国家自然科学基金(305002601)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 3种致遗传病PITX2突变体功能的比较研究被引量：1
- 2005年
- 角膜环状皮样瘤(RDC)、虹膜发育不全(IH)和Axenfeld-Rieger综合征(ARS)都是常染色体显性遗传病,都可以由于一个转录因子PITX2的突变引起.在3种疾病中,RDC的症状最轻,IH其次,ARS最重.将分别引起RDC,IH和ARS的错义突变R62H,R84W和T68P定点地引入PITX2野生型cDNA序列中进行分子功能的比较研究.结果证明,3种突变体蛋白都可以在真核细胞中稳定表达,并且都定位在细胞核中.EMSA和转录激活研究显示,3种突变体功能保留情况不同,R62H在三者中保留了最多的活性,R84W也保留了小部分功能,而T68P则完全丧失了DNA结合和转录激活能力.这一结果证实了前人提出的假设,即PITX2突变体残留活性的多少决定了疾病表型的严重程度.
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- 关键词：转录因子PITX2突变体功能分析
- PITX2 R62H突变导致角膜环状皮样瘤的分子基础被引量：2
- 2008年
- 角膜环状皮样瘤(RDC)是一种呈常染色体显性遗传的角膜良性肿瘤,前期研究证明,PITX2基因的G185A突变(R62H)是导致RDC发生的原因.为了进一步探讨R62H导致RDC的分子基础,将PITX2构建至原核表达载体,诱导表达后纯化融合蛋白进行EMSA实验,显示R62H与DNA的结合能力并未明显下降.筛选稳定表达PITX2WT和R62H的HeLa细胞克隆,用流式细胞仪分析细胞周期,并用Quantitative Real-time PCR来检测细胞克隆的β-catenin和Cyclin D1的表达水平,结果发现稳定表达PITX2R62H的HeLa细胞的增殖活性低于PITX2WT,且β-catenin和CyclinD1的mRNA水平均比PITX2WT明显下降.由此推测,R62H突变使Wnt/β-catenin→PITX2信号途径发生改变,促使基因表达异常,导致细胞异常增生和角膜环状皮样瘤的形成.
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- 关键词：PITX2转录因子Β-CATENINCYCLIND1
