国家自然科学基金(81060129)
- 作品数:4 被引量:16H指数:2
- 相关作者:孙素荣张渝疆刘东亮李阳孟卫卫更多>>
- 相关机构:新疆大学新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金新疆生物资源基因工程重点实验室开放基金国家科技基础性工作专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 重组新疆出血热病毒S和M基因疫苗诱导小鼠免疫应答的评价被引量:5
- 2014年
- 目的选取新疆出血热病毒M基因(编码糖蛋白Gn,Gc)和S基因(编码核蛋白NP)部分基因片段,并进行部分片段的嵌合,分别插入至真核表达载体PVAX1中构建重组质粒,并将重组质粒分别免疫小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答的效果。方法将NP(aa1~482)、NP2(aa170~305)和糖蛋白Gn(aa529~820)、Gc(aa1050~1697)片段,及Gc-NP2片段分别构建到真核表达载体PVAX1上构建重组质粒,用重组质粒免疫小鼠,通过T细胞增殖试验,细胞因子含量测定和ELISA对免疫效果进行评价。结果经双酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确。pVAX1-NP2实验组小鼠的血清抗体效价可以达到1∶6 400,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖明显,两组的IFN-γ的表达水平也高达(865.15±6.29)pg/mL及(1727.21±33.93)pg/mL,与对照组相比,差异具有统计学意义(P〈0.01)。pVAX1-NP2及pVAX1-Gn实验组IL-4的表达水平为(19.11±1.20)pg/mL和(20.07±1.67)pg/mL,都显著高于对照组的(9.35±1.82)pg/mL(P〈0.05)。结论成功构建了多个重组真核表达载体,免疫小鼠后获得了效价高,特异性好的抗体。各重组质粒都激起了较强的体液免疫及细胞免疫,pVAX1-NP2及pVAX1-Gc-NP2实验组效果最好,可将其作为新疆出血热病毒的候选疫苗。
- 李阳刘东亮汪梅芳武勇凯王咏星李轶杰彭倩马洁杨建华孙素荣
- 关键词:新疆出血热病毒基因免疫基因疫苗
- 新疆出血热病毒核蛋白多克隆抗体的制备及其免疫学评价被引量:1
- 2013年
- 目的原核细胞中表达、纯化新疆出血热病毒BA88166毒株核蛋白(NP)并制备及鉴定抗NP蛋白的多克隆抗体。方法采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出BA88166毒株S基因的cDNA片段,将其构建到原核表达载体pET-32a上,形成重组原核表达质粒pET-88166S。构建好的质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,经镍柱亲和层析法纯化NPHis融合蛋白,SDS-PAGE分析蛋白相对分子质量(M r)。用该纯化蛋白免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blot法检测血清效价和特异性。结果双酶切鉴定和DNA测序证实构建的pET-88166S重组表达载体正确,目的基因序列与GenBank中公布的序列一致,在E.coli BL21中表达的NP-His融合蛋白经SDS-PAGE分析,其M r约为66 000。ELISA检测抗体效价高于1∶25 600,蛋白免疫印迹实验结果表明抗体能特异性识别新疆出血热病毒YL04057毒株的NP蛋白及其截短蛋白。结论成功获得新疆出血热病毒NP-His融合蛋白,得到了特异性兔抗NP蛋白多克隆抗体。
- 刘东亮李阳赵晶吴婷孙素荣
- 关键词:新疆出血热病毒核蛋白原核表达多克隆抗体
- 克里米亚-刚果出血热相关生物学研究进展被引量:10
- 2011年
- 克里米亚-刚果出血热(CCHF)是一种典型的蜱传自然疫源性疾病,是在特定的生态环境中由病原体(克里米亚-刚果出血热病毒,CCHFV)、宿主媒介、动物(蜱类、大型草食动物和啮齿动物)构成的不依赖于人类而在自然界中可独立存在的传染性疾病,广泛分布于非洲、欧洲、亚洲和中东地区的30多个国家。
- 孙素荣孟卫卫张渝疆
- 关键词:克里米亚-刚果出血热生物学研究
- 新疆塔里木河流域出血热自然疫源地多样性调查分析(Ⅰ)被引量:1
- 2013年
- 目的了解并掌握塔里木河流域新疆出血热自然疫源地的多样性。方法根据塔里木河流域地理环境特征,在上、中、下3个区段设立植物群落生态学和土壤地质调查研究样方,采用生态学方法统计分析不同生态景观下植物群落和土壤地质的特征。结果塔里木河流域新疆出血热自然疫源地由沼泽湿地、草甸湿地、盐碱地、沙质盐碱荒漠和盐碱风蚀荒漠组成,其植物群落构成和分布与流域土壤地质类型的分布一致,群落结构随地质类型的改变而变迁,具有丰富的多样性。结论干旱和半干旱的沙质盐碱荒漠植物群落结构完整和物种丰富多样性,是维持新疆出血热自然疫源地疾病流行的重要因素。
- 雒涛郝建梅孙素荣李冰阿布力克木.阿不都热西提阿不力米提.买托呼提王启果张渝疆
- 关键词:新疆出血热自然疫源地多样性塔里木河流域