广东省自然科学基金(7300343)
- 作品数：5 被引量：49H指数：4
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- 黄芪和白术提取物对IEC-6细胞迁移的影响被引量：30
- 2011年
- 目的筛选益气健脾中药黄芪和白术促进小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的有效提取部位。方法以系统溶剂分离法从黄芪、白术药材分别得到糖复合物、正丁醇萃取物、醇沉上清液以及大孔树脂吸附后70%乙醇洗脱部位作受试药。IEC-6细胞接种于6孔板并培养24 h,划痕法造细胞迁移模型,划痕后加入各受试药,24 h后观察细胞迁移情况;并进一步观察具有促进细胞迁移的有效部位对二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致细胞迁移抑制的影响。结果 50 mg.L-1的黄芪糖复合物或白术糖复合物能促进细胞迁移(P<0.01);黄芪、白术的正丁醇萃取物、醇沉上清液、大孔树脂吸附后醇洗脱部位对细胞迁移均无明显影响;2.5 mmol.L-1的DFMO能抑制细胞迁移(P<0.01),加入DFMO同时加入100 mg.L-1黄芪糖复合物或200 mg.L-1白术糖复合物能使细胞迁移恢复至接近正常水平。结论黄芪糖复合物和白术糖复合物能促进IEC-6细胞迁移,还能使DFMO所致的细胞迁移抑制恢复至接近正常水平。
- 胡灿李茹柳王静徐颂芬陈蔚文
- 关键词：小肠上皮细胞白术提取物细胞迁移
- 高效液相色谱法检测小肠上皮细胞多胺含量被引量：9
- 2011年
- 目的建立检测小肠上皮细胞(IEC-6)多胺含量的方法,为病理生理及药理研究中检测该细胞多胺含量提供参考。方法采用苯甲酰氯柱前衍生反相高效液相色谱法,以多胺(腐胺、精脒和精胺)含量为指标,苯甲酰氯为衍生化试剂,采用ODS-C18柱,考察和优化衍生化条件以及色谱条件。结果当衍生温度为50℃,衍生时间为8 h时,各指标成分的峰面积均较大;在柱温为25℃、流动相为甲醇∶水(55∶45)、流速1.0 ml.min-1、检测波长234 nm的条件下,各指标成分峰分离良好。线性范围:腐胺0.054～1.35 nmol,精脒0.046～1.15 nmol,精胺0.080～2.00 nmol,r2≥0.9995;高、中、低浓度的日内精密度:腐胺RSD 1.5%～3.2%,精脒RSD 1.2%～4.5%,精胺RSD 1.3%～4.1%;日间精密度:腐胺RSD 1.2%～2.7%,精脒RSD 1.0%～3.5%,精胺RSD0.8%～3.9%;高、中、低浓度的回收率:腐胺85%～110%,精脒88%～110%,精胺90%～108%。结论建立的苯甲酰氯柱前衍生高效液相色谱法适用于小肠上皮细胞中多胺含量的测定。
- 随晶晶卢文彪李茹柳温鹏胡灿赵世清陈蔚文
- 关键词：多胺柱前衍生小肠上皮细胞
- IEC-6细胞迁移药理实验模型建立的研究(英文)被引量：11
- 2011年
- 建立适合肠上皮整复研究的IEC-6细胞迁移药理实验模型,并观察黄芪糖复合物对细胞迁移的影响。方法：设立不同的细胞接种密度、划痕后观察时间、辅助材料Matrigel浓度、血清饥饿处理法、细胞迁移抑制剂DF-MO（二氟甲基鸟氨酸）浓度等以考察模型的建立条件,并在已建立的模型上观察受试药的效果。结果：①细胞宜以4×105/mL接种6孔板;②宜划痕后24 h观察细胞迁移数;③5%Matrigel为适宜浓度;④血清饥饿可造成细胞迁移数明显减少,应使用含血清的培养液。⑤DFMO 2.5~5 mmol/L为抑制细胞迁移适宜浓度。⑥黄芪糖复合物及阳性药精脒能促进细胞迁移。结论：建立了适宜药理实验的IEC-6细胞迁移模型,在此模型上可反映受试药对细胞正常迁移及迁移抑制的药效作用。
- 胡灿李茹柳卢文彪羊燕群王静陈蔚文
- 关键词：IEC-6胃肠黏膜损伤细胞迁移
- 白术和黄芪不同提取部位对小肠上皮细胞增殖的影响被引量：21
- 2010年
- 目的观察白术和黄芪的不同提取部位对小肠上皮细胞(IEC-6)增殖的影响。方法以系统溶剂分离法分别提取白术和黄芪的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、醇沉上清液和多糖部位;另将白术和黄芪以乙醇提取,D101大孔树脂吸附法得到40%和70%乙醇洗脱部位。MTT法检测白术和黄芪正丁醇部位、醇沉上清液、多糖部位、40%和70%醇洗脱液对IEC-6细胞增殖的作用。结果初步发现黄芪正丁醇部位、醇沉上清部位、糖复合物、40%和70%醇洗脱部位加药24h能促进细胞增殖;白术40%乙醇洗脱液部位加药24h能促进细胞增殖,白术正丁醇部位、糖复合物、40%和70%乙醇洗脱液部位加药48h能促进细胞增殖。结论白术和黄芪正丁醇部位、多糖部位、40%和70%醇洗脱液在加药后不同时间对IEC-6细胞有不同程度的促进增殖作用;采用系统溶剂分离法和大孔树脂吸附法提取白术和黄芪不同部位,可以用于细胞增殖实验,为进一步开展白术和黄芪在细胞水平上的药理研究提供参考。
- 胡灿李茹柳莫全毅王治平林传权陈炜璇陈蔚文
- 关键词：白术细胞增殖
- 白术糖复合物提取纯化工艺研究被引量：1
- 2009年
- 目的：研究白术糖复合物提取纯化方法。方法：水提法提取白术糖复合物，中性氧化铝、树脂吸附法进行精制纯化，考察不同方法的除杂效果，确定工艺参数；盐酸紫外分光光度法、蒸发光散射法检测提取物中的糖含量。结果：白术提取液经中性氧化铝精制后糖复合物得率与纯度分别为23％～25．5％和56％～60％；根据D900弱碱性阴离子交换树脂、D201阴离子交换树脂、AB-8大孔吸附树脂的静态脱色曲线，它们对白术提取液色素杂质的交换能力大小为D900〉AB-8〉D201；D900离子交换树脂吸附法精制白术糖复合物得率为17％以上，盐酸紫外分光光度法检测糖纯度在76％以上。结论：水提后D900离子交换树脂吸附法精制白术糖复合物效果较好，糖定量分析以盐酸紫外分光光度法较为理想。
- 石忠峰李茹柳陈蔚文
- 关键词：白术糖复合物纯化
