山东省自然科学基金(Y2008C127)
- 作品数：5 被引量：20H指数：4
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- 整合素-β1在转化生长因子-β2诱导晶状体上皮细胞转化中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的探讨整合素-β1(integrinβ1)在转化生长因子-β2(TGF-β2)体外诱导晶状体上皮细胞(HLECs)向肌成纤维细胞转化中的作用。方法体外培养的HLECs,选择传3代的细胞进行实验,以TGF-β2作为诱导剂。免疫荧光方法检测HLECs integrinβ1、E-cadherin、α-SMA和F-actin的表达,RT-PCR方法检测E-cadherin和α-SMAmRNA的表达。其中部分细胞预先加入去整合素kistrin孵育1h,再加入TGF-β2刺激细胞48h。结果 TGF-β2处理晶状体上皮细胞后,integrinβ1、α-SMA和F-actin的表达明显增强,细胞E-cadherin表达明显减弱。加入去整合素kistrin后,细胞α-SMA和F-actin的表达明显减弱,细胞E-cadherin表达明显增强。结论 TGF-β2诱导了HLECs转分化,整合素-β1参与了TGF-β2诱导的HLECs向肌成纤维细胞的转化过程。
- 朱玉广朱艳王杰钟莹莹杜孝楠张荣
- 关键词：转化生长因子-Β2晶状体上皮细胞转分化去整合素
- IL-1α对猪小梁细胞ELAM-1、MAPK通路蛋白表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的研究猪重组白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)对体外培养的猪眼小梁细胞内皮白细胞黏附因子-1(endothelial leukocyte adhesion molecule-1,ELAM-1)及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路蛋白表达的影响。方法传第3代的猪眼小梁细胞血清饥饿培养24h后,利用IL-1α进行干预。免疫组织化学分析干预后猪眼小梁细胞E-LAM-1的表达;采用Western blotting检测干预后细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、c-JunN端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和p38通路磷酸化水平的变化。结果正常猪眼小梁细胞不表达ELAM-1,经IL-1α刺激后小梁细胞磷酸化的ELAM-1、ERK1/2、JNK和P38的表达显著增加;MAPK通路所包括的ERK、JNK和p38通路均发生活化,其中对JNK通路的影响最大。结论外源性IL-1α对猪眼小梁细胞MAPK信号转导通路可产生影响,IL-1α可诱导猪眼小梁细胞表达ELAM-1。
- 朱玉广王杰吉艳艳朱艳钟莹莹杜孝楠张荣
- 关键词：白细胞介素-1Α小梁细胞丝裂原活化蛋白激酶通路
- 整合素β1介导的ERK/MAPK通道在人晶状体上皮细胞转分化中的作用被引量：9
- 2012年
- 目的研究转化生长因子-β2(transforming growth factor β2,TGF-β2)对培养的人氉晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)整合素β1、磷酸化ERK(pERK)及F-actin表达的影响,探讨整合素β1介导的ERK/MAPK通路在HLEC转分化中的作用。方法体外培养的HLEC,加入不同浓度(0ng·L-1和10ng·L-1、33ng·L-1、100ng·L-1、333ng·L-1、1000ng·L-1)的TGF-β2处理不同时间(12h、24h、48h、72h),采用MTT法测定TGF-β2对HLEC增殖的影响,并确定最佳干涉浓度和时间用于后续实验。