国家自然科学基金(30000184)
- 作品数：9 被引量：90H指数：6
- 相关作者：何庆南易著文何小解周频黄丹琳更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅二医院中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 儿童激素耐药型与激素敏感型肾病综合征尿蛋白组学的初步研究被引量：6
- 2009年
- 目的筛选和鉴定激素耐药型(SRNS)与激素敏感型原发性肾病综合征(SSNS)尿液中差异表达的蛋白质,寻找可能与肾病综合征激素耐药和激素敏感相关的蛋白质。方法SSNS治疗前后病例、SRNS、正常对照各5例,提取尿液全蛋白,采用双向凝胶电泳建立全蛋白凝胶图谱;银染后用Image Master 2D V3.01软件分析差异表达蛋白质点,利用MALDI-TOF-MS分析获得肽质量指纹图谱,通过Mascot软件进入NCBI数据库,鉴定出差异表达蛋白质。结果SRNS组与SSNS治疗前组尿液2-DE凝胶比较有差异蛋白质点66个,其中仅出现于SRNS组24个、SSNS治疗前组27个;SSNS治疗后组与正常对照组尿液2-DE凝胶比较有差异蛋白质点75个,其中仅出现于SSNS治疗后组11个。对18个差异蛋白质点进行分析,鉴定出α1-抗胰蛋白酶、转铁蛋白、带异类电荷糖蛋白复合体等9类差异表达的蛋白质。结论成功鉴定了SRNS和SSNS的尿液中存在9类差异表达的蛋白质,部分蛋白可能是SRNS或SSNS的标志物。
- 黄爱文何庆南周频丁娟娟易著文
- 关键词：原发性肾病综合征激素耐药蛋白组学儿童
- 肾病综合征患儿外周血单个核细胞内GR α和GR β表达的意义被引量：40
- 2001年
- 目的 探讨原发性肾病综合征 (INS)患儿外周血单个核细胞 (PBMC)内两种糖皮质激素受体 (GR)亚型———GRα和GRβ表达水平与糖皮质激素治疗效应之间的关系。方法 应用免疫细胞化学方法、WesternBlot和凝胶电泳迁移率变化方法 (EMSA) ,分别检测不同激素效应INS患儿和正常对照组儿童GRα和GRβ免疫阳性的PBMC数目、PBMC细胞内GRα和GRβ蛋白质表达和GR DNA连接活性。结果 (1)INS患儿PBMC内同时有GRα和GRβ的表达 ,并以GRα表达为主。 (2 )激素敏感型INS患儿GRα阳性的PBMC细胞数为 (5 0 0± 4 5 ) ,激素抵抗型INS患儿为 (4 7 0± 5 5 ) ,两组相比差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ;而激素抵抗型INS患儿GRβ阳性PBMC细胞数 (2 2 0± 3 5 )明显高于激素敏感型INS患儿 (7 5± 2 0 ) (P <0 0 1)。 (3)WesternBlot实验结果显示 ,激素抵抗型INS患儿PBMC核内GRα蛋白量明显低于激素敏感型INS患儿 ,而GRβ蛋白量却明显高于激素敏感型患儿。(4 )激素抵抗型INS患儿的GR DNA连接能力明显低于激素敏感型患儿。结论 INS患儿PBMC内GRα和GRβ表达比例失调。
- 何庆南易著文何小解黄丹琳
- 关键词：INSGRΑGRΒ
- 儿童原发性肾病综合征激素抵抗与糖皮质激素受体基因多态性的相关性被引量：6
- 2004年
