黑龙江省海外学人科研资助项目(1151hz031)
- 作品数:8 被引量:18H指数:3
- 相关作者:雷蕾钟淑琦单智焱陈雅隽冯秀清更多>>
- 相关机构:哈尔滨医科大学中国科学院嘉兴学院更多>>
- 发文基金:黑龙江省海外学人科研资助项目国家自然科学基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 高浓度RA诱导小鼠胚胎干细胞分化为神经细胞被引量:6
- 2007年
- 目的:高浓度RA诱导小鼠ESC体外向神经细胞分化。方法:通过5μMRA刺激拟胚体向神经前体细胞分化,在不同基质上进一步诱导神经前体细胞分化为神经细胞,通过免疫荧光鉴定。结果:5μmol/LRA诱导神经前体细胞分化;神经前体细胞分化为β-tubulinⅢ阳性神经细胞,β-tubulinⅢ阳性细胞中有55%为GABA阳性,4%为CHAT阳性细胞。
- 申景岭单智焱王燕黄小义赵勇雷蕾金连弘
- 关键词:RAESC诱导分化神经细胞
- 应用FRAP技术分析小鼠嵌合体和正常胚胎发育中细胞间隙连接介导通讯被引量:1
- 2008年
- 应用激光扫描共聚焦显微镜的光漂白恢复(fluorescence redistribution after photobleaching,FRAP)技术分析小鼠嵌合体胚胎和正常胚胎的卵裂球之间细胞间隙连接介导通讯(gap junctional inter-cellular communica-tion,GJIC),结果发现:8-细胞期嵌合体胚胎的光漂白恢复率(24.3%)明显低于正常胚胎(64.2%),提示GJIC的降低可能是影响嵌合体胚胎发育率降低的因素之一;囊胚的光漂白恢复率也较低(22.7%),提示随着细胞分化,GJIC的水平有所降低。
- 徐营雷蕾
- 关键词:激光扫描共聚焦显微镜嵌合体
- 蛋白激酶C在卵母细胞成熟、受精和早期胚胎发育过程中的作用被引量:4
- 2008年
- 小鼠胚胎发育过程中,蛋白激酶C(PKC)家族在调节卵的活化、完成减数分裂和开始有丝分裂、胚胎的致密,以及囊胚形成过程中都有作用,但其多个亚型的功能还知之甚少。研究表明,已知的十种PKC亚型以及PKC锚定蛋白——活化的磷脂酶C受体(RACK)在小鼠胚胎2-细胞期至囊胚期都有表达。本文归纳了近年来对PKC亚型各自不同的动态分布模式和表达水平的研究,这些研究表明它们在早期胚胎发育的各个时期都至关重要,尤其在胚胎4-细胞期的早期,个别亚型在核内的浓度是瞬间升高的,提示我们这些PKC亚型也许控制着早期小鼠胚胎核的组建以及机能调节。本文对核移植胚胎中PKC的可能作用也进行了分析。
- 陈雅隽钟淑琦冯秀清雷蕾
- 关键词:蛋白激酶C卵母细胞成熟受精胚胎发育小鼠
- 孤雌胚胎干细胞的组织相容性与印迹状态被引量:1
- 2010年
- 从孤雌胚胎建立的孤雌胚胎干细胞(pESCs)具有与受精的胚胎干细胞(fESCs)相似的全能性和自我更新能力,因免除了胚胎的破坏,所以避免了一些法律和伦理的相关问题。pESCs也具有其特殊的性质,即与卵母细胞供者是组织相容的,因此更适合于细胞与组织的替代治疗。另外,由于pESCs的特殊印迹模式,也为研究基因组印迹的分子机制提供了一个有价值的体外模型系统。
- 薛媛单智焱郑重雷蕾
- 关键词:孤雌胚胎干细胞组织相容性基因组印迹
- 激光共聚焦显微镜观察小鼠早期胚胎中蛋白激酶Cα的表达被引量:1
