广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金(GSKJ090202)
- 作品数：6 被引量：18H指数：3
- 相关作者：李春玲臧莹安宋帅李淼庞木生更多>>
- 相关机构：广东省农业科学院仲恺农业工程学院中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：广东省兽医公共卫生公共实验室开放基金广东省农业科技重大专项资助项目国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 副猪嗜血杆菌OMP P5间接ELISA抗体检测方法优化被引量：2
- 2012年
- 利用副猪嗜血杆菌(HPS)OMP P5基因表达并纯化复性后蛋白作为包被蛋白,通过对最佳加样作用时间的确定和最佳酶标二抗反应时间等条件的探索优化,建立针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5(OMPP5)的间接ELISA抗体检测方法,通过对进行和未进行HPS免疫的健康猪血清的检测,证实了建立的间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强、反应快速准确等特点。
- 臧莹安黄彩梅李婉雁李淼宋帅李春玲
- 关键词：副猪嗜血杆菌酶联免疫吸附试验
- 重叠PCR法构建副猪嗜血杆菌外源打靶基因被引量：3
- 2011年
- 利用重叠PCR法构建了包含副猪嗜血杆菌血清5型hhdA基因上、下游同源臂(H-up、H-down)和卡那霉素抗性基因(Kan)的外源打靶基因Hup-kan-Hdown。通过对反应条件进行优化,发现退火温度为50.5℃,加入H-up、H-down和Kan各为5μL(450 ng)时得到Hup-kan-Hdown的量最多。将此外源打靶基因的两端引入PstI和SacI酶切位点,克隆至具有迁移作用的自杀质粒pDS132,构建了可在大肠杆菌E.coliSM10-λpir中稳定遗传的打靶载体,为下一步建立副猪嗜血杆菌的高效基因打靶系统奠定基础。
- 张念章储岳峰赵萍高鹏程贺英逯忠新
- 关键词：副猪嗜血杆菌重叠PCR
- 梅迪-维斯纳病毒研究进展被引量：1
- 2011年
- 梅迪-维斯纳病毒又称绵羊进行性肺炎病毒,是绵羊进行性肺炎的病原,属于逆转录病毒科、慢病毒属。其致病过程与人类免疫缺陷病毒(HIV)相似,因此可以作为HIV感染的动物的研究模型。论文综述了梅迪-维斯纳病毒的病原学,阐述了致病机理、免疫逃避机理及引起宿主的免疫反应,并对未来的防控研究工作进行展望。
- 张念章储岳峰赵萍高鹏程贺英逯忠新
- 关键词：病原学致病机理免疫学
- 广东部分猪场副猪嗜血杆菌病的流行病学调查被引量：8
- 2012年
- 为了解副猪嗜血杆菌病(Haemophilus parasuis,HPS)在广东省部分地区的流行情况,通过针对副猪嗜血杆菌外膜蛋白P2(OMPP2)的间接ELISA法对广东省部分猪场的376份猪血清样本进行了抽样检测。结果显示,副猪嗜血杆菌的阳性率为23.8%,其中母猪阳性率高达31%;保育仔猪为29%,育肥猪为33.6%,育肥猪阳性率显著高于母猪和保育仔猪;冬季(11～1月)副猪嗜血杆菌抗体阳性检出率最高为31.4%、秋季(8～10月份)的阳性检出率最高为18.7%,冬季比秋季高出12.7%,差异极显著(P<0.01)。
- 臧莹安庞木生黄彩梅李淼宋帅李春玲
- 关键词：副猪嗜血杆菌ELISA流行病学阳性率
- 副猪嗜血杆菌分离株hhdA和hhdB基因的克隆及同源性分析被引量：3
- 2012年
- 用预先设计好的hhdA和hhdB基因的PCR扩增引物,扩增不同血清型的副猪嗜血杆菌分离株中的hhdA和hhdB基因,将扩增产物与克隆载体pMDTM18-T连接,转化入感受态细胞DH5α,通过PCR、双酶切及序列测定,测序结果表明:扩增的16株HPS菌中有11株能扩增出hhdA基因,其中10株有测序结果,该10株菌的hhdA基因全基因序列有7种长度,分别为1 754、1 755、1 758、1 759、1 760、1 761和1 762bp。另外,16株HPS菌中有9株能扩增出hhdB基因,该9株菌的hhdB基因全基因序列有7种长度,分别为1 628、1 637、1 639、1 640、1 641、1 646和1 647bp。对于相同血清型的不同菌株来说,它们的2段目的基因序列长度两两不一致。强毒株中,71%的菌株均能扩增出hhdA和hhdB基因;中毒型菌株也基本可以扩增出hhdA和hhdB基因;而无毒型菌株均没有扩增出目的基因。同源性比对可知:所分离菌株的hhdA之间和hhdB基因之间,以及它们分别与GenBank中副猪嗜血杆菌SH0165的hhdA和hhdB基因之间序列同源性都在98%以上,说明所分离的菌株中均含有hhdA和hhdB基因序列。同源系统进化树分析可知,hhdA和hhdB基因在分离菌菌株间具有良好的保守性,可作为研制HPS新型疫苗的候选基因。
- 臧莹安陈国开庞木生宋帅李淼李春玲
- 关键词：副猪嗜血杆菌克隆
- 4512血清型副猪嗜血杆菌外膜蛋白提取及分析被引量：1
- 2013年
- 采用超声波裂解技术,用膜裂解剂十二烷基肌氨酸提取副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)3种血清型(4、5、12)的外膜蛋白(OMP),用Bradford方法测定OMP浓度,将OMP进行SDS-PAGE凝胶电泳,以观察这3种血清型OMP的蛋白质条带分布。结果显示,当超声波条件为:功率为96W,超声破碎时间3s,间隔时间5s,循环作用30min时,提取的OMP进行凝胶电泳结果较好,提取的OMP的平均浓度分别为0.163mg/mL、0.163mg/mL、0.167mg/mL。对提取方法的条件摸索为OMP的深入研究及阐述OMP对Hps的致病机理提供重要参考依据。
- 臧莹安李婉雁庞木生李淼宋帅李春玲
- 关键词：副猪嗜血杆菌外膜蛋白SDS-PAGE
