国家林业局948项目(2005-Z24)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：张晓刘媛刘贤进温爽张晴晴更多>>
- 相关机构：江苏省农业科学院南京师范大学更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 米尔比霉素肟化物ScFv噬菌体展示抗体库的构建被引量：3
- 2008年
- 目的构建具16元大环内酯共性结构小分子物质的特异性抗体库。方法免疫原MILO-BSA免疫小鼠后从脾细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增得到全套抗体重链可变区基因(VH)及轻链可变区基因(VL),SOE-PCR将VH、VL片段拼接扩增得到单链抗体可变区基因片段(ScFv)。将ScFv基因克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化感受态大肠杆菌,辅助噬菌体超感染得到上清液即为噬菌体抗体库。结果RT-PCR扩增出长360bp左右的抗体重链可变区基因(VH)及340bp左右的轻链可变区基因(VL),SOE-PCR扩增得到750bp左右的ScFv基因片段,成功构建了库容量为2.4×106,滴度为2.0×1012pfu/mL的噬菌体单链抗体库。结论构建的抗体库目的片段连接率较高,多样性较好,为下一步16元大环内酯类小分子物质高特异性抗体的筛选奠了基础。
- 张晓张晴晴温爽刘媛刘贤进
- 关键词：单链可变区抗体
- 噬菌体展示技术在农药等小分子检测中的应用被引量：2
- 2008年
- 噬菌体展示技术是将外源蛋白基因与噬菌体表面特定蛋白基因在其表面融合表达,用于筛选和改造功能性多肽的生物技术,具有库容量大,结合特异性强等特点,现已被广泛应用于生命科学的许多领域。本文在系统介绍了噬菌体展示技术及其载体系统发展的基础上,对该技术在农药等小分子化合物免疫检测中的应用进行了综述。
- 张晓刘媛刘贤进程罗根
- 关键词：噬菌体展示技术酶联免疫检测
