国家自然科学基金(30560146)
- 作品数：12 被引量：83H指数：7
- 相关作者：丁剑冰马秀敏温浩贾海英曹春宝更多>>
- 相关机构：新疆医科大学新疆医科大学第一附属医院北京中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“春晖计划”新疆医科大学科研创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- EM18-GST原核表达载体的构建及空间结构的生物信息学分析被引量：4
- 2013年
- 目的构建GST-EM18原核表达质粒,优化EM18-GST重组蛋白诱导表达条件,通过生物信息学预测EM18蛋白的空间结构。方法以pMD18-T/Em18为模板,扩增EM18基因的CDS区,构建pGEX-3X-EM18,设计不同诱导表达条件表达EM18-GST蛋白。通过各种在线网站对EM18蛋白空间结构进行生物信息学预测。结果成功构建GST-EM18原核表达质粒,以1mmol/LIPTG于37℃诱导4h,蛋白表达较好;生物信息学预测EM18蛋白N端为无规卷曲,之后紧连两个α螺旋,C末端为无规卷曲和较短的片层结构。结论成功构建了GST-EM18原核表达质粒,表达的EM18蛋白含有无规则卷曲,可能是抗原表位所在位置。
- 周晓涛周文涛杨晨晨张蓓刘献飞王俨张传山吕国栋林仁勇
- 关键词：生物信息学预测
- 细粒棘球绦虫重组pET30a-EgA31疫苗的构建和诱导表达被引量：5
- 2009年
- 克隆细粒棘球绦虫EgA31抗原基因,构建pET30a-EgA31原核表达载体,并在大肠埃希菌宿主系统中表达EgA31重组蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE分析。从细粒棘球绦虫成虫组织中提取总RNA,反转录生成cDNA,以此cDNA为模板RT-PCR克隆获得EgA31抗原基因,将其克隆至pUCm-T载体,测序确定其正确性。利用定向克隆技术将EgA31抗原基因片段克隆至原核表达质粒pET30a上,转化E.coliDH5α,根据选择标记的卡那霉素抗性基因筛选到阳性克隆,通过PCR分析和酶切鉴定筛选出阳性克隆。IPTG初步诱导和表达pET30a-EgA31重组蛋白,SDS-PAGE电泳检测,并经凝胶图像分析确定目的蛋白的表达水平。测序表明选取的pET30a-EgA31阳性克隆均为正确连接EgA31抗原基因的重组质粒。经IPTG诱导后重组蛋白得到成功表达,在相对分子量约为31kDa处有表达条带,表达量约占菌体总蛋白质的26%。成功克隆并构建了pET30a-EgA31原核表达质粒,初步诱导表达出EgA31重组蛋白,为进一步研究其免疫特性奠定了基础。
- 贾海英马海梅丁剑冰曹春宝吾拉木·马木提马秀敏张海涛朱明吕国栋温浩
- 关键词：细粒棘球绦虫原核表达质粒
- 调节性T细胞相关负性分子与感染免疫被引量：12
- 2012年
- 调节性T细胞通过免疫抑制与免疫耐受机制影响疾病的发展。与调节性T细胞相关的CTLA-4、PD-1等负性分子在调节性T细胞的调节功能中起重要作用。本文拟对CTLA-4、PD-1和调节性T细胞的关系以及在病毒感染、细菌感染、寄生虫感染等免疫病中的调节机制作一综述。
- 赵慧王晶魏晓丽丁剑冰
- 关键词：CTLA-4PD-1调节性T细胞感染免疫
- 细粒棘球绦虫EgA31疫苗的分子生物学特征被引量：6
- 2008年
- 免疫预防是控制棘球蚴病经济、快速且有效的方法。近年来棘球蚴病的免疫学和疫苗研制方面均取得了很大进展,分子疫苗成为预防包虫病流行较理想的方法。其中细粒棘球绦虫EgA31疫苗是一有希望的疫苗候选分子,本文从EgA31抗原的基因结构和免疫特性等方面介绍了其分子生物学特征。
- 贾海英丁剑冰傅玉才
- 关键词：细粒棘球绦虫分子生物学特征
- 微波消解-FAAS法测定维药唇香草中十种金属元素被引量：9
- 2009年
- 金属元素与药物的疗效关系日益引起人们的关注，测定维吾尔药材中各种金属元素的含量具有一定的意义。采用硝酸作为消解液，利用微波消解的方法处理常用维吾尔药材唇香草，原子吸收分光光度法测定K, Na, Ca, Mg, Fe, Cr, Ni, Mn, Cu和Zn十种微量、常量元素的含量，方法的标准曲线线性关系良好（r=0.999 0～0.999 8）, 回收率（n=6） 在95%～108%之间, RSD值（n=6）在0.45%～1.53%, 能用于维吾尔药材唇香草多种金属元素的同时测定。该法具有检出限低、灵敏度高、快速、准确的特点, 用于实际样品测定的结果令人满意。结果显示维吾尔药唇香草中富含K, Ca，Mg,以及Fe, Zn, Na, Mn, Ni, Cr和Cu。从微量元素的角度为维医利用唇香草治疗心脑血管疾病提供了有用的数据。
- 田树革周晓英徐暾海丁剑冰单丽娟施洋
- 关键词：微波消解FAAS法唇香草金属元素
- 细粒棘球绦虫Eg95抗原表位的二级结构和表位预测
- 目的应用软件和在线网络分析Eg95的蛋白二级结构,预测B细胞表位和T细胞表位,为确定和筛选优势表位,研制安全、高效的表位疫苗奠定基础。方法采用DNAStar软件和在线网站IEDB、SYFPEITHI等对Eg95的B细胞表...
