中央高校基本科研业务费专项资金(2009-1-58)
- 作品数：3 被引量：65H指数：3
- 相关作者：周涛怀晓张瑞郭颂周颖更多>>
- 相关机构：中国农业大学北京市门头沟区科技开发实验基地北京市林业保护站更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 北京地区核桃黑斑病病原菌的分离、致病性测定和16S rDNA序列分析被引量：41
- 2011年
- 核桃黑斑病是危害核桃生产的重要细菌病害,造成树势衰弱,减产严重,甚至树体死亡。2008年在北京郊区栽植的幼树上发现疑似病害,且呈爆发之势。为确定其病原菌分类地位,用组织分离法分离核桃黑斑病菌,纯化培养后用针刺接种法回接到健康核桃树枝条和叶片上,14 d后叶片和枝条分别出现典型病斑,接种发病组织再分离所得病菌性状、16S rDNA与初分离的一致,完成柯赫氏法则验证;以分离的核桃黑斑病菌总DNA为模板,采用细菌16SrDNA的通用引物,通过PCR扩增到约1.5 kb的片段,克隆到pMD-18T载体。测序结果表明克隆的16S rDNA片段长为1 453个核苷酸,通过GenBank上BLAST分析,表明该病原细菌为Xanthomonas campestris。
- 陈善义陶万强王合李金钟周涛
- 关键词：细菌致病变种
- 樱桃病毒A北京分离物外壳蛋白的原核表达及抗血清制备被引量：8
- 2010年
- 根据前期研究获得的樱桃病毒A北京分离物(Cherry virus Aisolate Beijing,CVA-BJ)外壳蛋白基因序列设计引物,将此基因克隆到原核表达载体pET-28a后转化大肠杆菌BL21(DE3),以终浓度为1 mmol/L的IPTG进行诱导表达。Ni珠吸附法纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。间接ELISA测得抗血清效价为1∶2048。以纯化后的蛋白和樱桃叶片总蛋白为检测材料,Western blot分析表明抗血清具有高度特异性。间接ELISA方法检测樱桃病叶,结果呈阳性,与RT-PCR检测结果一致。表明制备的抗血清可用于感病樱桃样品中CVA的检测。
- 郭颂张福兴怀晓周颖张瑞范在丰周涛
- 关键词：间接ELISA脱毒苗
- 北京地区地黄花叶病病原的分子鉴定被引量：16
- 2010年
- 为明确北京地区发生的地黄花叶病的病原,在进行生物学接种分离纯化的基础上利用RT-PCR方法对其进行了分子鉴定。通过接种指示植物和进行单斑分离,获得了病毒的纯分离物。经RT-PCR和序列测定及分析,有明显花叶症状的北京地黄样品受黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus（CMV）和蚕豆萎蔫病毒2Broad bean wilt virus2（BBWV2）复合侵染。为进一步明确BBWV2地黄分离物（BBWV2-Rg）的分类地位,克隆了BBWV2-Rg RNA2多聚蛋白基因,并进行了序列测定和分析,结果表明该多聚蛋白基因由3 195个核苷酸组成,编码1 064个氨基酸。经序列比对分析,BBWV2-Rg编码的外壳蛋白大亚基LCP基因和小亚基SCP基因核苷酸序列与已发表的BBWV2其它株系相应基因核苷酸序列的同源性分别为78.69%~89.30%和76.99%~90.52%,氨基酸序列同源性分别为91.29%~97.51%和87.82%~96.45%。
- 周颖张瑞郭颂怀晓范在丰周涛
- 关键词：黄瓜花叶病毒系统进化树
