国家自然科学基金(30560117)
- 作品数：5 被引量：32H指数：4
- 相关作者：王宇光雷禄旺刘秀莲李伟卢雪花更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 海洋红酵母的研究进展被引量：18
- 2008年
- 海洋红酵母富含氨基酸、维生素及类胡萝卜素等多种营养物质,有较好的耐盐性,是天然色素源、极具潜力的饲料蛋白和食品添加剂,具有很高的应用价值。概述了海洋红酵母的主要特性,总结了国内外海洋红酵母菌种、培养条件及工业应用等方面的研究进展及发展前景。
- 刘秀莲王宇光
- 关键词：发酵类胡萝卜素遗传修饰
- 海洋红酵母电转化条件的研究被引量：5
- 2008年
- 采用电穿孔的方法对海洋红酵母进行外源DNA的转化.通过调整参数,对影响电转化的主要因素进行探索,初步建立了载体pTEF1/Zeo-rDNA对海洋红酵母的高效电转化方法.结果表明,当采用对数生长中期的菌体制备感受态细胞、电压为900V、质粒浓度为20mg/L和0.2cm电转化杯时,转化率达到最大值,为每微克质粒DNA52个转化子.经抽样鉴定所得到的转化子均为阳性克隆.首次建立了以海洋红酵母为宿主的高效电转化体系,为外源基因在海洋红酵母中的表达奠定了基础.
- 刘秀莲王宇光雷禄旺
- 关键词：转化率
- 海洋红酵母耐盐cDNA文库的构建与序列分析被引量：1
- 2008年
- 利用消减杂交技术(SSH)构建了海洋红酵母耐盐cDNA文库,一共挑出270个克隆子,选取了25个克隆进行测序,经过Blast分析,初步认为有一个克隆是与耐盐相关的基因,2个属于未知基因,其余为核RNA。
- 刘洪博王宇光雷禄旺
- 关键词：红酵母耐盐基因消减杂交
- 海南海域海洋红酵母的分离鉴定和应用性能评价被引量：10
- 2009年
- 从海南海域的海滩、红树林、渔港码头、产盐滩涂、入海河沟分离海洋红酵母,旨在从中筛选与养殖对象共生的优良菌株。从海南海域分离和纯化海洋红酵母,对海洋红酵母进行形态和生理学及分子生物学的鉴定,大量发酵海洋红酵母,提取分离类胡萝卜素并测定其含量,并将海洋红酵母与鱼虾等养殖对象共培养试验。结果表明,共分离了40多株酵母菌,经形态和生理鉴定以及产类胡萝卜素试验,筛选得到一个高产类胡萝卜素的红酵母属(Rhodotorula)菌株。该菌株在葡萄糖2%、蛋白胨2%、酵母提取物0.3%、核黄素2×10-6 mol/L、pH 4.5的培养基中,于28℃振荡(180 r/min)培养72 h,其细胞生物产量可达87.55 g/L,类胡萝卜素含量可达520 mg/L;可以在13%高盐和pH 1.0强酸中培养生长;经过与鱼共培养试验,结果显示在合适的菌体浓度条件下,该菌株对鱼无毒害,并与鱼共生。该菌株与鱼共生,显示良好的应用前景,将其应用于盐诱导基因启动子的克隆和盐诱导表达外源基因蛋白(如抗菌肽)的海洋红酵母工程菌的构建,可以更好地应用于水产养殖业。
- 王宇光雷禄旺刘秀莲李伟
- 关键词：类胡萝卜素
- 紫外诱变筛选海洋红酵母S8的尿嘧啶缺陷型菌株被引量：5
- 2010年
- 本课题组从海南天然海域筛选到一株高产类胡萝卜素的海洋红酵母菌株S8,该菌株对鱼无毒害,并与鱼共生,欲将其应用于盐诱导表达外源蛋白的海洋红酵母工程菌的构建。本研究利用紫外诱变筛选的方法处理S8菌株,通过统计其UV致死率、5-氟乳清酸致死率等筛选S8的尿嘧啶营养缺陷型突变株。研究结果表明,供试菌株通过紫外线诱变、5-氟乳清酸致死和回复突变率的实验筛选,共获得16株稳定的尿嘧啶缺陷型突变株,突变菌株在基本培养基中培养了8d仍不能生长。选择了其中的一株ST5进行了产胡萝卜素能力的测定,结果表明,在同样的培养条件下,野生型S8菌株细胞生物产量可达87.55g/L,类胡萝卜素含量可达520μg/g,突变株ST5的细胞生物产量为85.45g/L,类胡萝卜素含量为512μg/g;ST5的产胡萝卜素能力方面与野生型S8无明显差异。因此,尿嘧啶缺陷型菌株ST5可为下一步海洋红酵母工程菌的构建提供受体菌。
- 王宇光雷禄旺孙建波卢雪花夏启玉张昕
- 关键词：紫外诱变