- 李玉娇王晶赵慧贾海英李博马秀敏温浩丁剑冰
- 关键词：EG95抗原表位生物信息学
- 文献传递
- 棘球蚴感染中的免疫逃避相关分子被引量：6
- 2008年
- 棘球蚴可以依赖有效的免疫逃避机制在宿主体内长期生存,并造成慢性感染。包囊囊壁、原头节和囊液等所含抗原物质多而复杂,在逃避宿主的免疫应答中起重要作用。棘球蚴逃避宿主免疫反应机制分为主动免疫逃避与免疫调节两种:棘球蚴通过抑制补体的激活,耗竭特异性抗体,影响T细胞活性,下调B细胞功能等有效地避开宿主的免疫反应。棘球蚴的EgTeg蛋白和囊液中的抗原B等能明显抑制中性粒细胞的趋化作用;刺激宿主产生TH2型细胞因子,激发非保护性的免疫应答;干扰单核细胞分化和调节树突状细胞的表型,逃逸宿主免疫监视。
- 曹春宝丁剑冰马秀敏
- 关键词：细粒棘球蚴免疫逃避分子
- 细粒棘球绦虫egG1Y162抗原基因的克隆及序列分析被引量：11
- 2009年
- 根据多房棘球绦虫emY162基因序列设计引物,利用PCR以细粒棘球绦虫原头蚴和成虫的基因组DNA和cDNA为模板扩增egG1Y162基因,构建PUCm-T/egG1Y162和PUCm-T/egG1Y162cDNA重组质粒,经PCR、酶切及测序后,进行序列分析。细粒棘球绦虫2个不同发育阶段均克隆出egG1Y162基因,从基因组DNA和cDNA克隆得到的片段长度分别为1680bp和459bp,登录号分别为AB458258和AB458259。
- 曹春宝马秀敏丁剑冰贾海英吾拉木·马木提马海梅温浩
- 关键词：细粒棘球绦虫克隆
- 细粒棘球绦虫Eg95基因疫苗和重组抗原诱导小鼠免疫应答的比较研究被引量：13
- 2006年
- 目的观察比较细粒棘球绦虫Eg95重组抗原和基因疫苗诱导小鼠的免疫应答状况。方法实验组和对照组小鼠分别注射Eg95重组抗原(rEg95)、费氏佐剂(FCA)、pcDNA3-Eg95基因疫苗、pcDNA3质粒和生理盐水,收集各组血清用酶联免疫吸附(ELISA法)检测抗体IgG和IgG2a亚类水平;采集脾细胞用四甲基偶氮唑盐试验(MTT法)检测免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖反应。结果rEg95免疫组小鼠在第二次免疫后开始检测到抗Eg95抗原的IgG,并随着免疫次数的增多,血清抗体效价升高,在第1次免疫后第10周时,免疫抗体滴度可达到1∶25,600。Eg95基因疫苗免疫的小鼠产生抗体滴度随免疫次数的增加而升高,最高可达1∶3,200,但是低于Eg95重组蛋白免疫小鼠产生的抗体滴度水平。pcDNA3-Eg95免疫组产生IgG2a亚类抗体水平明显高于对照组和rEg95组。在第四次免疫后,进行淋巴细胞转化试验,MTT法检测证实rEg95和pcD-NA3-Eg95免疫的小鼠,其脾细胞均可在体外被特异性刺激增生。结论细粒棘球绦虫Eg95重组抗原和基因疫苗均可诱发小鼠产生特异性免疫应答。
- 丁剑冰马秀敏魏晓丽林仁勇王俨张静萍温浩
- 关键词：细粒棘球绦虫基因疫苗免疫应答小鼠
- 我国棘球绦虫感染的不同宿主状况被引量：10
- 2009年
- 刘春燕马秀敏丁剑冰谌宏鸣
- 关键词：绦虫感染终末宿主棘球绦虫中间宿主动物体内