- 目的 原发性肾病综合征 (PNS)是常见的小儿肾脏疾病 ,其发病机制目前尚不清楚 ,研究发现 ,急性淋巴细胞白血病、狼疮性肾炎糖皮质激素耐药与糖皮质激素受体 (GCR)突变有关。是否是由于GCR基因发生改变引起GCR功能异常 ,导致PNS患儿对糖皮质激素 (GC)耐药 ,目前尚未见报道。该文探讨儿童原发性肾病综合征对糖皮质激素治疗的效应与糖皮质激素受体DNA结合区、激素结合区基因多态性的相关性。方法 采用常规方法提取 10 0例原发性肾病综合征患儿 (其中激素敏感组 4 4例、激素抵抗组 5 6例 )及 10 0例对照组儿童外周血单核细胞DNA ,聚合酶链反应 (PCR)技术扩增所有DNA ,GCRDNA结合区 ,激素结合区全部外显子目的片断 ,然后进行单链构象多态性 (SSCP)分析。SSCP显示异常的DNA片断直接测序。结果 激素敏感组、激素抵抗组、对照组儿童外周血GCRDNA结合区、激素结合区所有外显子PCR产物SSCP电泳结果 ,未发现SSCP条带多态性。结论 该研究未发现PNS患儿激素抵抗与GCRDNA结合区、激素结合区基因多态性之间存在相关性。
- 彭华保易著文何庆南何小解马祖祥程国华
- 关键词：肾病综合征糖皮质激素受体多态性儿童
- P300在肾病综合征糖皮质激素耐药中的作用被引量：7
- 2005年
- 目的观察原发性肾病综合征(PNS)激素敏感与激素耐药组P300表达的差异,探讨P300在肾病综合征糖皮质激素耐药中的作用,为揭示PNS激素耐药发生机制提供理论依据。方法采用免疫组化法检测正常对照组肾组织及40例PNS患儿(激素敏感组20例,激素耐药组20例)肾活检组织中P300表达差异。结果正常肾组织仅偶见肾小管上皮细胞P300呈阳性表达;PNS患儿肾组织均存在不同程度P300表达,主要分布于肾小管上皮细胞,肾小球系膜区表达微弱或未表达,其他肾固有细胞未见P300表达;激素敏感组肾小管上皮细胞P300表达较激素耐药组明显增多(P<0.01),P300表达密集部位的肾小管形态正常,结构完整;肾小管上皮细胞P300阳性表达与肾小管间质病理积分呈负相关(P<0.01)。结论P300蛋白主要通过肾小管上皮细胞促进GC效应发挥;PNS患儿肾小管上皮细胞P300表达下降,可能是导致GC耐药及增加GC对肾小管上皮细胞损伤的机制之一。
- 张慧琼易著文何小解何庆南党西强莫双红
- 关键词：肾病综合征P300免疫组化糖皮质激素耐药
- 糖皮质激素治疗肾病综合征耐药的机制探讨被引量：2
- 2008年
- 糖皮质激素（GC）是治疗原发性肾病综合征的首选药物，而激素的耐药问题使其治疗面临严峻挑战。GC在体内发挥效应需经历一系列连续的复杂过程，此效应途径中的任何一个环节出现异常，都有可能导致GC耐药的发生。近年来的研究表明，GC受体前代谢酶、多药耐药基因及其编码蛋白质、GC受体、受体附件蛋白、NPHS2基因等都可能与GC耐药有关，而如何从复杂纷纭中寻找到GC耐药的分子标志物将是今后研究的方向。
- 周频何庆南
- 关键词：糖皮质激素耐药肾病综合征11Β-羟基类固醇脱氢酶受体
- 糖皮质激素受体亚型与糖皮质激素抵抗关系的研究进展被引量：6
- 2001年
- 糖皮质激素抵抗型病例的出现 ,对于以激素为主要治疗药物的疾病 (如肾病综合征 )而言是一个严重的挑战 ,鉴于糖皮质激素主要通过结合糖皮质激素受体方能发挥生物学和治疗效应 ,这方面的研究一直是颇受关注的焦点。晚近的研究显示糖皮质激素受体 β(GRβ)可能是一种潜在的内源性糖皮质激素效应的拮抗因子 ,为揭示糖皮质激素抵抗现象的发生提供了一种新的研究思路。本文就糖皮质激素受体亚型 (GRα和GRβ)与糖皮质激素效应、尤其是与糖皮质激素抵抗之间关系的研究进展做一综述。
- 何庆南易著文
- 关键词：糖皮质激素受体糖皮质激素肾脏疾病
- GRβ对肾小球系膜细胞糖皮质激素效应的影响(英文)被引量：2
- 2007年
