安徽省国际科技合作基金(11030603028)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：徐家萍凌琳王成林李昕琦王学杨更多>>
- 相关机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划安徽省国际科技合作基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 抗菌肽Thanatin基因与多角体蛋白Polyhedrin基因的融合表达及产物的抑菌活性分析被引量：1
- 2011年
- 为利用大肠杆菌表达系统高效表达抗菌肽Thanatin并避免其抗菌活性对宿主菌的影响,将抗菌肽Thanatin基因与家蚕核型多角体病毒多角体蛋白Polyhedrin基因融合克隆到表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a(+)-Thanatin-polyhedrin,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达。SDS-PAGE检测显示经诱导表达的菌体中有与融合蛋白理论值(35 kD)相符的目的条带。凝胶扫描分析目的融合蛋白以包涵体的形式表达,且诱导后6 h融合蛋白的表达量最大,约占菌体总蛋白量的30%。纯化融合蛋白用盐酸羟胺切割后初步纯化获得具有抗菌活性的Thanatin蛋白。研究结果表明家蚕核型多角体病毒多角体蛋白能够作为抗菌肽Thanatin融合标签介导其高水平表达,有助于利用基因工程技术大规模生产抗菌肽Thanatin。
- 王成林李昕琦凌琳徐家萍
- 关键词：抗菌肽THANATIN家蚕核型多角体病毒多角体蛋白抗菌活性
- 家蚕石蚕突变(st)近等基因系与其回交亲本的表皮蛋白质组学差异分析
- 2013年
- 以家蚕石蚕突变(st)近等基因系C8和其回交亲本C108(正常体型)的5龄幼虫表皮组织为材料,运用双向电泳(2-DE)技术分析家蚕st突变体与正常蚕体的表皮蛋白质组成差异。从2-DE图谱中选取表达差异较明显的蛋白点,用基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)成功鉴定出13种蛋白质,其中酶类相关蛋白质占50%以上。通过Real-time PCR检测这些酶类蛋白质基因在C8和C108的5龄幼虫表皮组织的转录水平,发现谷胱甘肽S-转移酶σ1(GSTs1)、磷酸甘油酸变位酶(Pglym)、磷酸丙糖异构酶(TPi)3个酶类蛋白质基因的转录水平差异显著,其中Pglym和TPi在C8表皮中的转录水平明显高于在C108表皮中的转录水平,而GSTs1在C108表皮中的转录水平相对较高。初步推测这些差异蛋白质可能与st突变体形成和导致蚕体硬实的性状有关。
- 杜畅汪婉琳王学杨张彦徐家萍
- 关键词：家蚕差异蛋白质双向电泳基因转录荧光定量PCR
