安徽省高等学校优秀青年人才基金(2007iq1184)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
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- 小西葫芦黄花叶病毒外壳蛋白抗体制备被引量：4
- 2010年
- 根据已报道的小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)序列设计特异引物,扩增ZYMV的全长外壳蛋白(CP)基因,插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)plys S中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%～20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳纯化诱导产物,免疫小鼠,获得经过Western blot分析为特异的抗CP血清。硫酸铵沉淀法与Protein A-Red Sepharose亲和层析相结合提取IgG,获得效价达1∶4800的一抗,对西瓜和甜瓜田间样品的间接ELISA检测表明,ZYMV在田间普遍发生,研究制备的IgG可用于ZYMV检测。
- 祁伟韦传宝杜宇
- 关键词：小西葫芦黄花叶病毒原核表达抗血清制备间接ELISA
- 皖贝母茎尖脱毒组织培养技术研究
- 2009年
- 应用ELISA方法对茎尖培养和热处理结合茎尖培养脱毒生产无病毒皖贝母种苗效果进行研究,结果表明,茎尖培养<0.5 mm的茎尖无法成活;1～2 mm茎尖虽然成活率高但没有脱毒效果;0.8～1 mm茎尖的脱毒率为20%;0.5～0.8 mm的茎尖脱毒率为40%;0.3～0.5 mm茎尖脱毒率为60%。0.8～1.0 mm茎尖经50±1℃热处理20 min脱毒效果最好,脱毒率达100%;愈伤组织和不定芽的诱导需要不同的激素配比,诱导愈伤组织的合适培养基为:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 4 mg/L,诱导不定芽并能一次成苗的合适培养基为:MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,平均每个外植体产生2～3个不定芽。
- 杜宇韦传宝贾玉成
- 关键词：皖贝母脱毒病毒检测
- 芋花叶病毒检测试剂盒的研制被引量：9
- 2009年
- 用IPTG诱导融合表达芋花叶病毒（Dasheen mosaic virus，DMV）CP基因的菌株，通过12％SDS．PAGE和5％-20％梯度SDS—PAGE二次制备电泳获得纯化的CP免疫家兔，获得经过Western blot分析为特异的抗CP血清．硫酸铵沉淀初步提取IgG，然后用Protein A—Red Sepharose亲和层析进一步纯化IgG，IgG与甘油1：1混合获得效价1：3100的一抗，将一抗、羊抗兔二抗和4-硝基苯基磷酸二钠组成DMV检测试剂盒．用研制的检测试剂盒对芋、魔芋和马蹄莲叶片样品的间接ELISA检测表明，DMV在田间普遍发生，并确定研制的试剂盒完全可用于DMV检测．
- 韦传宝贾玉成杜宇
- 关键词：芋花叶病毒抗血清制备试剂盒研制
