广州市科技计划项目(2004Z3-E0151)
- 作品数：13 被引量：45H指数：5
- 相关作者：姚志彬汪华侨林贤徐杰段金海更多>>
- 相关机构：中山大学广东省人民医院中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阿尔茨海默病患者扣带回后部各向异性与葡萄糖代谢关系研究被引量：4
- 2008年
- 目的用磁共振扩散张量成像(DTI)研究阿尔茨海默病患者扣带回后部各向异性损害的特点及其与葡萄糖代谢改变的关系。方法对16例AD患者和12例年龄及性别相当的健康老年人行DTI、T1液体衰减反转恢复序列(FLAIR)及T2-FLAIR检查,测量扣带回后部部分各向异性分数值(FA)和平均弥散度(MD),分析FA、MD值与MMSE评分之间的相关关系;正电子发射计算机断层摄影(PET)观察扣带回后部葡萄糖代谢改变,并分析FA、MD与葡萄糖代谢改变的关系。结果与对照组相比,AD患者扣带回后部的FA值显著降低(P=0.018),MD值显著升高(P=0.020),葡萄糖代谢率显著降低(P=0.020);MD值与葡萄糖代谢率呈负相关(r=-0.700,P=0.05),而FA值与葡萄糖代谢率无相关关系(r=-0.054,P=0.844)。结论AD患者表现为扣带回后部各向异性损害,且损害程度与葡萄糖代谢率呈负相关;这种损害反应了AD病理机制中皮质-皮质及皮质-皮质下联系的丢失;扣带回后部FA、MD值可以用来监测疾病的进展情况及评价AD治疗药物的临床疗效。
- 段金海汪华侨陈少琼徐杰林贤康庄姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病磁共振扩散张量成像各向异性分数
- 以纤维蛋白凝胶为支架构建组织工程胃新膀胱的研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨以纤维蛋白凝胶为支架,通过组织工程技术以胃重建膀胱的可行性。方法从实验动物获取膀胱黏膜,体外培养并扩增移行上皮细胞。分别通过纤维蛋白凝胶(实验组)和keratinocyte-SFM(对照组)将单个细胞悬液移植于带血管蒂的去黏膜胃片,将胃片缝成囊状(新膀胱),固定于腹壁。于术后2、4、6、8周取胃片进行组织学及免疫组化分析。结果实验组术后随时间延长新膀胱有不同程度挛缩;HE染色提示胃囊腔面有上皮样细胞覆盖,2周时细胞覆盖率约50%,4-8周时约70%。这些细胞分布不均匀,分层不明显;上皮样细胞AE1/AE3染色和CK7染色均阳性。对照组各标本均严重挛缩,腔隙消失,无上皮覆盖。结论将体外培养扩增的尿路上皮细胞通过纤维蛋白凝胶移植至去黏膜胃片,可以使去黏膜胃片移行上皮化,从而重建膀胱。
- 杨中华王行环王怀鹏罗耀雄刘久敏
- 关键词：纤维蛋白凝胶移行上皮
- Alzheimer患者血清中抗Aβ42自身抗体的纯化及鉴定被引量：5
- 2009年
- 目的:纯化并鉴定阿尔茨海默病(AD)患者血清中抗Aβ42自身抗体。方法:选择AD患者做为研究对象,采集血清标本,测定抗体含量,用饱和硫酸铵沉淀血清得到IgG粗品,Aβ42免疫亲和柱层析对粗品IgG进一步分离纯化,采用PAGE电泳和Western blot方法鉴定IgG纯度和免疫活性。结果:用CNBr活化Sephrose4B柱层析纯化出较高纯度的抗Aβ42自身抗体,纯度可达到90%。结论:CNBr活化Sephrose4B层析柱可有效地从人血清中纯化出较高纯度的抗Aβ42自身抗体,便于对自身抗体进一步研究,为AD的免疫治疗提供更多的信息。
- 段金海徐书雯莫建伟向绍通方运勇汪华侨莫思杰胡涛姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病自身抗体血清
- 阿尔茨海默病患者血清中抗淀粉样蛋白抗体的免疫耐受被引量：2
- 2007年
