黑龙江省教育厅科学技术研究项目(11551041) 作品数:5 被引量:32 H指数:4 相关作者: 张俊华 潘春清 刘烨 王中业 刘扬 更多>> 相关机构: 东北农业大学 更多>> 发文基金: 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 哈尔滨市科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
黑龙江省稻瘟病菌遗传多样性研究 被引量:4 2013年 利用8个代表性菌株从153对引物组合中筛选出多态性高且稳定性好的10对引物组合,对来自黑龙江省各水稻主要产区的214个稻瘟病菌菌株进行RSAP(Restriction site amplified polymorphism)分析,得到134条多态性条带,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,得到196个不同单元型(带型)的代表性菌株的指纹图谱。用UPGMA进行聚类分析,以相似系数0.83为界,将214个菌株196个单元型划分为10个遗传宗谱,10个遗传宗谱在黑龙江省的分布存在明显地域差异。 张俊华 刘扬 孙洪利 潘春清 刘洋大川 张明 王中业关键词:稻瘟病菌 根癌农杆菌介导gfp基因转化水稻纹枯病菌及其对病原菌稳定性和致病力的影响 被引量:3 2016年 本文对根癌农杆菌介导gfp基因转化水稻纹枯病菌及其对病原菌稳定性和致病力的影响进行了系统研究。结果表明,30μg/m L潮霉素B可作为转化子的筛选浓度,水稻纹枯病菌遗传转化的最佳条件为:共培养AS浓度为250μmol/m L,预诱导时间为9 h,共培养温度为26℃,共培养时p H为5.8~6.0,共培养时间为22 h。分别对随机选取的5个转化子进行荧光显微镜观察、PCR扩增及测序。结果表明,绿色荧光蛋白基因gfp已成功转化到水稻纹枯病菌中。转化子稳定性及致病力鉴定结果表明,转化子连续转接5代后仍对潮霉素B具有抗性,表明gpf成功转化到水稻纹枯病菌中且稳定遗传。转化子与野生型水稻病菌导致的水稻发病程度基本一致,表明gfp遗传转化后对水稻纹枯病菌的致病力无显著影响。本研究结果为开展水稻纹枯病菌与水稻品种互作机制奠定了基础。 张俊华 牟明 常浩 李云鹏 范琳 钟庆燕 潘春清 邹徳堂关键词:根癌农杆菌 绿色荧光蛋白 水稻纹枯病菌 黑龙江省水稻立枯病病原鉴定及致病性研究 被引量:11 2015年 对分离自黑龙江省16个市县的369个水稻立枯病菌株进行了形态学和分子生物学鉴定,它们分别属于3个属9个种。致病性测定结果表明,尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和轮枝镰刀菌(Fusarium verticillioides)的致病性相对较强,立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)其次;腐皮镰刀菌(Fusarium solani)、木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)、燕麦镰刀菌(Fusarium avenaceum)、层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)和腐霉菌(Pythium spp.)的致病性相对较弱;Fusarium commune不具致病性,说明其只是一种腐生菌,不引起水稻的立枯病。结合分离出现频率和致病性测定结果,确定尖孢镰刀菌(F.oxysporum)和轮枝镰刀菌(F.verticillioides)为黑龙江省水稻立枯病的优势病原菌。 刘烨 赵兴红 韩雨桐 张琳淋 张俊华关键词:水稻立枯病 病原菌 水稻响应稻瘟病菌胁迫的cDNA-AFLP分析 被引量:4 2016年 本研究采用cDNA-AFLP技术建立了水稻与稻瘟病菌互作的基因表达图谱,对差异表达基因功能进行分析。利用64对引物进行筛选,共获得了960个转录衍生片段(transcript-derived fragment TDF)。回收测序200条片段,获得134条可读序列,通过BLAST比对分析,得到74个不重复的差异TDFs。对74个TDFs对应的聚丙烯酰胺凝胶上表达变化情况进行统计,接种稻瘟病菌后基因诱导表达上调多余下调表达,早期上调表达基因有6个,晚期上调表达基因有11个,其他形式上调表达基因32个,各种下调表达基因25个。 张俊华 常浩 陈宇飞 潘春清 刘扬 牟明 李云鹏关键词:水稻 稻瘟病菌 CDNA-AFLP 农杆菌介导稻瘟病菌绿色荧光蛋白(GFP)遗传转化研究 被引量:12 2014年 稻瘟病是水稻生产中的主要病害,抗病品种选育和利用是控制稻瘟病最有效措施。研究稻瘟病菌与水稻品种互作机制是培育抗病品种的基础。GFP(Green fluorescent protein)基因因其具有片段小、易与多种不同蛋白质N端或C端融合等特点,广泛应用于病菌与寄主植物互作研究中。研究以p BGg Hg作为转化载体,根癌农杆菌C58C1作为转化介体,转化稻瘟病菌的强致病菌株py1022。研究发现,250μg·m L-1潮霉素B能完全抑制稻瘟病菌生长,利用根癌农杆菌介导稻瘟病菌遗传转化的最佳条件为:稻瘟病菌分生孢子浓度为1×105个·m L-1,共培养时间为4 d,共培养AS浓度为200μmol·m L-1,共培养温度为28℃。随机挑取8个转化子分别进行PCR扩增后测序、荧光显微镜下观察、致病力及稳定性测定,结果表明GFP成功转化到稻瘟病菌中,可为稻瘟病菌与水稻品种的互作机制研究提供技术支撑。 张俊华 刘烨 韩雨桐 潘春清 王中业 张淋淋 崔凯旋关键词:稻瘟病菌 农杆菌介导遗传转化