- 2007年
- 目的优化早期胚胎的免疫荧光染色方法并观察蛋白激酶C(PKCα)在小鼠着床前胚胎的表达和定位。方法用优化的免疫荧光化学法结合激光共聚焦显微术,观察小鼠早期胚胎2-细胞期到囊胚期PKCα的表达情况。结果小鼠早期胚胎自2-细胞期到囊胚期均有PKCα亚型的表达,且主要集中在早期胚胎卵裂球的核内。结论经优化后的免疫荧光染色可清晰地检测到胚胎内PKCα集中于细胞核内表达,且分裂间期的表达高于分裂期。
- 陈雅隽冯秀清钟淑琦潘振伟雷蕾
- 关键词:蛋白激酶C胚胎发育免疫荧光
- 体细胞重编程为多潜能干细胞的研究进展被引量:3
- 2008年
- 人类的胚胎干细胞(embryonicstemcells,EScells)可以用来治疗很多疾病,但是如果通过核移植来获得与供体或者患者相匹配的ES细胞,就会受到人卵母细胞来源等条件的制约。这就促使了将体细胞重编程为多潜能细胞这样一种技术策略的发展,其中包括将分化细胞与ES细胞融合,在卵细胞、ES细胞或多潜能癌细胞的抽提物中孵育,强制多潜能因子过表达等具体的方法。通过这些途径引出了一些核功能的重编程以及相应的DNA甲基化修饰、组蛋白翻译后修饰,使体细胞表达特定的多潜能因子,转变为类似胚胎干细胞的多潜能细胞。
- 徐燕宁关娜张庆华雷蕾
- 关键词:体细胞重编程多潜能干细胞细胞治疗
- 不同类型的转基因细胞核供体对生产小鼠转基因克隆胚胎的影响被引量:1
- 2009年
- 目的利用体细胞核移植(SCNT)技术生产小鼠转基因克隆胚胎。方法利用所构建的含新霉素抗性(Neor)基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的双标记选择载体,通过电穿孔的方法,分别转染小鼠胎儿成纤维细胞和小鼠胚胎干细胞,经G418筛选14d后用于核移植。同时以未转基因小鼠卵丘细胞和成纤维细胞为核供体,进行体细胞核移植。结果转基因与未转基因胎鼠成纤维细胞的重构胚的囊胚(154/160)发育率为19.23%和22.91%,差异不显著(P〉0.05);转基因胚胎干细胞与胎鼠成纤维细胞的重构胚的囊胚(152/154)发育率为41.54%和19.23%,差异显著(P〈0.05);未转基因卵丘细胞与成纤维细胞的重构胚的囊胚(171/160)发育率为41.17%和22.91%,差异显著(P〈0.05)。结论利用体细胞核移植技术,小鼠胎儿成纤维细胞和胚胎干细胞可以有效地生产小鼠转基因囊胚。
- 闫晓飞徐燕宁李洪武关娜单智焱钟淑琦金连弘雷蕾
- 关键词:核移植电穿孔绿色荧光蛋白
- 老化对卵母细胞孤雌发育和减数分裂期间微管动态变化的影响被引量:1
- 2007年
- 目的研究老化对卵母细胞孤雌激活发育率的影响,以及老化对减数分裂期间微管的动态变化的影响。方法用孤雌激活的方法来观察不同老化时间胚胎的发育情况;用免疫荧光化学与激光共聚焦显微术结合的方法研究小鼠卵母细胞微管的动态变化。结果从注射hCG后14h到18h,卵母细胞在体外老化过程中激活率和发育率呈上升趋势,但是差异不显著。体外老化至18h,卵母细胞更容易被激活,并且减数分裂期间微管的变化发生要早于14h。结论短时间的体外老化可以使细胞更容易被激活,且微管发育更完善。
- 冯秀清林英巍钟淑琦陈雅隽阎晓飞董建将王琪雷蕾
- 关键词:孤雌激活微管卵母细胞激光共聚焦