国家自然科学基金(39970833)
- 作品数：17 被引量：129H指数：8
- 相关作者：秦建强余磊钟世镇杨俊黄涛更多>>
- 相关机构：中国人民解放军第一军医大学南方医科大学大连市中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省科技攻关计划更多>>
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- 神经膜细胞与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体的实验研究被引量：2
- 2005年
- 目的探索神经膜(旧称许旺细胞)与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体。方法用10μmol/mlBrdU标记体外培养纯化的许旺细胞与ECM凝胶修饰的人发角蛋白进行三维方向的共培养而构建成人工神经桥接体,移植入SD大鼠坐骨神经缺损处、皮下、骨骼肌中。S-100蛋白免疫组化染色鉴定许旺细胞,倒置显微镜和扫描电镜下观察许旺细胞与人发角蛋白的共培养,石蜡切片抗BrdU免疫组化染色观察体外培养纯化的许旺细胞在体内的生长情况。结果体外培养的许旺细胞能黏附于人发角蛋白上进行良好的生长,移植入神经缺损处4周后,坐骨神经缺损处、皮下、骨骼肌中的桥接体内的人发角蛋白开始降解,黏附于该人发角蛋白上的许旺细胞均见成活并分裂增殖。结论许旺细胞可与人发角蛋白进行三维培养,构建成人工神经桥接体,填补神经缺损。
- 杨俊刘巍余磊邱小忠焦培峰胡莲美武雷朴英杰钟世镇秦建强
- 关键词：神经膜细胞人发角蛋白周围神经生物工程
- 外周神经损伤后许旺细胞激活巨噬细胞的实验研究被引量：22
- 2002年
- 目的 研究外周神经损伤后 ,许旺细胞在激活巨噬细胞过程中的作用。 方法 以白介素 1β(IL 1β)的分泌量为巨噬细胞活性指标 ,用SD乳鼠制备预损伤神经及未损伤神经许旺细胞条件培养基 ,分别施加与纯化培养的SD大鼠腹腔巨噬细胞作用 8h ,ELISA法检测细胞上清液中白介素 1β含量。 结果 预损伤神经许旺细胞条件培养基较未损伤许旺细胞条件培养基明显促进巨噬细胞分泌白介素 1β。 结论 外周神经损伤后 。
- 黄涛秦建强刘大庸霍霄鲲余磊熊绍虎钟世镇
- 关键词：巨噬细胞许旺细胞白介素-1Β外周神经外周神经损伤
- 乳鼠预损伤周围神经雪旺细胞的培养及增殖能力研究被引量：3
- 2004年
- 目的:从乳鼠预损伤的坐骨神经中分离培养雪旺细胞。方法:预损伤SD乳鼠坐骨神经,3d后取损伤的坐骨神经,手术显微镜下分离神经外膜,用胰酶、胶原酶消化,差速贴壁除去成纤维细胞,接种培养后对细胞进行计数、MTT活性检测,并用S-100蛋白标记观察。结果:该方法所培养的雪旺细胞形态正常,数量及纯度高,增殖旺盛。结论:此实验为神经组织工程研究中雪旺细胞的来源提供了一个有效的方法。
- 黄涛秦建强王宏亮武雷杨俊余磊许忠徐如祥
- 关键词：乳鼠周围神经损伤雪旺细胞细胞培养细胞增殖
- FK506促进异体神经匀浆激活的巨噬细胞凋亡的实验研究被引量：6
- 2005年
- 目的研究FK506促进外周血来源的异体神经匀浆激活的巨噬细胞的凋亡。方法取1月龄SD幼鼠,腹腔抽取法培养异体神经匀浆激活的巨噬细胞。按不同浓度的FK506分组:A组空白对照组、B组0.25ng/ml、C组0.5ng/ml、D组1.0ng/ml。将4组处理因素分别加入长有巨噬细胞的96孔板中,用MTT法检测巨噬细胞的活力情况,用倒置显微镜和荧光显微镜及透射电镜对巨噬细胞的凋亡进行形态学上的观察与鉴定。流式细胞仪检测巨噬细胞凋亡情况。结果B组和C组均可见异体神经匀浆激活的巨噬细胞的活性减弱及细胞凋亡发生,D组可见巨噬细胞发生坏死性改变。透射电镜和荧光显微镜可观察到巨噬细胞的凋亡前期和凋亡小体出现。流式细胞仪检测B和C组凋亡率为24.6%和26.5%,均高于对照组,D组发生坏死。结论FK506可以在早期促进异体神经匀浆激活的巨噬细胞的凋亡,从而减少或抑制周围神经异体移植后巨噬细胞所介导的免疫排斥反应。
- 杨俊罗勇邱小忠武雷余磊陆云涛朴英杰秦建强
- 关键词：免疫抑制剂巨噬细胞
- FK506对许旺细胞体外增殖和分泌NGF的影响
- 2008年
- 目的研究FK506促进许旺细胞体外增殖及对许旺细胞（SCs）分泌NGF的影响。方法将纯化的许旺细胞分6组：A组（空白对照组）：含10％胎牛血清的DMEM／F12；B组：0．1ng／mlFK506；C组：0．5ng／mlFK506；D组：1．0ng／mlFK506；E组：5．0ng／mlFK506；F组：10ng／mlFK506。将许旺细胞于倒置显微镜下观察并用S—100蛋白免疫组化染色鉴定；MTT法筛选FK506促SCs增殖的最佳作用浓度：流式细胞仪检测SCs周期；ELISA法检测培养72h后SCs的NGF的分泌量。结果MTT法筛选：0．5ng／mlFK506为促进SCs增殖的最佳作用浓度；当FK506浓度大于1．0ng／ml时，SCs的生长活性逐渐下降并随着FK506浓度的逐渐增高，SCs的生长活性受抑制作用逐渐加强。流式细胞仪检测：含10％胎牛血清的DMEM／F12培养24h、48h、72h，SCsS期百分比分别为：27．8％，39．3％和58．4％；0．5ng／mlFK506培养24h、48h、72h，SCsS期百分比分别为：54．2％、60．3％和94．6％。ELISA法检测FK506促SCs增殖后表达NGF的实验研究中发现：0．5ng／mlFK506作用72h后的SCs所分泌的NGF高达0．188ng／ml。结论FK506应用于体外培养的SCs初期就能促进SCs增殖并使其保持良好的活性而高分泌NGF。
