中国科学院“百人计划”(IB021061)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：袁彩黄明东刘钐叶晓明更多>>
- 相关机构：中国科学院福建物质结构研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院“百人计划”福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- SARS-CoVSpike蛋白受体结合区的表达及纯化被引量：2
- 2006年
- 目的获得稳定表达SARS冠状病毒spike蛋白受体结合区的果蝇细胞系,表达spike蛋白受体结合区。方法设计引物扩增spike蛋白受体结合区318-513片段,构建重组表达载体S318-pMT/Bip/V5-his,与pCoBlast质粒共转染果蝇S2细胞,经Blasticidin筛选得到的稳定重组细胞系,用硫酸铜诱导表达,Western-Blot检测表达产物。富集的表达产物用镍柱和RESOURCES阳离子交换树脂纯化,SDS-PAGE和Western-Blot检测纯化产物。结果重组spike蛋白受体结合区可在果蝇S2细胞中分泌表达,且具有特异免疫反应性;经镍柱和RESOURCES纯化可得到纯度达90%以上的重组蛋白。结论克隆并在真核生物中分泌表达出具免疫反应原性的spike蛋白受体结合区,镍柱和RESOURCES两步纯化可得到高纯度蛋白。
- 袁彩叶晓明黄明东
- 关键词：纯化
- 分子生物学在蛋白质结晶中的应用被引量：3
- 2005年
- 获得具有高分辨率的蛋白质晶体是目前蛋白质结构测定的主要瓶颈. 蛋白质结晶受很多因素影响,蛋白质自身是结晶时最重要的变量,可以说,蛋白质的内在特性在某种程度上决定了其能否结晶以及所得晶体分辨率的高低. 近年来分子生物学尤其是蛋白质工程的应用有效地提高蛋白质的溶解度、均一性及可结晶性等内在特性,促进蛋白质的结晶,成为提高蛋白质结晶能力和蛋白质晶体分辨率的有效途径.
- 袁彩刘钐黄明东
- 关键词：蛋白质工程蛋白质结晶溶解度均一性
