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聚乙烯亚胺/DNA复合物处方工艺优化及体外转染效率被引量：1: 2010年; 目的:考察聚乙烯亚胺(PEI)相对分子质量、氮磷比(N/P比)、溶剂、离子强度等对PEI/DNA复合物形成、表面性质以及细胞转染效率的影响。方法:制备不同相对分子质量PEI/DNA复合物,通过凝胶电泳和紫外吸收检测确定PEI与DNA的复合能力(N/P比),测定不同溶剂、离子强度下的粒径和Zeta电位,考察复合物在HepG2细胞中的转染情况。结果:PEI与DNA的复合能力与PEI的相对分子质量呈正相关,不同溶剂、离子强度会影响复合物的表面性质,以磷酸盐缓冲液(PBS)为溶剂、PEI(25kD)为载体、N/P比为12～15时,PEI/DNA复合物细胞转染效率明显优于质粒DNA,仅略低于阳性对照组。结论:经优化的PEI/DNA复合物可显著提高DNA在细胞中的转染效率。; 李飞燕周建平吴向明关丽叶邓祖媛谢芳; 关键词：聚乙烯亚胺 DNA复合物细胞转染

聚乙烯亚胺-DNA复合物的形成和聚集行为研究被引量：5: 2009年; 聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)是一种优良的非病毒基因传输载体材料,本文对PEI/DNA复合物粒子的形成机制进行了初步探讨,电泳阻滞实验和紫外测定实验表明,复合物的形成过程中存在着某种过渡状态即珠串样结构,透射电镜的结果提供了相应的例证。此外通过离子强度实验,作者认为在PEI与DNA的复合过程尽管以静电作用为主要作用力,同时也可能存在着其他类型的非静电作用力。PEI/DNA复合物粒子的表面电荷随着N/P的增加逐步增加,但由于DNA的分子质量较大,在N/P为8和12时表面电荷的绝对值较小,容易聚集成葡萄串样聚集体,离子强度实验表明该聚集过程的支配作用力可能是疏水作用力。PEI/DNA复合物在N/P为12时的细胞转染效果与阳性对照组相当,表明聚集的PEI/DNA复合物也具有一定的细胞转染能力。; 卢韵姚静周建平王伟邓祖媛关丽叶; 关键词：过渡态转染

低相对分子质量聚乙烯亚胺及其衍生物作为基因载体的应用被引量：3: 2008年; 目的介绍低相对分子质量聚乙烯亚胺及其衍生物的国内外研究进展。方法根据近年来的有关研究文献,对低相对分子质量的性质和应用进行了综述。结果使用低相对分子质量聚乙烯亚胺及其衍生物可增加转染效率,可有效降低高分子聚乙烯亚胺的细胞毒性。讨论低相对分子质量聚乙烯亚胺及其衍生物是一种极具发展前景的新型基因载体。; 王星姚静周建平; 关键词：基因载体阳离子聚合物

细胞核靶向聚乙烯亚胺-地塞米松偶联物的制备及作为基因载体的应用被引量：5: 2011年; 采用地塞米松(Dex)和低分子量聚乙烯亚胺(PEI)经酰胺化反应,合成了一种新型靶向基因载体PEI-Dex偶联物.研究结果表明,PEI-Dex可结合DNA形成复合物,在最佳制备条件下(N/P=12),PEI-Dex/DNA复合物粒径为(162±1.90)nm,电位为(12.8±0.11)mV,适用于基因转染.PEI-Dex的细胞毒性较低,可促进复合物的细胞核转运,从而显著提高转染效率.; 范颖姚静周建平; 关键词：地塞米松

透明质酸及其衍生物用作药物载体的研究进展被引量：6: 2011年; 鉴于透明质酸具有良好的生物相容性、生物可降解性、无免疫原性,以及对肿瘤细胞的高亲和性,透明质酸及其衍生物作为新型药物载体的研究备受瞩目。综述近年来透明质酸及其衍生物作为药物载体的应用研究进展,主要包括纳米粒、凝胶、阳离子聚合物基因载体等方面。; 俞晨洁张莉李红玫李园珂赵震吴非姚静周建平; 关键词：透明质酸衍生物药物载体

尿刊酸偶联壳聚糖基因载体的合成和表征被引量：7: 2008年; 本文将活化的尿刊酸(urocanic acid,UA)与壳聚糖(chitosan,CTS)上的氨基反应合成一种新型非病毒基因载体——尿刊酸偶联壳聚糖(urocanic acid-coupled chitosan,UAC),通过红外(FT-IR)、核磁共振(1H NMR)和元素分析对UAC结构进行确证。用正交实验对取代度的影响因素进行考察,结果表明,随着UA投料量的增加和活化时间的延长,UAC的取代度也随之增大;通过琼脂凝胶电泳阻滞实验分析UAC/质粒DNA(plasmid DNA,pDNA)的复合能力及对DNase I酶抗降解能力,结果证明UAC与pDNA有较好的复合能力和抵制DNase I酶降解能力;通过测定UAC/pDNA复合物粒径和对zeta电位的分析,结果证明复合物具有良好的稳定性和易于进入细胞的性质;体外细胞转染是通过荧光显微镜观察UAC介导pDNA在体外培养HepG2细胞中的表达,结果显示,UAC能介导pDNA转染HepG2细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白,其转染效果较CTS明显增强。因而UAC是一种制备工艺简单,具有应用前景的非病毒基因载体。; 李夷平姚静周建平王伟; 关键词：转染效率

新型阳离子聚合物作为基因载体的研究进展被引量：1: 2011年; 高效、低毒、靶向性的基因载体是基因治疗成功的关键。与病毒载体相比,非病毒载体具有毒性低、免疫原性小、结构改造可实现基因靶向递送、易于生产、可重复应用等优点,其中阳离子聚合物是非病毒载体研究热点之一。本文从基于降低细胞毒性、提高稳定性和转染效率、实现靶向转运等进行的聚合物结构改造策略方面综述了多聚赖氨酸、聚乙烯亚胺、聚甲基丙烯酸酯等阳离子聚合物作为基因载体的研究进展。; 姚静范颖周建平李飞燕; 关键词：基因治疗非病毒载体基因载体阳离子聚合物

尿刊酸修饰的壳聚糖介导野生型p53基因转染对人肺腺癌细胞系H1299增殖和凋亡的影响被引量：1: 2009年; 目的:研究尿刊酸修饰的壳聚糖(UAC)介导野生型p53(wt-p53)基因转染对人肺腺癌细胞系H1299(p53基因缺失)的增殖抑制和凋亡诱导作用。方法:UAC介导wt-p53基因转染H1299细胞后,采用荧光显微术、RT-PCR法和West-ernblot法分别检测细胞内绿色荧光蛋白(GFP)、wt-p53mRNA和蛋白的表达,并通过MTT法分析基因转染对细胞的生长抑制作用,DAPI染色法和琼脂糖凝胶电泳法评价其对细胞的诱导凋亡作用。结果:UAC介导wt-p53基因转染H1299细胞后,大量细胞表达GFP,细胞内wt-p53mRNA和蛋白表达水平明显上调,细胞生长受到显著地抑制,凋亡细胞数量明显增加,并有清晰的DNA梯状条带出现。结论:UAC介导wt-p53基因转染能够显著地抑制人肺腺癌细胞系H1299的增殖,并诱导其凋亡。; 王伟姚静周建平李夷平陶磊; 关键词：野生型P53 人肺腺癌细胞系

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国家自然科学基金(30672548)