四川省应用基础研究计划项目([2005]14)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：杨华张小明蒋红邵阳曾南林更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院川北医学院附属医院更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SPIO标记大鼠骨髓基质干细胞及体外磁共振成像研究被引量：4
- 2008年
- 目的探讨以多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)为转染介质介导超顺磁性氧化铁微粒(superparamgnetic iron oxides,SPIO)标记大鼠骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的合适条件,通过标记细胞的体外磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)获取最佳的磁共振扫描序列。方法分离、纯化、培养大鼠BMSCs,SPIO和PLL以1∶0.0012混合配制氧化铁-多聚赖氨酸(F-PLL)混合液,用铁浓度分别为0、4.2、8.4、21、42、84μg/ml的FE-PLL复合物标记BMSCs。计算细胞标记阳性率,测量并绘制未标记细胞和不同浓度铁标记细胞的MTT生长曲线;对不同浓度铁标记的细胞进行磁共振成像。分别用浓度为0、0.05、0.25、0.5、1.0、5.0μg/ml的PLL同BMSCs共同培养,了解各种浓度PLL对细胞的生存是否有影响。结果细胞的标记率分别为0%、(44.40±11.33)%、(71.97±8.01)%、(88.86±9.10)%、(98.24±2.94)%、100%,随着SPIO浓度的增加而增加。MTT显示在铁浓度<42μg/ml时FE-PLL复合物对细胞的生长活性无明显影响,而铁浓度为84μg/ml时,细胞的生长活性受到抑制。PLL在浓度≤1.0μg/ml时对细胞的活力无明显影响;当PLL浓度为5.0μg/ml时,细胞生长明显受抑。MRI信号随FE-PLL复合物浓度的增加而增加(P<0.05),标记细胞的信号在T1WI的改变不及在T2WI及T2*WI明显,而以T2*WI信号改变最明显(P<0.05)。结论以PLL为转染介质,SPIO能够高效的标记BMSCs,并且在合适的浓度范围内不会影响干细胞的生长活性。
- 杨华张小明邵阳蒋红翟昭华
- 关键词：超顺磁性氧化铁多聚赖氨酸骨髓基质干细胞
- 超顺性氧化铁在细胞内外对磁共振信号的影响被引量：4
- 2008年
- 背景:目前关于超顺磁性氧化铁在进行细胞标记和作为网状内皮细胞系统特异性对比剂时对周围质子驰豫时间影响的报道差异较大。目的:验证超顺磁性氧化铁在细胞内外对磁共振信号的影响有否差异,以选择最佳的磁共振扫描方法。设计、时间及地点:对比观察,细胞成像实验,于2006-06/2007-01在川北医学院附属医院医学影像研究所和风湿免疫研究所完成。材料:超顺磁性氧化铁采用Resovist(SHU555A),由德国先灵公司惠赠。将大鼠骨髓基质干细胞用铁质量浓度分别为0,4.2,8.4,21,42,84mg/L的氧化铁-多聚赖氨酸复合物标记。方法:应用GE Signa EXCITE 1.5TMR扫描仪对19只含不同质量浓度超顺磁性氧化铁的EP管及不同质量浓度铁标记后的磁标记细胞悬液进行体外MR成像。主要观察指标:超顺磁性氧化铁在不同磁共振序列上随质量浓度改变其信号改变的规律;低质量浓度时细胞内外超顺磁性氧化铁对磁共振信号影响的差异。结果:①在细胞外:T1WI信号强度随超顺磁性氧化铁质量浓度的增加先升高后降低,在T2WI上随质量浓度的增加信号降低,在低质量浓度时,T1WI及T2*WI较T2WI更敏感,以T2*WI最敏感(P<0.05)。②在细胞内:MR信号强度随培养液中铁质量浓度的增加而增加,在FSET1WI,铁质量浓度≤21mg/L时,各组间信号强度没有显著性差异,当质量浓度为42mg/L和84mg/L时信号强度较对照组明显升高(P<0.05)。在FSPGR T1WI,当铁质量浓度≥8.4mg/L时,各管信号强度明显高于对照管(P<0.05)。在FSE T2WI及GRE T2*WI上,当质量浓度为4.2mg/L时,信号强度较对照管信号强度明显降低(P<0.05),且T2*WI信号降低较T2WI明显(P<0.05)。结论:低质量浓度的超顺磁性氧化铁在细胞内外对MR信号的影响是不同的,T2*WI为检测超顺磁性氧化铁较敏感而特异的序列。
- 杨华张小明邵阳蒋红曾南林
- 关键词：超顺磁性氧化铁磁共振成像
- 超顺磁性氧化铁体外标记大鼠骨髓基质干细胞的传代:细胞中铁粒子会随传代而变化吗?
- 2009年
- 背景:超顺磁性氧化铁作为磁共振对比剂已进行了大量临床实验,但其随标记细胞传代分化后的分布及代谢却报道甚少。目的:实验首次观察和描述了体外超顺磁性氧化铁标记的大鼠骨髓基质干细胞及其传代细胞的情况,并以磁共振信号检测铁粒子随细胞传代的演变情况。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-06/2007-01在川北医学院附属医院医学影像研究所和风湿免疫研究所完成。材料:清洁级雌性大白鼠2只,由川北医学院动物中心提供。超顺磁性氧化铁由德国先灵公司惠赠。方法:抽取大鼠双侧股骨和胫骨的骨髓,采用贴壁法分离纯化骨髓基质干细胞,用铁浓度为42mg/L的氧化铁-多聚赖氨酸复合物600μL进行体外标记。主要观察指标:倒置显微镜下观察各代细胞标记阳性率,磁共振扫描测定磁共振信号强度变化百分率。结果:普鲁士蓝染色后,镜下第1代细胞超顺磁性氧化铁标记阳性率为100%,随着传代次数的增加,第1～5代细胞标记阳性率逐级降低。与未接受超顺磁性氧化铁标记的PBS对照比较,除第1,2代细胞信号强度变化率无明显变化外,随着细胞的传代磁共振信号强度变化百分率逐渐降低,细胞标记率与T2*WI信号强度呈负性相关(r=-0.9866,P<0.005)。结论:标记入骨髓基质干细胞内的铁能随细胞的传代而传向子代,并可以在一定时期内用磁共振进行追踪检测,实验结果亦首次提出了磁标记的细胞铁粒子可随细胞传代而递减的规律。
- 杨华张小明蒋红邵阳曾南林
- 关键词：超顺磁性氧化铁
