湖南省科技厅重点项目(04SK2003)
- 作品数：4 被引量：25H指数：3
- 相关作者：吴移谋陈丽丽陈超群张俊芳顾伟民更多>>
- 相关机构：南华大学上海市皮肤病性病医院江门市皮肤医院更多>>
- 发文基金：湖南省科技厅重点项目湖南省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 沙眼衣原体外膜蛋白2重组蛋白的表达纯化和免疫性鉴定被引量：3
- 2005年
- 目的表达沙眼衣原体外膜蛋白2,纯化表达产物,并对其免疫性进行鉴定。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术获得沙眼衣原体D型外膜蛋白2第167～434位氨基酸的编码基因片段,将此片段克隆于表达载体pET28b(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDSPAGE、蛋白印迹试验分析表达产物,亲和层析法纯化重组蛋白;重组蛋白免疫家兔以检测其免疫原性。结果重组质粒酶切分析及DNA测序证实成功构建pET28b(+)/Omp2aa167～aa434表达质粒;通过优化表达和纯化条件,获得了相对分子质量约为35.0×103纯化蛋白产物,蛋白印迹试验证实该重组蛋白能与Ct感染者阳性血清反应;ELISA法测定免疫血清特异性抗体效价在1∶1280以上。结论表达的重组外膜蛋白2aa167～aa434具有良好的免疫性。
- 陈超群吴移谋李忠玉尹卫国谭立志
- 关键词：沙眼衣原体表达纯化ELISA法
- 中国南方部分城市泌尿生殖道沙眼衣原体基因分型研究被引量：14
- 2006年
- 目的 了解中国南方4个城市性病高危人群中沙眼衣原体（Ct）基因型的分布特征。方法 从衡阳、上海、广州、江门四个城市的性病门诊收集1180份泌尿生殖道标本，经质粒PCR筛选后，阳性者用巢式PCR扩增Ctompl基因片段，酶切omp1扩增产物，分析Ct各临床株omp1基因的限制性片段长度多态性（RFLP），将临床株分型。结果 Ct质粒PCR阳性者301份，用于分型者286份。通过RFLP分型，共检出10个基因型，其中常见的是E（30．8％）、J（23．8％）、D（17．5％）、F（10．5％）、G（6．2％）型，并且不同城市间基因型的分布差异无统计学意义（r=0．981，P〉0．05）。结论 4个城市存在Ct多种基因型，并且基因型的分布大致相同。
- 陈丽丽吴移谋邓仲良蔡恒玲余敏君顾伟民张俊芳
- 沙眼衣原体CPAF免疫活性区域重组蛋白的表达及在临床诊断中的应用
- 2007年
- 目的分析沙眼衣原体（Ct）蛋白酶样活性因子（CPAF）免疫优势区的免疫活性，探讨其在Ct感染诊断中的应用价值。方法构建原核表达重组质粒pGEX-6p-2／CPAF’，异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，用该纯化的表达产物包被酶标板，建立间接ELISA检测病人血清中的Ct特异性IgM和IgG抗体，同时与晶美公司Ct ELISA试剂盒检测结果进行对比分析。结果含pGEX-6p-2／CPAF’的大肠杆菌BL21大量表达相对分子质量（Mr）约为43×10^3的目的蛋白，用该重组蛋白包被酶标板，建立间接ELISA检测Ct IgM、IgG阴性和阳性参考血清各50份，符合率均为100％；同时检测250份临床血清标本，与晶美公司ELISA试剂盒检测结果的符合率IgM为96．8％，IgG为98．4％。结论表达的Ct CPAF免疫优势区（AA200～AA388）重组蛋白具有良好的免疫反应活性，可望用于Ct感染的临床诊断。
- 刘佳强吴移谋郑江花莫小辉陈丽丽陈超群
- 关键词：沙眼衣原体重组蛋白免疫活性
- 泌尿生殖道沙眼衣原体omp1基因多态性研究被引量：8
- 2006年
- 从中国不同城市收集疑为沙眼衣原体(Ct)感染的泌尿生殖道标本323份,巢式PCR扩增Ctomp1基因片段(包括4个变异区),测定其中96份阳性标本omp1基因序列,根据同源性分型并分析其多态位点;根据氨基酸序列,用Mega 3软件构建进化树,分析临床株与相应参考株之间的亲缘关系。从96份沙眼衣原体阳性标本中,检出28种基因变体,其中E型最常见;同时发现Ct E、F型omp1基因高度保守,而其它基因型都显示一定的变异性。进化树分析发现,各临床株与相应参考株之间遗传距离较近。实验结果表明沙眼衣原体omp1基因呈现较大的多态性,可为其疫苗的研制及感染的防治提供重要的实验依据。
- 陈丽丽吴移谋雷达吴志周黄澍杰
- 关键词：多态性
