国家重点基础研究发展计划(2013CB531603)
- 作品数：9 被引量：15H指数：2
- 相关作者：霍克克仲人前石超王亚倩刘耀婷更多>>
- 相关机构：复旦大学第二军医大学上海市计划生育科学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 烟曲霉Asp f3和Asp f4的表达纯化与多克隆抗体的制备被引量：1
- 2015年
- 侵袭性曲霉病以烟曲霉在肺部定植、侵袭为主,具有较高的致死率.治疗侵袭性曲霉病的关键是早期确诊.目前临床上用于诊断侵袭性曲霉病的血清学方法是检测血清中半乳甘露聚糖循环抗原的GM试验,在敏感性和特异性方面存在局限性.为了用抗重组蛋白多克隆抗体鉴定和分析烟曲霉Asp f3和Asp f4特异性和曲霉广谱性表位,构建检测可疑血清样本中相应抗体的表位嵌合肽,以诊断侵袭性曲霉病.本研究表达纯化了烟曲霉Asp f3和Asp f4重组蛋白,制备了IgG抗体滴度均在1.28×106以上的高滴度的兔抗重组蛋白多克隆抗体.
- 高岩霍克克季朝能唐海平徐万祥谢毅顾少华
- 关键词：烟曲霉ASPF3ASP表达纯化抗体制备
- 尿毒症患者群体反应性抗体的种类与频率被引量：3
- 2014年
- 目的研究尿毒症患者群体反应性抗体(PRA)的种类与频率。方法分析2008-2013年本院门诊及住院的2727例尿毒症患者PRA检测结果,血清样本以ELISA方法检测HLA I类、Ⅱ类混合抗原板。将检测结果分为阴性组(PRA<10%)和阳性组(PRA≥10%),采用SPSS21.0软件分析不同性别、年龄组患者PRA阳性率的差异。结果2727例患者中,PRA阳性组366例,PRA阴性组2361例,阳性率13.4%。其中,男性1840例,阳性率为10.1%(186/1840),女性887例,阳性率为20.3%(180/887),男女阳性率差异有统计学意义(χ2=53.42,P<0.01);各年龄组阳性率比较,结果显示少年组为4.8%(4/83),青年组为10.0%(85/854),中年组为16.1%(268/1660),老年组为6.9%(9/130),各年龄组的阳性率差异有统计学意义(χ2=29.44,P<0.01)。ELISA方法能检出HLA-A、B、CW、DR、DQ位点特异性抗体20种、27种、5种、13种和7种。各位点出现频率较高的抗体种类分别是A2、A25、A23、A24、A66;B7、B13、B57、B44、B60;CW4、CW 6、CW 10、CW 7、CW8;DR11、DR1、DR7、DR9、DR12;DQ6、DQ5、DQ7、DQ8、DQ2,频率分布与中国人群HLA抗原频率分布不尽一致。结论尿毒症患者PRA阳性率女性显著高于男性,不同年龄组阳性率也有显著差异,以少年组最低,中年组最高。针对不同等位基因的HLA抗体产生频率不同。
- 娄小燕梁艳王皓仲人前
- 关键词：群体反应性抗体尿毒症肾移植HLA
- 血浆(1,3)-β-D葡聚糖检测对器官移植患者侵袭性真菌感染诊断价值被引量：8
- 2013年
- 目的探讨血浆(1,3)-β-D葡聚糖(BG)检测(G试验)在诊断器官移植术后合并侵袭性真菌感染(IFI)的诊断价值。方法回顾性分析2011年1月～2012年12月130例在本院肝、肾移植中心住院疑似IFI的患者的血浆标本,进行G实验检测。其中64例最终确诊或临床诊断为IFI患者,设为IFI组,余66例为非IFI组。应用MB-80微生物动态快速检测系统和GKT-5M Set动态真菌检测试剂盒,血浆BG浓度≥10 pg/mL判定G试验阳性。采用四格表计算G试验诊断IFI的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。对G试验结果进行受试者特征工作曲线(ROC曲线)分析,并计算曲线下面积。结果 130例患者中,IFI组中G试验阳性57/64,阳性率89.1%;阴性7例,假阴性率10.9%。非IFI组G试验阳性15/66,假阳性率22.7%。G试验阳性诊断IFI的敏感度、特异度、阳性预值和阴性预测值分别为89.1%,77.3%,79.2%和87.9%。根据G试验结果绘制ROC曲线,曲线下面积为0.875(95%CI:0.813～0.937)。结论 G试验对器官移植患者IFI具有中等诊断价值。适当提高诊断界值及重复检测可较大程度地消除假阳性。
- 刘耀婷陈险峰胡海清殷杏陈勇周庭银仲人前
- 关键词：器官移植侵袭性真菌感染
- 烟曲霉Asp f3和Asp f4线性B细胞抗原表位最小基序鉴定
- 2016年
- 烟曲霉(Aspergillus fumigatus)是一种广泛存在于自然界中的条件致病菌,其产生的分生孢子被易感人群吸入后定植于肺部,引起3种曲霉病:致咯血的曲霉肿、致肺纤维化的变应性支气管肺曲霉病、致较高死亡率的侵袭性曲霉病。目前临床上用于诊断烟曲霉感染的血清免疫学指标有半乳甘露聚糖和1,3-β-D-葡聚糖,但特异度和灵敏度方面存在一定的局限性。Asp f3和Asp f4为烟曲霉主要抗原,在感染者血清中存在相应的循环抗体。本研究分别用兔抗Asp f3和Asp f4抗血清对其进行抗原表位扫描,鉴定了8个Asp f3和6个Asp f4最小表位基序肽。用所鉴定的最小表位基序与烟曲霉其他抗原的最小表位基序构建嵌合肽,可能有助于提高烟曲霉感染诊断的特异度和灵敏度。
- 石晶高岩霍克克季朝能唐海平徐万祥谢毅顾少华
- 关键词：烟曲霉ASPF3ASP
- 烟曲霉COFILIN与人GOSR1蛋白相互作用并抑制HEK293T细胞的增殖被引量：1
- 2018年
- COFILIN是真核生物中肌动蛋白的解聚因子,使细胞骨架产生活力.烟曲霉(Aspergillus fumigatus)COFILIN蛋白是其侵入机体的主要致病力因子,也是其逃逸宿主免疫系统防御的重要手段.为了探索烟曲霉COFILIN在感染宿主细胞过程中的作用机制,首先利用酵母双杂交技术在人类巨噬细胞cDNA文库中筛选到了一个新的COFILIN相互作用蛋白GOSR1(Golgi SNAP receptor complex member 1),然后采用GST pulldown和Co-IP技术验证了这两个蛋白在体外和体内相互作用的特异性,并通过将构建的截短突变体转化宿主菌表达的形式确定了相互作用的区段.将烟曲霉COFILIN基因在HEK293T细胞中过表达,结果发现COFILIN对细胞内源性GOSR1在转录水平和蛋白水平的表达都有一定的抑制作用,同时抑制细胞增殖、促进凋亡,并引起G2/M期阻滞.
