广东省医学科学技术研究基金(B2008066)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 人CD96基因胞外区的原核表达及抗血清制备
- 2011年
- 目的原核表达并纯化人CD96胞外区蛋白,免疫家兔制备抗体。方法构建pET32-CD96重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,Ni2+-NTA树脂纯化蛋白并免疫家兔,以间接ELISA检测抗体效价,Westernblot鉴定抗体特异性。结果质粒pET32-CD96经测序鉴定,通过SDS电泳显示能在BL21(DE3)中高效表达,相对分子质量约37000;Westernblot实验结果显示制备的多克隆抗体可与HL-60细胞提取蛋白及原核表达的人CD96蛋白胞外区特异性结合。结论成功构建并表达人CD96胞外区蛋白,免疫家兔获得高滴度抗血清,为后续研究奠定了基础。
- 曾建明刘飞谭坪海王丽娜李沫陈中华李松龙一飞李有强陈茶
- 关键词：原核表达白血病干细胞多克隆抗体