- 李春华杨俊武雷廖坚文陈泽华王启平张振伟秦建强
- 关键词：FK506许旺细胞神经生长因子外周神经
- 白介素-1β在自体神经匀浆激活的巨噬细胞上的表达被引量：11
- 2005年
- 目的 探讨 IL 1β在体外培养的自体神经匀浆激活的巨噬细胞表面的表达及与外周神经损伤的关系。 方法 将1个月龄SD幼鼠坐骨神经远端切断,预溃变2 d后,制成神经匀浆液,回注自体腹腔 3 d后,抽取腹腔液体培养巨噬细胞,培养3 d后收集培养基,即得自体神经匀浆激活的巨噬细胞的条件培养基。不损伤坐骨神经而直接腹腔注射培养基培养3 d后的巨噬细胞的上清即为未激活的巨噬细胞条件培养基。将上述两种巨噬细胞条件培养基分别设为C组和B组,把含15%小牛血清的DMEM/F12培养液注射于SD幼鼠腹腔5 min后培养的巨噬细胞条件培养基设为A组即对照组。将A、B、C 3组分别在倒置显微镜和透射电镜下观察巨噬细胞形态变化,应用 ELISA法检测 3 组巨噬细胞上清液中的 IL 1β的含量。 结果 自体神经匀浆激活的巨噬细胞胞内超微结构发生改变较明显,B组与 A组比较IL 1β的含量差异无统计学意义,C组与A、B组之间 IL 1β的含量差异均有统计学意义。 结论 吞噬自体神经匀浆颗粒后的巨噬细胞被诱导激活,从而高表达 IL 1β,将可能对外周神经损伤后功能的恢复有较大的促进作用。
- 杨俊武雷余磊邱小忠廖华朴英杰秦建强
- 关键词：巨噬细胞自体损伤坐骨神经白介素-1Β条件培养基DMEM
- FK506促进乳鼠雪旺细胞增殖的实验研究被引量：8
- 2005年
- 目的观察FK506对体外培养的乳鼠雪旺细胞增殖的影响。方法将纯化的雪旺细胞分两组,一组设为对照,另一种加含终浓度为0.5ng/mlFK506的DMEM/F12培养液培养,用MTT法检测不同时间点的OD值并绘制生长曲线,另在培养第48、72小时后用3H-胸腺嘧啶核甙测定法检测其DPM值。结果经含0.5ng/mlFK506培养液培养的雪旺细胞,其对数生长期提前出现,并且在峰值上高于对照组;接种后48h和72h,3H-胸腺嘧啶核甙检测DPM值实验组也高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FK506有促进雪旺细胞分裂增殖的作用,可能是其促进周围神经再生的重要机制之一。
- 张振伟武雷杨俊陈泽华张家俊庄加川廖坚文林冷秦建强
- 关键词：FK506乳鼠雪旺细胞细胞增殖周围神经
- IL-1β促进Schwann细胞增殖及分泌NGF的研究被引量：2
- 2008年
- 为观察白介素-1β(IL-1β)对Schwann细胞增殖及分泌神经生长因子(NGF)的影响,本研究取3d龄的大鼠坐骨神经纯化培养Schwann细胞,然后分4组进行处理。处理方法为:A组加入含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基,B组仅在纯化后第1d向培养基中加入2.0ng/mlIL-1β,C组每天向培养基中加入2.0ng/mlIL-1β,D组隔天向培养基中加入2.0ng/mlIL-1β,分别培养5d。倒置显微镜下观察Schwann细胞的形态,用抗S-100蛋白免疫组化鉴定Schwann细胞,经流式细胞仪(FCM)检测细胞的分裂增殖情况,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测NGFmRNA表达的变化,酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测细胞培养基中NGF蛋白的表达量。结果显示:D组Schwann细胞增殖率、NGFmRNA合成量和NGF蛋白表达量均显著高于其他三组(P<0.05)。此结果说明IL-1β能够促进Schwann细胞的分裂增殖,并且促进胞内NGFmRNA的合成及胞外NGF的分泌,其作用持续时间大约为2d。
- 于巧莲秦建强余磊邱小忠廖华王齐朴英杰
- 关键词：白介素-1ΒSCHWANN细胞神经生长因子周围神经
- 周围神经损伤与再生中的巨噬细胞被引量：7
- 2002年
- 黄涛秦建强
- 关键词：神经再生周围神经损伤巨噬细胞
- 周围神经修复中Schwann细胞与轴突间作用的分子机制被引量：1
- 2007年
- 于巧莲秦建强
- 关键词：SCHWANN细胞轴突生长分子机制周围神经神经营养因子
