新疆维吾尔自治区自然科学基金(2011211A013)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
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- 发文基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
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- 甜瓜叶片中Rubisco的去除及双向电泳体系的优化被引量：9
- 2012年
- 为降低Rubisco的干扰,建立适合于甜瓜叶片蛋白质的双向电泳技术,本文比较了不同全蛋白提取方法和上样量对双向电泳的影响。结果表明,Mg/NP-40/PEG3350/TCA/丙酮提取法可去除样品中绝大多数的Rubisco,使低丰度蛋白得以检测,适合后续分析。以该法提取的蛋白,采用600、800、1000和l200μg四种上样量进行双向电泳,上样量为l000μg的样品用pH3～10的IPG胶条,在2-DE胶上分辨出质量好、数量多的蛋白质点(562个)。因此,Mg/NP-40/PEG3350/TCA/丙酮法是适合甜瓜叶片蛋白质提取的方法,l000μg是最适上样量。
- 钟俐马成梅梁永增李冠
- 关键词：甜瓜RUBISCO蛋白质提取双向电泳
- 甜瓜叶片蛋白质2-DE中IPG胶条及染色方法的选择被引量：3
- 2013年
- 研究双向电泳中IPG胶条对甜瓜叶片中的蛋白质在2 DE图谱上的影响，以及双向电泳后凝胶的最适染色方法。结果表明：当上样量为300 μg时，在pH 3～10 L（pH为3~10，线性）、pH 3～10 NL（pH为3~10，非线性）和pH 4～7 L（pH为4~7，线性）3种IPG胶条中，pH 4～7 L的IPG胶条在2 DE胶上出现的蛋白点数最多，大约为648个，且分布均匀，清晰度较高；pH 3～10 NL的IPG胶条在图谱上出现的蛋白点数要稍多于pH 3～10 L的IPG胶条。凝胶染色结果说明，银染 考马斯亮蓝复合染色法效果最好，可明显提高蛋白质凝胶电泳的分辨率。
- 马成梅梁永增钟俐
- 关键词：双向电泳甜瓜染色方法
- 白粉病胁迫对甜瓜同工酶谱的影响
- 2011年
- 【目的】研究甜瓜幼苗叶片中的SOD、POD、CAT同工酶与甜瓜白粉病之间的关系。【方法】以白粉病感病甜瓜品种伽师和白粉病抗病甜瓜品种MR-1为材料,利用PAGE电泳方法分析三种同工酶在接种白粉病前后酶谱的变化。【结果】感病品种伽师和抗病品种MR-1的POD、CAT、SOD受白粉病胁迫后,同工酶谱均有变化,POD酶带在第3 d时有新的酶带出现,伽师:P4(Rf=0.80),MR-1:P1(Rf=0.68),且感病品种伽师比抗病品种MR-1的POD活性变化更迅速;CAT同工酶无新的酶带出现,但两品种的两条CAT同工酶酶带分别在接种白粉病后3和12 d出现两次峰值;SOD同工酶酶活性变化相对较弱,无新的酶带出现,但SOD同工酶酶带S1(Rf=0.50)的活性有变化呈6 d增强9 d降低的趋势。同时,在接种白粉病后甜瓜白粉病抗病品种MR-1的POD、CAT、SOD酶活性始终比甜瓜白粉病感病品种伽师的酶活性强。【结论】甜瓜幼苗期接种白粉病菌后SOD、CAT、POD的活性变化可以作为衡量甜瓜抗病性的生化指标。
- 樊月谷俊霞钟俐
- 关键词：白粉病PODSODCAT同工酶
- 白粉病菌胁迫下甜瓜叶片中Ca^(2+)的细胞化学定位及外源Ca^(2+)对POD、CAT和SOD同功酶的影响被引量：5
- 2012年
- 【目的】对接种白粉病菌前后的甜瓜叶片中Ca2+进行细胞定位分析,并探讨外源Ca2+对白粉病菌胁迫下3种同工酶的影响,为研究甜瓜在白粉病胁迫下的信号转导及抗病机制奠定基础。【方法】通过电镜和细胞化学技术对抗病性不同的甜瓜幼叶在白粉病菌胁迫下的Ca2+进行超微细胞化学定位研究,采用Hoagland营养液栽培法,对不同外源Ca2+作用并接种白粉病菌的甜瓜叶片的POD、CAT和SOD同工酶进行分析。【结果】接种白粉病菌2 d时,Ca2+在抗病品种和感病品种叶肉细胞胞质内聚集;液泡和细胞间隙内Ca2+水平急剧下降;接种白粉病菌6 d后,抗病品种‘MR-1’胞质内Ca2+水平又逐渐恢复至接种前的状态,Ca2+主要分布在液泡和细胞间隙,而感病品种‘JS’叶肉细胞内Ca2+在细胞基质中分布集中并聚集成大的沉淀颗粒,细胞结构逐渐破坏,直至死亡,在液泡和细胞间隙未发生Ca2+恢复现象。外源Ca2+对3种同工酶谱的作用结果为:与对照相比,营养液增施6 mmol.L-1CaCl2可明显缓解白粉菌对甜瓜的伤害,其POD、CAT和SOD同工酶活性高于对照水平;营养液增施75mmol.L-1的LaCl3显著抑制了甜瓜幼叶POD、CAT和SOD同工酶的活性。【结论】白粉病菌胁迫下,抗病性不同的甜瓜叶片中Ca2+的时空定位分布有差异:抗病品种中Ca2+由胞内钙库(即液泡)释放入细胞基质,之后又被泵回液泡,而感病品种中Ca2+仅发生从液泡向胞质释放的过程;外源Ca2+可能增加了Ca2+向甜瓜叶片内的运输,促进白粉病胁迫信号向植株体内的传递,提高甜瓜叶片保护酶的表达量及其活性氧清除水平,从而延缓白粉病胁迫对甜瓜叶片的伤害。
- 钟俐李冠
- 关键词：细胞化学定位CA2+
