湖南省自然科学基金(05JJ40039) 作品数:8 被引量:41 H指数:5 相关作者: 袁中华 王中群 杨永宗 易光辉 刘录山 更多>> 相关机构: 南华大学 新乡医学院 北卡罗来纳大学 更多>> 发文基金: 湖南省自然科学基金 湖南省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
一个新的脂质蓄积标记物——亲脂蛋白 2005年 亲脂蛋白是真核细胞胞内脂滴的一个不完全包被蛋白,其表达异常与动脉粥样硬化、糖尿病和肥胖等脂质蓄积性疾病的发生与发展密切相关,是脂质蓄积的一个敏感标记物。参与的功能主要是中性脂质的蓄积与脂滴的形成、长链脂肪酸的转运、乳脂的分泌以及对肺表面活性剂磷脂合成的促进等。 王中群 袁中华关键词:脂质蓄积 脂滴 动脉粥样硬化 脂肪分化相关蛋白通过酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1促进巨噬细胞脂质蓄积 被引量:7 2008年 目的观察高表达脂肪分化相关蛋白对酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达及脂质蓄积的影响。方法构建表达载体pcDNA3.1-HA-脂肪分化相关蛋白,使用THP-1巨噬细胞,通过瞬时转染使之高表达脂肪分化相关蛋白,依次用氧化型低密度脂蛋白和(或)丙泮尼地处理。逆转录聚合酶链反应和Western blot检测酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1及脂肪分化相关蛋白的表达,油红O染色和高效液相色谱检测细胞内脂质的蓄积。结果随着氧化型低密度脂蛋白浓度的增加,巨噬细胞脂肪分化相关蛋白及酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达明显增强,两者呈伴行关系。丙泮尼地能抑制酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达上调,且随处理时间延长,其表达逐渐减少,并且能减少细胞内脂滴生成。与对照组相比,瞬时转染pcDNA3.1-HA-脂肪分化相关蛋白能使脂肪分化相关蛋白表达明显升高。高表达脂肪分化相关蛋白的巨噬细胞能使酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达增加,促进细胞内胆固醇酯蓄积,并协同增强氧化型低密度脂蛋白的作用。加入丙泮尼地后,高表达脂肪分化相关蛋白的作用被减弱。结论高表达脂肪分化相关蛋白能上调THP-1巨噬细胞酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达,促进细胞内脂质蓄积。脂肪分化相关蛋白可能通过酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1促进细胞内胆固醇酯的蓄积。 袁中华 贾薇 Xi-Lin NIU 黄谙非 刘录山 易光辉 王佐 任重 唐朝克 田国平 杨永宗关键词:病理学与病理生理学 脂肪分化相关蛋白 巨噬细胞 动脉粥样硬化中的4个PKC相关酶 被引量:8 2007年 Atherosclerosis is a multiple-pathogeny disease that consists of many complicated processes,including oxidative stress,endothelium dysfunction,abnormal cell proliferation,apoptosis and extracellular matrix disorder.The pivotal proteases for these courses are NAD(P)H oxidase,eNOS,MAPKs and MMPs,respectively.As an upstream kinase,protein kinase C(PKC) may involve in the development of atherosclerosis through affecting these enzymes. 贾薇 袁中华关键词:动脉硬化 蛋白激酶C NADPH氧化酶 有丝分裂素激活蛋白激酶类 Adipophilin在动脉粥样硬化脂质蓄积中的作用 被引量:1 2005年 Ad ipoph ilin是胞浆脂滴的一个不完全包被蛋白,可作为动脉粥样硬化脂质蓄积的标记物,能促进细胞中脂质的蓄积和脂滴的形成,抑制胆固醇的外流,从而在泡沫细胞形成过程中发挥重要的作用。下调ad ipoph ilin的表达有利于动脉粥样硬化的防治。 王中群 袁中华关键词:ADIPOPHILIN 脂滴 脂质蓄积 动脉粥样硬化 脂肪分化相关蛋白通过蛋白激酶C和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1促进THP-1巨噬细胞蓄积脂质 被引量:6 2008年 目的:探讨脂肪分化相关蛋白促进THP-1巨噬细胞蓄积脂质的机制。方法:使用高胆固醇饲料喂养新西兰兔12周,复制动脉粥样硬化动物模型。然后用Western blotting和免疫组织化学染色观察兔主动脉脂肪分化相关蛋白及蛋白激酶C的表达。THP-1巨噬细胞与氧化低密度脂蛋白孵育不同的时间,使细胞负荷胆固醇酯后,用RT-PCR的方法观察脂肪分化相关蛋白及酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1的表达,用PepTag assay琼脂糖凝胶电泳及分光光度法观察蛋白激酶C的活性。在负荷胆固醇酯的THP-1巨噬细胞中分别加入蛋白激酶C的激动剂佛波酯和抑制剂钙磷酸结合蛋白,观察脂肪分化相关蛋白的表达,同时使用油红O染色和高效液相色谱法测定细胞内脂质的变化。