- 目的:研究阿尔茨海默病(AD)血清中抗Aβ抗体与淀粉样蛋白结合的特性。方法:以AD患者和健康老人的血清作一抗,①用组织淀粉样斑块免疫反应(TAPIR)观察与Tg2576鼠脑内老年斑结合能力;②Western blot检测与Aβ42-GST融合蛋白的结合能力;③将Aβ42与PC12细胞培养,加入健康老人和AD患者的血清后,MTT法观察PC12细胞存活率。结果:AD患者的血清中抗Aβ抗体与成熟老年斑和Aβ42-GST融合蛋白的结合能力较弱;加入AD血清后,PC12细胞的A值较健康老人血清相比下降明显(P<0.01)。结论:AD血清中抗Aβ抗体对淀粉样蛋白可能存在着免疫耐受。
- 杨志勇汪华侨徐杰谢瑶袁群芳姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病免疫耐受性
- β淀粉样蛋白亚单位疫苗免疫反应的量效关系
- 2006年
- 目的探讨Aβ亚单位疫苗诱发体液免疫反应的量效关系和时程。方法采用C57BL小鼠,依据滴入Aβ15的量将其分为50、25、12.5μg3个组,每周1次经鼻粘膜滴入Aβ15亚单位疫苗,观察1年之中鼠血清中抗Aβ抗体水平的变化;取脾细胞培养,加入不同浓度的Aβ15,用MTT法观察脾细胞增殖情况。结果3组小鼠的外周血内均有抗Aβ抗体产生。25μg组和12.5μg组产生抗体较50μg组早,3组峰浓度抗体水平分别为1∶6720、1∶6222和1∶3565。脾细胞增殖实验表明0.5μg和5μg的Aβ15具有较强的刺激脾细胞增殖的作用,而50μg的Aβ15对脾细胞增殖的刺激作用反而下降(P=0.042;P=0.021)。结论Aβ15亚单位疫苗诱导体液免疫反应的能力因接种的剂量不同而异。高浓度的Aβ15可以引起免疫耐受,使抗Aβ抗体产生减少。
- 杨志勇汪华侨谢瑶袁群芳姚志彬
- 关键词：阿尔采末病疫苗
- Aβ1-15疫苗预防Tg2576小鼠脑病理变化和认知退化的研究被引量：3
- 2008年
- 探讨Aβ亚单位疫苗接种后对Tg2576小鼠脑病理变化和认知退化的预防作用．32只5月龄Tg2576小鼠随机分成4组：对照组（只接种佐剂），Aβ42组（接种Aβ42疫苗），Aβ1-15小组（接种Aβ1-15疫苗）和Aβ36-42组（接种Aβ36-42疫苗），每组8只,3组接种疫苗小鼠的血清抗Aβ42抗体滴度比对照组显著增高；脑组织匀浆内也可检测到少量抗体．Morris水迷宫实验结果显示Aβ42组、Aβ1-15小组和Aβ36-42组与对照组小鼠的行为学有明显改善．取各组2只小鼠的脾细胞培养，经Con A或各自抗原刺激后，3组疫苗免疫后小鼠脾细胞增殖显著高于对照组；Aβ42组，IL-4和IL-10相对较高，而IL-2和INF-γ相对较低；Aβ1-15小组中IL-4和IL-10较高；Aβ36-42组IL-2和INF-γ较高．免疫组织化学法显示对照组小鼠脑皮质与海马部位有大量老年斑，而Aβ42组和Aβ1-15组脑内无老年斑出现，Aβ36-42组小鼠脑内有少量老年斑．实验证明Aβ1-15亚单位疫苗可防止Tg2576小鼠认知行为的退化，阻止Tg2576小鼠脑内Aβ沉积和老年斑的形成．
- 胡金家李国营汪华侨林贤姚志彬
- 关键词：Β-淀粉样肽老年斑
- Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠对脑内淀粉样斑块沉积和行为学的影响被引量：7
- 2006年
- 目的探讨Aβ亚单位疫苗接种对Tg2576鼠淀粉样斑块沉积和行为学损害的影响。方法24只Tg2576鼠随机分为Aβ1-15组、Aβ36-42组、Aβ42组和对照组，9月龄时开始分别接种相应的疫苗，间接ELISA法检测血清和脑匀浆上清液特异性抗体的滴度；免疫组织化学染色观察脑内淀粉样斑块沉积；Morris水迷宫测试行为学变化；组织染色观察脑、肝、脾、肺和肾的组织学变化。结果第2次接种后各实验组即明显有抗Aβ42抗体产生，抗体滴度随接种次数的增加而增加。停止接种，抗体滴度下降。脑匀浆上清液中也检测出低滴度的抗Aβ42抗体；疫苗接种6个月后，Aβ42、Aβ1-15和Aβ36-42组鼠皮层和海马淀粉样斑块沉积量与对照组相比均明显减少（P〈0．01），其认知能力显著高于对照组（P〈0．01）。Aβ1-15组和Aβ42组相比差异无显著性（P〉0．05），但优于Aβ36-42组（P〈0．01）；各组鼠的脑、肝、脾、肺和肾均未发现病理变化。结论邯亚单位疫苗接种能有效阻抑Tg2576鼠淀粉样斑块形成和认知功能退化，未发现不良反应。提示用Aβ1-15疫苗替代其全肽疫苗而用于AD免疫治疗，值得进一步研究。
