河北省科技支撑计划项目(12277753)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刁玉巧杨明娟孟建辉曲凡陈健更多>>
- 相关机构：河北医科大学第四医院昌邑市人民医院更多>>
- 发文基金：河北省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 儿童神经母细胞瘤ZO-1基因甲基化状态临床意义分析被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨紧密连接蛋白(zonula occludens protein-1,ZO-1)基因启动子区甲基化状态在儿童神经母细胞瘤检测中的临床意义。方法:将2002-01-15-2012-12-15河北医科大学第四医院儿科35例确诊为神经母细胞瘤(Ⅳ期)患儿的骨髓标本作为研究组,20例非血液肿瘤患儿骨髓作为对照组。采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MS-PCR)方法动态检测研究组与对照组骨髓中ZO-1基因启动子区甲基化状态。逆转录聚合酶链反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)法检测两组ZO-1基因mRNA的表达情况,同时用ZO-1基因经MS-PCR扩增后的甲基化条带进行凝胶成像系统荧光强度半定量分析后的荧光强度(integrated option density,IOD)积分值,观察研究组化疗过程中IOD的动态变化。结果:MS-PCR检测结果显示,研究组治疗前32例出现ZO-1基因甲基化条带,阳性率为91.4%(32/35),对照组20例,均呈非甲基化状态,χ2=15.11,P<0.01;动态观察研究组31例ZO-1基因甲基化阳性率,治疗前为90.3%(28/31),化疗早期为80.6%(25/31),化疗后期为71.0%(22/31)。临床完全缓解3例,仍有2例可检出。治疗前与化疗早期、后期比较差异均无统计学意义,χ2=0.4,P=0.819。RT-PCR检测结果显示,研究组治疗前35例提取总RNA,3例见到ZO-1基因表达,阳性率为8.6%(3/35),对照组20例均有表达,阳性率为100.0%(20/20),χ2=16.616,P<0.001。动态观察研究组31例ZO-1基因表达阳性率,治疗前为9.7%(3/31),化疗早期为19.4%(6/31),化疗后期为29.0%(9/31)。临床完全缓解3例,2例未见到ZO-1基因表达。治疗前与化疗早期、化疗后期比较差异均无统计学意义,χ2=2.53,P=0.500。性别(t=0.530,P=0.25)、年龄(r=0.080,P=0.25)与IOD值线性无关。外周血白细胞总数与IOD值线性无关,r=0.093,P=0.25。骨髓中瘤细胞数与IOD值线性相关,且呈正相关,r=0.669,P=0.036 5。结论:ZO-1基因在儿童神经母细胞瘤中呈特异性高甲基化状态,导致该基因表达沉默
- 刁玉巧曲凡杨明娟孟建辉陈健李梅
- 关键词：儿童ZO-1基因甲基化特异性聚合酶链反应甲基化神经母细胞瘤
- 儿童急性白血病ZO-1基因甲基化状态临床意义分析被引量：2
- 2014年
- 目的探讨紧密连接蛋白(zonula occluden protein-1,ZO-1)基因启动子区甲基化状态在儿童急性白血病(AL)骨髓检测中的临床意义。方法将48例确诊为AL(35例急性淋巴细胞白血病,13例急性髓细胞白血病)患儿的骨髓标本作为研究组,20例非血液肿瘤患儿骨髓标本作为对照组。采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测研究组与对照组ZO-1基因启动子区甲基化状态。逆转录PCR(RT-PCR)检测研究组与对照组ZO-1基因mRNA的表达情况。结果 MS-PCR检测结果显示,治疗前研究组ZO-1基因甲基化阳性率为68.8%(33/48),对照组均呈非甲基化状态(P<0.05);动态观察31例急性淋巴细胞白血病ZO-1基因甲基化阳性率:治疗前64.5%(20/31),治疗第33天48.4%(15/31),治疗第12周29.0%(9/31)。治疗过程中复发2例,甲基化状态由部分甲基化条带转变为完全甲基化条带。5例疗程结束,停药前仍有1例可检出。治疗前与治疗第33天、治疗第12周比较差异均有统计学意义(P<0.05),治疗第33天与治疗第12周比较差异有统计学意义(P<0.05);急性淋巴细胞白血病68.6%(24/35),与急性髓细胞白血病69.2%(9/13)比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR检测结果显示,研究组治疗前及动态观察中,ZO-1基因甲基化阳性病例均无mRNA表达,对照组全部表达。结论 ZO-1基因启动子区高甲基化状态在儿童急性白血病中有较高的特异性,与疾病发生、发展及转归密切相关。ZO-1基因有可能作为新的白血病分子标志,为临床早期诊断、疗效判断、预后评价、微小残留检测提供新的指标。
- 刁玉巧曲凡杨明娟孟建辉
- 关键词：急性白血病儿童甲基化
- 儿童非霍奇金淋巴瘤ZO-1基因甲基化状态分析及临床意义
- 2014年
- 目的探讨紧密连接蛋白(ZO-1)基因启动子区甲基化状态在儿童非霍奇金淋巴瘤(NHL)Ⅳ期检测中的临床意义,以进一步寻找病因及早期诊断方法。方法将55例确诊为NHLⅣ期(T细胞型40例,B细胞型15例)患儿的骨髓标本作为病例组,20例非血液肿瘤患儿骨髓标本作为对照组。采用甲基化特异性PCR法(MS-PCR)检测病例组与对照组骨髓中ZO-1基因启动子区甲基化状态,并检测光密度积分值(IOD)。逆转录PCR法(RT-PCR)检测病例组与对照组ZO-1基因mRNA的表达情况。结果 MS-PCR检测结果显示病例组治疗前39例出现ZO-1基因甲基化条带,阳性率为70.9%(39/55),对照组20例均呈非甲基化状态;治疗过程中,行动态观察NHL患儿47例,其中T细胞型32例,B细胞型15例,治疗前ZO-1基因甲基化阳性率分别为72%和67%,两者差异无统计学意义(P>0.05)。T细胞型与B细胞型NHL患儿治疗前与化疗早期、中期比较差异均无统计学意义(P>0.05),而与化疗后期比较差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测结果显示病例组中ZO-1甲基化阳性病例均无mRNA表达,对照组患儿均表达ZO-1 mRNA。外周血白细胞总数与ZO-1基因IOD值无直线相关关系(r=0.093,P=0.575);骨髓中恶性肿瘤细胞数与ZO-1基因IOD值呈正相关关系(r=0.669,P<0.001)。结论 ZO-1基因在儿童NHL中呈特异性高甲基化状态,其程度与骨髓中恶性肿瘤细胞数呈正相关。ZO-1基因可能成为新的分子标志,为临床早期诊断、疗效判断、预后评价、微小残留检测提供新的指标。
- 刁玉巧曲凡杨明娟孟建辉朱秀丽陈健
- 关键词：ZO-1基因甲基化非霍奇金淋巴瘤儿童