- 邵骏骅石超石超王亚倩
- 关键词：烟曲霉COFILIN蛋白质相互作用细胞增殖
- 血浆脂多糖浓度检测对器官移植患者革兰阴性细菌感染的诊断价值被引量：1
- 2015年
- 目的探讨血浆脂多糖（LPS）浓度检测对器官移植患者革兰阴性细菌（GNB）感染的诊断价值。方法回顾性分析160例疑似感染的器官移植患者的病史，根据细菌分离培养的结果将患者分为GNB感染组和对照组。采用动态比浊法检测患者就诊时外周血LPS浓度。以受试者工作特征（ROC）曲线评价LPS浓度检测对GNB感染的诊断价值。结果GNB感染组和对照组LPS浓度的中位数（四分位数）分别为33．58（22．12，73．59）和5．00（5．00，9．78）pg／mL，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。LPS浓度检测诊断GNB感染的ROC曲线下面积为0．834（95％可信区间0．764-0．903）。当诊断界值设定为20pg／mL时，LPS浓度检测诊断GNB感染的敏感性为81．01％，特异性为88．89％。结论在器官移植患者中，LPS是诊断GNB感染的有效生物标志物。
- 唐晴琴胡志德刘耀婷杨敏魏婷婷马宁秦保东傅海涛仲人前
- 关键词：脂多糖革兰阴性细菌器官移植
- 结核分枝杆菌ClpX与人UBC9蛋白的相互作用抑制宿主细胞增殖被引量：1
- 2016年
- ClpX是原核生物中高度保守的基因,其编码丝氨酸蛋白酶ClpXP的ATP结合亚基,具有底物识别及ATP水解活性.ClpX参与调控细胞周期与应激反应,且为多种病原微生物致病所必需,但目前相关研究仍非常有限.为了探索结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)ClpX在感染宿主细胞过程中的作用机制,本文首先通过酵母双杂交技术在人类淋巴细胞cDNA文库中筛选得到了一个新的与结核ClpX相互作用的蛋白UBC9,并利用GST pull-down和Co-IP技术证实了这两个蛋白在体外和体内相互作用的特异性.将ClpX转染HEK293T细胞过表达,RNA干扰与回复实验进一步证实了ClpX蛋白能够通过与UBC9的相互作用抑制宿主细胞的增殖.
- 王亚倩石超霍克克
- 关键词：结核分枝杆菌UBC9蛋白质相互作用细胞增殖
- 结核分枝杆菌ICL抑制CTBP1表达并促进细胞凋亡
- 2016年
- 异柠檬酸裂合酶(Isocitrate Lyase,ICL)参与乙醛酸循环,是结核分枝杆菌能在宿主体内潜伏的关键因素之一.为了探索ICL在结核菌与宿主相互作用中的地位,首先通过酵母双杂交技术在人淋巴细胞cDNA文库中筛选得到一个新的ICL相互作用蛋白CTBP1(C Terminal Binding Protein 1).然后分别采用GST pull-down和Co-IP实验证实了这两个蛋白在体外和体内与ICL相互作用的特异性.通过使ICL在HEK293T细胞中过表达,发现内源性CTBP1在转录水平和蛋白水平的表达都受到了抑制,同时导致细胞增殖减缓、凋亡加快,并出现G2/M期阻滞等改变.这些结果表明,结核菌ICL在参与介导细胞凋亡、影响宿主细胞活性的过程中起着重要的作用.
- 石超王亚倩邵骏骅霍克克
- 关键词：结核分枝杆菌ICL蛋白质相互作用细胞凋亡
- 树突状细胞相关受体在烟曲霉感染中作用的研究现况
- 2016年
- 烟曲霉是一种条件致病菌,一旦感染免疫抑制的患者,其病死率高达60%～80%。树突状细胞（DC）为专职的抗原递呈细胞,是连接固有免疫和适应性免疫的桥梁,可通过不同的受体识别烟曲霉的孢子及菌丝,在吞噬病原菌后分泌相应的致炎因子并调节Th细胞的成熟和分化,进而有效地抵御烟曲霉的感染。因此,DC受体在这一过程中起着关键作用,文章将对DC相关受体在烟曲霉感染中作用的研究现况进行综述。
- 马宁陈险峰杨敏傅海涛秦宝东仲人前
- 关键词：树突状细胞受体烟曲霉