- 李国营汪华侨胡金家林贤徐杰姚志彬
- 关键词：Β-淀粉样蛋白淀粉样斑块
- Aβ_(1-15)多价DNA疫苗的构建及其对体液免疫的效果被引量：6
- 2005年
- 【目的】构建Aβ1-15多价DNA疫苗,研究其诱导体液免疫的效果。【方法】基因合成和PCR技术扩增以多个甘氨酸连接的Aβ1-15二价基因片段;在N端引物延伸加上IgGκ轻链信号肽序列;GSGGSGlinker再串连两段Aβ1-15二价基因片段,克隆入pcDNA3.1表达载体,构建pcDNA3.1-s4×Aβ15真核表达质粒;质粒转染COS-7细胞,Westernblot检测4×Aβ15的表达;质粒肌肉注射接种BALB/c鼠,共6次,18周加强免疫,ELISA法检测抗体效价以及抗体分型;免疫组织化学和Aβ42肽抗原的中和实验检测抗血清与转基因鼠Tg2576脑切片中老年斑的特异结合。【结果】测序证实所构建的pcDNA3.1-s4×Aβ15载体序列正确,在COS-7细胞中表达分子质量约8ku的分泌型4×Aβ15蛋白。pcDNA3.1-s4×Aβ15疫苗于第2次加强免疫后产生Aβ抗体,随加强免疫次数增多,抗体滴度增加,在19周,抗体平均滴度为1︰6400,抗体以IgG1型为主,且可以与转基因鼠Tg2576脑切片中的老年斑免疫结合并被Aβ42肽抗原的中和。【结论】所构建的pcDNA3.1-s4×Aβ15疫苗可在小鼠体内产生高效价的Aβ抗体,为下一步免疫老年性痴呆转基因动物的研究提供条件。
- 张革汪华侨邹俊涛李国营袁群芳林贤姚志彬张革
- 关键词：多价DNA疫苗体液免疫COS-7细胞BALB/C鼠LINKERBLOT检测
- 阿尔茨海默病人外周血中抗淀粉样蛋白抗体的特性被引量：3
- 2005年
- 目的比较AD病人和健康老年人外周血中的抗Aβ抗体特性。方法随机选择AD患者45例和健康老年人51例,①用间接ELISA法测定血清中的抗Aβ抗体滴度,②免疫组织化学ABC法观察AD病人和健康老人血清中的抗Aβ抗体与Tg2576鼠脑内老年斑的结合情况;③不同抗体水平的AD病人和健康老人的血清分别与PC12细胞培养,用MTT法检测PC12细胞的存活率。结果①AD病人和健康老人血清中的抗Aβ抗体分别为(119.78±84.50)μg/ml和(200.44±216.78)μg/ml,差异有显著性意义(P<0.05);②免疫组化发现用AD病人血清作一抗,抗Aβ抗体不能很好地显示已经形成的老年斑;③虽然AD病人血清中抗Aβ抗体较高,对PC12细胞的保护作用反而下降,且与Aβ42的剂量无相关性;而健康老人的血清仍能表现出较强的PC12细胞保护作用。结论AD病人血清中抗Aβ抗体滴度下降,与老年斑结合能力和对细胞的保护能力也下降。
- 杨志勇汪华侨徐杰谢瑶黄绍宽袁群芳成林平姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病外周血老年斑
- Aβ_(42)亚单位疫苗诱导的抗体与阿尔茨海默病人脑海马老年斑结合被引量：4
- 2005年
- 目的观察Aβ42亚单位肽疫苗接种SD大鼠产生的抗体与阿尔茨海默(Alzheimer)病人脑海马老年斑结合的情况,以筛选Aβ42亚单位片段. 方法先以Bielschowsky改良法确定有老年斑的AD病人的脑,再将Aβ1～15及Aβ36～42亚单位疫苗和Aβ42全肽疫苗接种于SD大鼠,取最后一次接种大鼠的血清与AD病人的脑切片进行免疫组织化学反应(ABC法).结果Aβ1-15亚单位片段疫苗以及Aβ42全肽疫苗诱导产生的抗血清染出的老年斑形态,以经典型(即成熟型)居多,间或有弥散型的老年斑.老年斑略呈圆形,大小不一,遍布海马的各个区域;有些老年斑则呈疏松的丝网状的球体;室管膜下和脑血管膜也见有Aβ沉积.Aβ36-42亚单位片段疫苗诱导产生的抗血清则未能染出老年斑.结论Aβ1-15亚单位疫苗以及Aβ42全肽疫苗诱导产生的抗血清,能与AD病人脑海马切片的老年斑结合;而Aβ36～42亚单位疫苗诱导产生的抗血清,则不能与AD脑片的老年斑结合.
- 林贤汪华侨周江宁姚志彬
- 关键词：Β-淀粉样蛋白肽疫苗阿尔茨海默病老年斑
