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“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX091032674)
作品数:
2
被引量:2
H指数:1
相关作者:
尚广东
宋杰
蒋伏欢
杨运文
赵碧玉
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相关机构:
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南京师大学报...
年份
2篇
2011
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基于β-内酰胺酶的正向选择蛋白表达载体的构建
2011年
外源基因的高效克隆表达是分子生物学和生物化学研究的关键技术,在同时克隆多个基因至表达载体时的高通量操作时尤其重要,常规的基因克隆操作常常存在着很高的载体背景干扰.本研究报道了一种改进型β-内酰胺酶正向选择表达载体pPAE以及与麦芽糖结合蛋白融合的正向选择表达载体pPAE-MBP.实验证明pPAE和pPAE-MBP的克隆效率均高达100%,且目的蛋白均得到了有效的表达.pPAE和pPAE-MBP有作为常规尤其是高通量蛋白表达载体来使用的潜力.
朱宇鹏
高九彩
赵碧玉
尚广东
关键词:
正选择
克隆载体
蛋白表达
麦芽糖结合蛋白
Β-内酰胺酶
重组工程法敲除恶臭假单胞菌KT2440的染色体基因
被引量:2
2011年
恶臭假单胞菌KT2440是在生物降解环境有机物和表达异源基因等方面具重要作用的环境微生物.基因敲除是研究基因和蛋白功能的必要手段.常规的基因敲除方法往往会烦琐耗时且易引入突变的基因克隆操作.本研究采用重组工程(即重组酶催化的PCR产物与基因组上同源片段之间的同源重组)来实现恶臭假单胞菌KT2440的基因敲除.本方法高效、简便、快捷且可以同时进行多个基因的操作,可成为通用的恶臭假单胞菌KT2440的遗传研究方法.
杨运文
蒋伏欢
宋杰
尚广东
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基因敲除
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