国家自然科学基金(30800396)
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 相关作者：夏红飞马旭宋培培崔熠贺天柱更多>>
- 相关机构：国家人口计生委科学技术研究所中国医学科学院北京协和医学院中国农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- MiR-27靶基因的分析及鉴定被引量：2
- 2010年
- MicroRNAs(miRNAs)是一类约20～25nt的小分子核苷酸,在细胞内的多种生物学过程,如细胞增殖、凋亡、生长、分化和代谢等过程中具有重要的功能。已知miR-27在脂肪细胞和肌肉细胞的发育过程中起了重要作用,其在神经细胞中的表达调节至今仍不清楚。在本研究中,通过miRBase和TargetScan数据库分析了miR-27的靶基因,构建了miR-27的真核表达载体,改造了萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶报告载体,将miR-27的靶基因Bmi1的3′-UTR融合到报告载体中,转染神经胶质瘤细胞,利用双荧光素酶检测系统分析荧光素酶的活性。研究发现miR-27a和miR-27b共同的靶基因主要调节发育过程。MiR-27真核表达载体能产生成熟态的miR-27。MiR-27a、miR-27b或miR-27a和miR-27b联合与Bmi1的3′-UTR的正义序列共转染U343细胞能明显降低萤火虫荧光素酶的活性(分别P<0.05,P<0.05,P<0.01),这提示了Bmi1可能为miR-27的靶基因。
- 夏红飞贺天柱宋培培崔熠马旭
- 关键词：真核表达载体
- 化疗药物致卵巢损伤的表型分析及可能机制被引量：6
- 2016年
- 目的探索化疗药物对小鼠卵巢的影响及可能的机制。方法将60只ICR小鼠平均分为给药组和对照组。给药组小鼠一次性腹腔注射环磷酰胺120mg/kg+白消安20mg/kg,对照组小鼠注射同等体积的DMSO;通过观察小鼠动情周期的变化、性激素水平、卵巢组织形态及卵泡计数分析化疗药物对卵巢的影响;通过检测抗苗勒管激素(AMH)、Ki67表达水平等分析卵巢储备能力和细胞增殖能力的变化。结果给药组雌激素水平(203.00±24.91pmol/L)比对照组(379.00±36.13pmol/L)显著降低(P<0.01);给药组脏器系数(0.0318)比对照组(0.0487)显著下降(P<0.01);给药组可见卵巢萎缩、各级卵泡数目明显减少、卵泡闭锁增多;给药组颗粒细胞分泌的AMH明显减少、增殖细胞数目显著降低(P<0.01)。结论化疗药物能导致小鼠卵巢损伤,卵巢储备能力和卵巢细胞的增殖能力明显下降。
- 吕晓丹李莹张璐王学芹马旭夏红飞
- 关键词：化疗药物卵巢损伤表型分析抗苗勒管激素增殖
- MicroRNA-21在大鼠胚胎植入过程中的差异表达与调节被引量：1
- 2009年
- 目的初步研究microRNA-21(miR-21)在大鼠胚胎植入过程中的作用。方法利用Northern印迹和原位杂交分析了miR-21在大鼠胚胎植入前期和植入期的表达差异,检测miR-21在假孕、人工诱导蜕膜化和延迟着床激活大鼠子宫中的表达模式,分析了17β-雌二醇和孕酮对于大鼠子宫miR-21表达的影响。结果 miR-21在植入前期和植入期的大鼠子宫中存在差异表达,在大鼠妊娠第5天miR-21的表达量开始增加,其主要分布在植入位点内腔基质细胞,在第5.5天子宫miR-21的表达量达到最高。在假孕的D4～D7大鼠子宫中miR-21表达无差异,在延迟着床激活模型中大鼠子宫miR-21的表达量明显增加,miR-21在诱导蜕膜化的大鼠子宫中表达也显著增加,17β-雌二醇和孕酮可以抑制大鼠子宫miR-21的表达。这些结果提示在植入期miR-21的表达增加主要是由胚泡引起的,并且其参与了蜕膜化过程。结论在大鼠妊娠早期,miR-21的表达增加可能有利于胚胎植入的发生。
- 金孝华夏红飞宋培培崔熠韩仲吉马旭
- 关键词：MICRORNA-21SD大鼠子宫胚胎植入
- 细胞凋亡与胎儿神经管发育缺陷被引量：3
- 2010年
- 目的探讨胎儿神经管畸形(NTDs)发育过程中胎盘和神经组织细胞凋亡的发生规律。方法采用原位末端标记技术检测孕16～39 w神经管畸形儿胎盘绒毛组织和中枢神经组织的细胞凋亡。结果脊柱裂暴露处脊髓组织细胞凋亡指数大于非暴露处脊髓组织的凋亡指数(P<0.05)。无脑儿胸段脊髓细胞凋亡指数与非无脑儿胸段脊髓细胞凋亡指数无统计学差异(P>0.05)。NTD儿胎盘绒毛组织细胞凋亡指数明显大于正常胎盘绒毛组织的细胞凋亡指数(P<0.01)。结论NTD儿未闭合处的脊髓组织和胎盘绒毛组织的细胞过度凋亡,与胎儿神经管畸形的发生有关。
- 宋培培刘春梅夏红飞闫木菊贾孟春马旭
- 关键词：胎儿神经管畸形凋亡胎盘绒毛组织中枢神经系统
- miR-128真核表达载体的构建及功能的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的构建miR-128真核表达载体,研究其在神经胶质瘤细胞株U343表达及对U343细胞增殖的影响。方法以人神经胶质瘤细胞株U343的DNA为模板扩增miR-128-1和miR-128-2的前体序列,将人miR-128-1(hsamiR128-1)和人miR-128-2(hsa-miR128-2)基因克隆到真核表达载体pCR3.1,将pCR3.1-miR-128-1(p-128-1)和pCR3.1-miR-128-2(p-128-2)表达载体瞬时转染U343细胞,采用Northern印迹检测成熟的miR-128表达。将U343细胞接种96孔板,MTT法检测过表达miR-128对细胞增殖的影响。结果p-128-1和p-128-2表达载体经酶切及测序鉴定正确;二者转染细胞后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增结果显示,其能有效表达miR-128的前体;Northern印迹结果均能产生成熟态的miR-128。MTT检测结果在无血清培养和维甲酸处理的情况下,细胞的增殖能力明显下降。结论成功构建了p-128-1和p-128-2的真核表达载体,转染神经胶质瘤细胞后能有效表达,miR-128基因过表达能抑制U343细胞的增殖。
- 夏红飞贺天柱崔熠马旭
- 关键词：真核表达载体细胞增殖基因表达