瞬时转染pcDNA3.1-HA-adi表达载体到THP-1巨噬细胞,复制高表达脂肪分化相关蛋白的细胞模型。在负荷、不负荷胆固醇酯或ACAT抑制剂存在的状态下,观察酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达及细胞内胆固醇酯的改变。结果:与对照组相比,兔主动脉病变处脂肪分化相关蛋白及蛋白激酶C表达均显著增加。负荷胆固醇酯的THP-1巨噬细胞中脂肪分化相关蛋白及酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达上调,蛋白激酶C的活性升高。荷脂细胞与蛋白激酶C激动剂共孵育后,可以协同增强上调脂肪分化相关蛋白的效应,细胞内脂质增多;如果荷脂细胞同时与蛋白激酶C抑制剂共孵育,可以有效抑制荷脂所致的脂肪分化相关蛋白高表达,细胞内脂质减少。高表达脂肪分化相关蛋白的THP-1巨噬细胞能够使酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达增加,促进细胞内胆固醇酯蓄积。加入酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶抑制剂后,这些作用被减弱。结论:脂肪分化相关蛋白可能是通过蛋白激酶C活性的改变影响酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1的活性,从而影响细胞内脂质的蓄积。 袁中华 刘晓辉 王中群 贾薇 Niu Xi-lin 黄谙非 刘录山 易光辉 王佐 任重 唐朝克 田国平 杨永宗关键词:脂肪分化相关蛋白 蛋白激酶C 酰基辅酶A 胆固醇酰基转移酶 THP-1细胞 Adipophilin在不同组织和器官中的功能 2007年 Adipophilin(ADFP)是一种脂滴周围主要的相关蛋白,它大量分布在脂质蓄积正常或不正常的细胞中,是脂质蓄积的一个特异性标记物。它在脂肪细胞分化早期就有很高的表达,但当脂肪细胞成熟后,它的表达就明显减少。ADFP在很多组织器官中都发挥重要作用,它不仅参与脂肪细胞的脂质代谢、脂滴的形成及肝内三酰甘油(TG)的合成与代谢,还能促进巨噬细胞、平滑肌细胞的泡沫化,长链脂肪酸的摄取、乳汁的分泌等。ADFP的表达异常与动脉粥样硬化、胰岛素抵抗和肿瘤等病理过程密切相关。 黄谙非 袁中华关键词:ADIPOPHILIN 脂滴 脂肪酸 脂质蓄积 动脉粥样硬化 蛋白激酶C活性变化对Adipophilin介导THP-1巨噬细胞脂质蓄积的影响 被引量:22 2007年 以THP-1巨噬细胞为研究对象,观察蛋白激酶C(PKC)激动剂佛波酯(PMA)和抑制剂钙磷酸结合蛋白C(CalphostinC)对胞膜PKC活性、胞膜PKCα及胞浆内过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)和adipophilin表达以及细胞内脂质蓄积的影响,初步探讨PKC调控adipophilin表达及脂质蓄积的作用机制.采用PepTagRAssay、RT-PCR、蛋白质印迹、油红O染色和高效液相色谱法,观察到100nmol/LPMA在激活胞膜PKC((0.2514±0.0154)U/ml)的同时可以与氧化低密度脂蛋白(oxLDL)协同增强PKCα、PPARγ和adipophilin表达并使细胞内脂滴的蓄积极大地增强.细胞内胆固醇酯/总胆固醇比值增至(69.8±9.5)%;300nmol/L CalphostinC对荷脂THP-1巨噬细胞的处理则抑制酶活性至((0.0927±0.0056)U/ml,细胞内脂滴减少,胆固醇酯/总胆固醇比值降至(40.1±9.1)%;CalphostinC呈剂量依赖性的方式下调酶活性、PKCα、PPARγ和adipophilin表达,400nmol/LCalphostinC基本上可以逆转50mg/LoxLDL诱导的酶活化和PKCα、PPARγ和adipophilin表达的上调.结果提示,蛋白激酶C活性的改变可以影响adipophilin介导的脂质蓄积,其中PPARγ可能在这一调控机制中发挥了重要作用. 王中群 杨永宗 王佐 任重 唐朝克 刘录山 易光辉 袁中华关键词:过氧化物酶体增殖物激活受体Γ ADIPOPHILIN 脂滴 adipophilin及蛋白激酶C在动脉粥样硬化模型中的表达 被引量:8 2008年 目的探讨动脉粥样硬化病变区动脉壁增厚与adipophilin表达及蛋白激酶C(PKC)活性三者之间的关系。方法将24只新西兰白兔随机分为对照组(12只)和实验组(12只)。高TC饮食喂饲12周,动脉切片HE染色;采用PepTagAssay法检测PKC活性变化,Western blot印迹和免疫组织化学染色检测PKCα和adipophilin表达。并进一步在细胞学水平观察平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞PKC活性的分布及adipophilin的表达。结果主动脉病变区可见内膜增生、中层增厚,脂质条纹突起,增生内膜内蓄积大量的泡沫细胞。病变区PKC活性和adi-pophilin表达上调,与adipophilin阳性颗粒仅局限于增生内膜不同,PKCα在内膜、近内膜的中层区均呈强阳性表达。细胞学实验显示adipophilin表达于巨噬细胞,而PKC活性则以平滑肌细胞最强,内皮细胞最弱。结论动脉粥样硬化病变区内膜增生、中层增厚可能与PKC介导的细胞增殖凋亡紊乱及adipophilin介导的脂质蓄积有关。在巨噬细胞adipophilin的表达可能与细胞膜PKC活性的改变有着某种潜在联系。 王中群 袁中华 刘毅 杨永宗 万载阳 刘录山 易光辉 赵卫星 李丽华关键词:动脉硬化 蛋白激酶C 动物 ADIPOPHILIN