- 目的:构建糖皮质激素受体β(GRβ)不同表达水平的肾小球系膜细胞株,研究GRβ对肾小球系膜细胞糖皮质激素效应的影响。方法:利用逆转录病毒载体pLXSN将重组GRβ正义和反义基因转入肾小球系膜细胞,经细胞培养、逆转录聚合酶链反应、基因测序和蛋白质印迹分析鉴定所构建的细胞株,应用MTT法和流式细胞术检测细胞内不同表达水平的GRβ对地塞米松的细胞增殖抑制效应和细胞周期变化的影响。结果:构建的肾小球系膜细胞分别有正确的GRβ正义和反义基因整合,转染了GRβ正义基因的肾小球系膜细胞内GRβ蛋白质表达水平明显高于转染了GRβ反义基因者(109.74±10.63vs.19.08±1.01,P<0.05);地塞米松对GRβ高表达的肾小球系膜细胞的增殖抑制效率显著低于GRβ低表达的肾小球系膜细胞(18.47%±2.12%vs.60.33%±5.29%,P<0.05)。在地塞米松的抑制下,转染了正义GRβ基因的细胞中,其S期细胞降低程度和G1期细胞升高的程度均明显低于未转染的细胞。结论:肾小球系膜细胞内高表达的GRβ具有拮抗糖皮质激素效应的作用,细胞内GRβ表达水平是决定细胞对激素敏感或抵抗的重要因素。
- 张磊何庆南朱敏周钢丁娟娟周频吴小川易著文
- 关键词：糖皮质激素受体Β糖皮质激素基因转染肾小球系膜细胞
- GRβ在原发性肾病综合征患儿糖皮质激素耐药中的作用被引量：29
- 2005年
- 目的 研究原发性肾病综合征患儿PBMCsGRβ表达水平与肾组织中原位GRβ表达水平的关系及其在PNS患儿糖皮质激素耐药中的作用。方法 40例原发性肾病综合征患儿分成激素敏感组与激素耐药组,每组各 20例,应用免疫组织化学技术,对其肾活检组织与PBMCs中GRα、GRβ进行检测,应用半定量评分法对各组肾病患儿肾小球与肾小管间质病理改变进行半定量分析。结果 激素耐药组肾小球病理积分与肾小管病理积分高于激素敏感组 (P均 <0.01);激素敏感组与激素耐药组原发性肾病综合征患儿肾活检组织GRα与PBMCs中GRα表达低于正常对照组 (P均 <0.01);激素敏感组与激素耐药组原发性肾病综合征患儿肾活检组织GRβ与PBMCs中GRβ表达高于正常对照组(P均<0.01);中度损害组肾活检组织与PBMCsGRβ表达高于轻度损害组,重度损害组高于中度损害组(P均<0.01);相关分析表明:原发性肾病综合征患儿PBMCs和肾固有细胞GRβ表达明显正相关(r=0. 651; P<0.01), PBMCs和肾固有细胞中GRβ表达与肾脏病理积分正相关(r=0.579, 0.623,P均<0.01)。结论 原发性肾病综合征患儿肾局部、PBMCs中GRβ过表达与PNS患儿糖皮质激素耐药发生有关,与PBMCs和肾局部GRα数目的多少无关,过表达的GRβ可能是通过拮抗GRα的活性影响激素效应的发挥。
- 何小解易著文党西强张慧琼何庆南莫双红白海涛耿文茂杨华彬
- 关键词：肾病综合征糖皮质激素类糖皮质激素受体
- GRβ在肾病综合征患儿中的表达及影响因素研究被引量：22
- 2002年
- 目的 :探讨原发性肾病综合征 (INS)患儿外周血单个核细胞 (PBMC)内糖皮质激素受体 β(GRβ)表达的意义 ,以及激素抵抗型肾病综合征患者的血清对GRβ表达的影响。方法 :采用免疫细胞化学和蛋白质印迹方法检测INS患儿GRβ免疫阳性PBMC(GRβ+ PBMC)数目和PBMC细胞核内GRβ蛋白量表达 ,通过体外细胞培养检测激素抵抗型INS患儿的血清对正常对照组儿童和激素敏感型INS患儿GRβ+ PBMC数目和PBMC细胞核内GRβ蛋白质表达的影响。结果 :激素抵抗型INS患儿GRβ+ PBMC细胞数和细胞核内GRβ蛋白质表达均明显高于激素敏感型INS患儿 (P<0 .0 1) ;经激素抵抗型INS患儿的血清体外共培养 2 4h后 ,正常对照组和激素敏感型INS患儿GRβ+ PBMC细胞数和细胞核内GRβ蛋白表达量均显著增加 (P <0 .0 1)。结论 :INS患儿糖皮质激素抵抗可能与GRβ的表达亢进有关 ,而血清中的炎症因子可能是诱导GRβ高表达、进而导致继发性糖皮质激素抵抗的一个重要因素。
- 何庆南易著文何小解黄丹琳
- 关键词：受体糖皮质激素肾变病综合征单核白细胞