实验分2组,实验组用含最佳干涉浓度TGF-β2的培养基培养HLEC,对照组使用无血清培养基培养,于最佳干涉时间对2组细胞行免疫细胞化学染色检测HLEC中整合素β1、pERK及F-actin的表达,RT-PCR检测整合素β1、pERK及F-actin mRNA的表达。结果 TGF-β2抑制HLEC的增殖,呈浓度和时间依赖性,TGF-β2的最佳干涉终浓度为100ng·L-1,作用48h后达到最大抑制效果。TGF-β2增加HLEC整合素β1、pERK及F-actin的表达,相对表达量分别为0.116±0.031、0.123±0.028、0.140±0.033,均较对照组(0.045±0.011、0.025±0.009、0.079±0.024)明显升高(均为P<0.01)。RT-PCR结果显示,TGF-β2明显促进整合素β1mR-NA、pERK mRNA及F-actin mRNA的表达,相对表达量分别为0.658±0.146、0.582±0.171、0.760±0.193,较对照组(0.246±0.051、0.338±0.092、0.138±0.027)明显升高(均为P<0.01)。结论 TGF-β2抑制了HLEC的增殖,促进整合素β1、pERK及F-actin的表达,整合素β1介导的ERK/MAPK信号通路可能参与了HLEC转分化过程,导致后囊膜混浊。
- 朱艳朱玉广张立华钟莹莹杜孝楠张荣王杰
- 关键词：转化生长因子-Β2整合素Β1F-ACTIN
- 氧化应激介导的NF-κB信号通路对猪小梁细胞MMPs/TIMPs表达的作用研究被引量：10
- 2012年
- 目的研究氧化应激对猪眼小梁细胞NF-κB信号通路相关蛋白P65及MMPs/TIMPs表达的影响,探讨氧化应激介导的NF-κB信号通路在猪小梁细胞外基质重塑中的作用。方法传第三代的猪眼小梁细胞血清饥饿培养24 h后,利用NF-κB的特异抑制剂吡咯二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithocarbamate,PDTC)进行预处理,或直接用H2 O2进行干预,细胞免疫组化和RT-PCR检测猪眼小梁细胞NF-κB P65、M M P-2、M M P-3和TIM P-1的表达。结果 H2O2处理组猪眼小梁细胞NF-κB P65、MMP-2、MMP-3和TIMP-1的表达明显增加,与对照组比较,差异均有统计学意义。PDTC组H2O2诱导的猪眼小梁细胞MMP-2、MMP-3的表达,但仍高于对照组猪眼小梁细胞的表达。PDTC对H2O2诱导的猪眼小梁细胞TIMP-1的表达无影响。结论氧化应激可能通过诱导猪眼小梁细胞NF-κB信号通路的激活,参与猪小梁细胞外基质的重塑,可能还有其他的信号通路参与这一过程。
- 朱玉广王杰朱艳钟莹莹杜孝楠张荣
- 关键词：氧化应激小梁细胞NF-ΚB信号通路细胞外基质
- 压力对猪眼小梁细胞表达ELAM-1、MMPs/TIMPs的影响被引量：4
- 2011年
- 目的培养猪眼小梁细胞,研究压力对体外培养的猪眼小梁内皮细胞白细胞黏附分子-1(ELAM-1)、基质金属蛋白酶MM P-2、MM P-3及基质金属蛋白酶组织抑制剂TIM P-2表达的影响。方法培养猪眼小梁细胞并鉴定,建立细胞水平的青光眼模型,对传第3代猪眼小梁细胞分别施加20、40、60、80mmHg压力作为实验组,0mmHg为对照组。培养6h后行ELAM-1免疫组织化学SP法染色,培养24h后行MM P-2、MM P-3和TIM P-2免疫组织化学SP法染色,并对染色结果进行统计学分析。结果培养细胞为猪眼小梁细胞,正常小梁细胞不表达ELAM-1,压力为40、60、80mmHg时,ELAM-1的表达与0、20mmHg组相比表达明显增加。正常小梁细胞可以少量表达MM P-2、MM P-3及TIM P-2。压力为40、60mmHg时,MM P-2、TIM P-2的表达与0、20、80mmHg相比表达明显增加,压力不影响小梁细胞MM P-3的表达。结论一定范围内压力的变化可以促进猪眼小梁细胞表达ELAM-1,可以改变MM Ps/TIM Ps之间的平衡状态,进而影响小梁细胞外基质(ECM)的代谢,改变房水外流阻力,ELAM-1、MM Ps在青光眼的发病中可能发挥重要作用。
- 朱玉广王杰范晓军朱艳钟莹莹杜孝楠
- 关键词：小梁细胞基质金属蛋白酶
