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国家自然科学基金(30672425)

作品数：4 被引量：11H指数：2
相关作者：卢振霞白元松石张镇代恩勇杨绍娟更多>>
相关机构：吉林大学中日联谊医院吉林大学第二医院大庆油田总医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 3篇慢病毒
  • 3篇慢病毒载体
  • 3篇病毒载体
  • 2篇基因
  • 2篇白血
  • 2篇白血病
  • 2篇白血病细胞
  • 1篇凋亡
  • 1篇载体介导
  • 1篇上调
  • 1篇髓性
  • 1篇胎血
  • 1篇逆转
  • 1篇逆转录
  • 1篇逆转录病毒
  • 1篇逆转录病毒载...
  • 1篇脐血CD34...
  • 1篇肿瘤
  • 1篇转录

机构

  • 4篇吉林大学中日...
  • 1篇大庆油田总医...
  • 1篇吉林大学第二...

作者

  • 4篇卢振霞
  • 3篇白元松
  • 2篇石张镇
  • 2篇代恩勇
  • 1篇陈玉丙
  • 1篇刘晓会
  • 1篇孙延霞
  • 1篇孟祥睿
  • 1篇杨绍娟
  • 1篇刘静
  • 1篇孙步彤

传媒

  • 3篇中华血液学杂...
  • 1篇吉林大学学报...

年份

  • 1篇2013
  • 2篇2008
  • 1篇2007
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
慢病毒载体介导的基因转导技术对人脐血CD34^＋细胞基因表达谱的影响被引量：2
2008年
目的研究慢病毒载体（1entivirus vector）基因转导技术对脐血CD34^＋细胞基因表达的影响。方法将携带绿色荧光蛋白（GFP）基因的第三代自身失活（self-inactivating，SIN）慢病毒载体导入CD34^＋细胞。提取被病毒感染细胞的总RNA，应用cDNA微阵列技术对慢病毒载体感染的脐血CD34’细胞及正常对照细胞进行差异基因表达谱分析。结果在23000个被检测基因中，与无基因导入的对照组细胞比较，基因导入细胞中表达的上调基因共2个，分别为IGSF4和HEC基因，下调基因共6个，分别为HNRPA0、ZNF205、FLNA、CLK3、LDB1、ACTA1。进一步对筛选出的差异表达基因进行半定量RT-PCR分析证实基因表达水平变化不明显。结论本实验中应用的慢病毒载体对脐血CD34^＋细胞基因表达无明显影响，有望成为临床基因治疗有效且安全的工具。
白元松陈玉丙石张镇卢振霞
关键词：慢病毒载体胎血基因疗法
siRNA沉默survivin对人胃癌SGC-7901细胞生长的抑制作用被引量：9
2008年
目的:探讨siRNA沉默survivin基因表达对胃癌细胞生长的抑制作用及其机制,为胃癌及survivin阳性肿瘤的治疗提供理论依据。方法:针对survivin mRNA序列设计合成编码siRNA的DNA模板,构建2个重组质粒pGCsilencerU6/GFP/survivin siRNA-1和-2;实验分为脂质体对照、空质粒转染对照及survivin siRNA重组质粒转染治疗组,转染胃癌细胞SGC-7901,采用RT-PCR法检测survivin mRNA的表达,Western blotting检测蛋白表达,观察重组质粒对其转染的SCG-7901细胞survivin基因表达的影响;用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测量细胞生长情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:Western blotting、RT-PCR结果证实转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1的SCG-7901细胞survivin蛋白质及mRNA抑制率(78.25%及88.75%)均高于脂质体对照组(5%及2%)和空质粒对照组(1%及6%)(P<0.01);转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-2的SCG-7901细胞survivin蛋白质及mRNA抑制率(42%及77%)也均高于脂质体对照组和空质粒对照组(P<0.01);MTT法检测结果显示转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1组细胞体外生长的抑制率(64%)高于空质粒对照组(11%)(P<0.01);流式细胞术检测的转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1组细胞凋亡率(21.20±3.21)高于脂质体对照组(0.830±0.001)和空质粒对照组(1.98±0.67)(P<0.01)。结论:重组质粒pGCsilencerU6/GFP/survivin-siRNA可抑制胃癌细胞中survivin的表达,并抑制胃癌细胞生长,促进其凋亡。
孙延霞杨绍娟高申石张镇卢振霞
关键词：胃肿瘤RNA干扰SURVIVIN
线性扩增介导的PCR方法用于检测慢病毒载体在白血病细胞基因组中插入位点的可行性被引量：2
2007年
目前，病毒载体基因转导技术是基因治疗中最为成熟的生物学方法，其中逆转录病毒载体，因其具有可直接整合于宿主细胞基因组并能够长期稳定表达的特点而成为临床基因治疗的核心技术，分析病毒载体在宿主染色体中插入位点的常用方法包括Southern blot、RT-PCR等，这些方法均需要足量含高拷贝数已整合有病毒载体的样本DNA以获取有用的序列信息，且受到靶序列的大小、位置及构象的限制，故其灵敏度较差。
白元松孟祥睿代恩勇卢振霞
关键词：慢病毒载体插入位点基因组白血病细胞PCR方法逆转录病毒载体
抑癌基因p14^ARF表达上调对慢性髓性白血病细胞凋亡的影响
2013年
目的探讨上调抑癌基因p14^ARF表达对慢性髓性白血病（CML）细胞凋亡的影响以及其对伊马替尼增敏的作用。方法应用水泡性口膜炎病毒外壳糖蛋白假构型（VSV—Gpseudotyped）慢病毒载体基因转导系统，将抑癌基因p14^ARF导入CML细胞系K562及4例CML急变期患者原代白血病细胞（分别称为CML—BCl～4），同时以转染空载体的细胞作为对照组。用荧光显微镜及流式细胞术检测转导效率，Western blot法检测K562细胞p14^ARF蛋白表达；用WST一8法检测细胞增殖抑制率及转染目的基因的K562细胞在不同浓度倍比稀释的伊马替尼（0、0．015、0．062、0．125、0．25、0．5、1．0、2．0μmol／L）处理后细胞增殖抑制情况；用FITC标记的膜联蛋白V／碘化丙锭（AnnexinV-FITC／PI）标记流式细胞术检测细胞凋亡；半固体培养法检测白血病细胞集落形成能力。结果荧光显微镜及流式细胞术检测GFP阳性细胞率显示，转染目的基因及空载体的K562细胞及CML-BCl细胞转染效率接近100％，而CML—BC2—4细胞转导效率为80％～90％；Western blot分析结果显示，转导p14^ARF的K562细胞（K562-p14^ARF）ARF蛋白表达较未转导细胞明显提高；K562-p14^ARF细胞凋亡率为20％；转导p14^ARF后的4例CML患者原代白血病细胞凋亡率为（71．1±22．4）％，与对照组的（12．4±6．2）％相比差异有统计学意义（P〈0．05）。伊马替尼对K562-p14^ARF细胞增殖有明显的抑制作用，且呈浓度依赖性。转导p14^ARF后的4例CML患者原代白血病细胞集落形成数为41．5±13．2，与对照组（88．5±7．9）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论人为上调p14^ARF基因表达可诱导CML细胞凋亡，与伊马替尼联合应用可进一步加强对细胞增殖的抑制作用。
白元松刘静刘晓会代恩勇孙步彤卢振霞
关键词：白血病慢性髓性P14^ARF慢病毒载体细胞凋亡
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