广东省自然科学基金(04300241)
- 作品数:7 被引量:23H指数:3
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- 兔骨髓间充质干细胞的Gd-DTPA标记及MRI体外示踪
- 2009年
- 目的探讨兔MSCs磁性标记及MRI体外示踪的可行性。方法培养分离兔MSCs,以PEI-FluoR为载体,体外对MSCs进行双标记。标记后行荧光镜、电镜观察及生物学性状检测。应用1.5TMRI仪,对标记细胞进行SE序列T1WI及T2WI扫描及T1-mapping测量T1时间,并观察MRI上能显示标记MSCs的最小数目及标记后正常传代后MRI监测的持久性。结果MSCs双标记后,标记效率为80%,细胞内可见荧光物质,电镜下Gd颗粒位于胞浆内。标记后24h内标记细胞与未标记细胞间台盼蓝拒染率、标记后5d内标记细胞与未标记细胞的MTT吸光度值差异无统计学意义。标记细胞凋亡指数为0.40%,未标记细胞为0.19%。未标记及标记细胞T1WI平均信号强度及T1时间分别为2166±167、(2445±21)ms,3162±350、(1404±129)ms(t=6.91、29.87,P<0.005)。体外MRI上可监测到最低1×104个标记细胞,并可持续显示第3代标记细胞。结论应用多聚胺载体对兔MSCs进行Gd-DTPA及荧光双标记安全、有效;MRI能示踪体外双标记的干细胞。
- 段小慧沈君成丽娜钟小梅符岳梁碧玲
- 关键词:间充质干细胞磁共振成像
- 大鼠骨髓间充质干细胞的钆-荧光双标记及MRI体外示踪的研究被引量:11
- 2008年
- 目的应用多聚胺载体,对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)进行钆喷替酸葡甲胺(Gd-DTPA)及荧光双标记,探讨MSCsMR磁性标记及体外示踪的可行性。方法以聚乙烯亚胺-罗丹明复合物(JetPEI—FluoR)为载体,制备Gd—DTPA双标记示踪剂,培养分离sD大鼠骨髓MSCs,以此示踪剂体外标记间MSCs。对标记后细胞行生物学性状检测及电镜、荧光镜观察。应用1.5TMR仪,对标记的干细胞进行sET1WI及T2WI及混合(mixed)回波序列的T1测量,标记细胞正常传代后进行MR检查,观察标记的持久性。标记细胞、未标记细胞的T1WI信号强度、T1之间的比较使用t检验,台盼蓝拒染率采用两因素重复资料方差分析,不同浓度示踪下细胞吸光度比较采用单因素方差分析。结果双标记示踪剂标记5×10^5个MSCs,标记成功了4.25×10^5个,荧光镜下标记率为85%,电镜下钆(Gd)颗粒主要位于胞质内高尔基体周围。双标记示踪剂孵育3、6、12、24h内标记细胞的台盼蓝拒染率分别为(96.55±2.90)%、(94.17±2.56)%、(97.16±3.12)%、(94.23±2.67)%,相应的未标记细胞的拒染率分别为(95.86±2.67)%、(92.04±2.21)%、(93.38±3.64)%、(92.12±2.53)%,24h内标记细胞与未标记细胞拒染率差异无统学意义(F=4.523,P〉0.05)。细胞增殖实验中,在2.5、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0μl不同浓度示踪剂时,标记细胞的吸光度分别为(0.1884±0.0151)、(0.1878±0.0190)、(0.1741±0.0160)、(0.1135±0.0215)、(0.1079±0.0145)、(0.0811±0.0079),未标记细胞为(0.1940±0.0116),Gd—DTPA30.0μl以下标记细胞与未标记细胞吸光度差异无统计学意义(q’=0.2225~0.9458,P〉0.05)。标记后细胞凋亡指数为5.08%,对照组未标记细胞为3.86%。未标记细胞T1WI平均信�
- 沈君周翠屏成丽娜段小慧毕小斌刘宇符岳梁碧玲邓宇斌
- 关键词:干细胞磁共振成像动物
- Gd-DTPA标记骨髓间质干细胞在脊髓损伤模型中的磁共振示踪研究被引量:3
- 2008年
- 目的探讨用钆-二乙烯三胺五乙酸(Gd-DTPA)标记大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)用于细胞示踪的可行性。方法用jetPEITM-FluoF结合Gd-DTPA形成顺磁性颗粒,标记MSCs,电镜观察标记情况,并用MTT法测定标记细胞的活力。对标记的细胞进行体外和大鼠脊髓内磁共振成像(MRI)。结果Gd-DTPA可高效标记MSCs,同时对MSCs生长无影响。体外及MSCs移植大鼠脊髓损伤模型MRIT1WI均显示,标记细胞呈高信号强度。结论Gd-DTPA成功标记的MSCs在体外和大鼠脊髓组织内均可检测到明显的MRI信号强度改变。Gd-DTPA可以用于MSCs标记的MRI示踪。
