂Pacifasti
- 钱岑方琦王磊叶恭银
- 关键词：家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂转录水平