- 邓宇斌毕小彬沈君甘丹卉刘宇叶美红
- 关键词:细胞标记骨髓间质干细胞钆
- 兔坐骨神经急性牵拉伤模型的制作:MRI与病理对照被引量:4
- 2009年
- 目的模拟人类周围神经牵拉伤机制,通过MRI与病理对照,探讨兔坐骨神经牵拉伤模型的制作。方法20只新西兰大白兔,随机选取一侧坐骨神经,使用无齿钳牵拉神经制作牵拉伤。每只兔在术前及牵拉伤后第3天均行双侧坐骨神经MRI,检查序列包括3DT2WI、T1WI、3DT2WI/SPIR、Mixed多回波序列(测量T1值)及SE多回波序列(测量T2值),并进行病理检查及后肢功能的评价。结果兔坐骨神经牵拉伤后,牵拉侧后肢运动功能及神经反射功能出现障碍,T2WI及T2WI/SPIR序列坐骨神经增粗,信号增高。损伤后与损伤前相比,牵拉近段、牵拉段、牵拉远段神经的T1值及T2值均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。牵拉伤神经病理表现为髓鞘崩解、轴突丧失。结论兔坐骨神经牵拉伤后MRI表现为神经增粗,T1、T2时间延长,通过病理对照,模型制作成功。
- 周翠屏成丽娜段小慧沈君梁碧玲程传虎
- 关键词:坐骨神经
- 干细胞移植的磁性标记及磁共振成像活体示踪被引量:2
- 2006年
- 干细胞移植的临床应用需要解决植入活体内干细胞在体内存活、迁移及分化的监测问题。通过对干细胞进行顺磁性标记,磁共振成像(MRI)能够在活体上显示标记的干细胞,并进行特异性地追踪及定位,是目前干细胞活体示踪极具前景的方法。干细胞进行磁性标记主要利用铁类或钆类对比剂,两者各有优缺点。利用铁类或钆类对比剂标记干细胞并进行MRI活体监测取得了成功。并在心脑缺血损伤的疾病模型中得到应用,但在干细胞磁性标记的载体选用及其标记率、标记的持久性、标记对细胞活力及遗传性状方面尚存在一定的问题。
- 周翠屏沈君梁碧玲
- 关键词:造血干细胞移植磁共振成像示踪活体内
- MRI活体监测菲立磁标记大鼠骨髓间充质干细胞经动脉移植后的肝、脾分布被引量:2
- 2009年
- 目的探讨菲立磁(Feridex)标记大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)经颈总动脉移植后MRI上肝、脾内的分布情况。方法30只全脑缺血损伤模型大鼠进入研究,随机平均分为:标记组及未标记组;均经颈总动脉移植MSCs。标记组MSCs以硫酸鱼精蛋白为载体进行Feridex标记,标记后行可行性及安全性检测。移植后对两组进行MR检查,测量肝、脾与肌肉的信号强度比,并取病理标本行普鲁士蓝染色。结果MSCs的Feridex标记率达100%,标记与未标记MSCs的台盼蓝拒染率、MTT染色间差异无统计学意义(F=0.27~2.06,P>0.05;F=0.025~0.322,P>0.05)。标记组MSCs大鼠FFET1WI上肝脾信号减低,移植后第3d,标记与未标记组肝脏信号差异无统计学意义(F=4.72,P>0.05)。移植后第7d时,标记与未标记组脾脏信号差异无统计学意义(F=3.89,P>0.05)。普鲁士蓝染色示标记组肝、脾内可见较多蓝染铁颗粒,随时间逐渐减少。结论菲立磁标记大鼠MSCs安全有效,经颈总动脉移植后标记MSCs较多分布于肝、脾内。
- 段小慧沈君符岳成丽娜钟小梅梁碧玲
- 关键词:间充质干细胞颈总动脉细胞移植
- 兔坐骨神经牵拉伤的磁化传递成像与病理对比被引量:2
- 2012年
- 目的探讨坐骨神经牵拉伤后磁化传递率(MTR)改变的病理基础。方法对20只新西兰大白兔牵拉坐骨神经主干,建立坐骨神经牵拉伤模型,分别于术前、术后第1、3天、1、2、3、4、6、8、10周进行双侧坐骨神经MR检查和病理组织学检查。结果坐骨神经牵拉伤后MTR下降,早期下降明显,后期逐渐回升;神经损伤早期主要表现为炎症反应、神经变性,后期主要为施万细胞增生与神经纤维再生。牵拉伤后各段坐骨神经的MTR下降程度不同,牵拉段MTR下降最为明显。结论 MTR的动态变化能反映兔坐骨神经牵拉伤后的病理变化过程和神经损伤程度,可作为评价预后及疗效的补充手段。
- 周翠屏沈君成丽娜段小慧蓝博文
- 关键词:磁化传递成像坐骨神经病理学