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南瓜蛋白对人胰腺癌细胞CFPAC-1增殖抑制及诱导凋亡作用被引量：2: 2012年; 目的探讨南瓜蛋白(CUS)体外对人胰腺癌细胞CFPAC-1的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法甲基噻唑基四唑法检测南瓜蛋白对CFPAC-1细胞的增殖抑制作用,透射电镜观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,蛋白质印迹法检测caspase-3及bcl-2蛋白表达水平。结果不同浓度(0.031 25、0.062 5、0.125、0.25、0.5、1及2μmol.L-1)南瓜蛋白作用不同时间(24、48及72 h)后,南瓜蛋白对胰腺癌细胞有增殖抑制作用,并呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。1μmol.L-1南瓜蛋白作用72 h后,电镜下可见明显凋亡改变,并可见凋亡小体。流式细胞仪结果示,与对照组相比,S期细胞减少,G0/G1期细胞增多,细胞由G0/G1期进入S期延缓;不同浓度(0、0.062 5、0.25及1μmol.L-1)南瓜蛋白作用72 h后细胞凋亡率分别为(0.33±0.37)%、(19.26±1.49)%、(37.13±2.07)%及(55.64±2.91)%。随着药物浓度的增高,caspase-3蛋白表达逐渐增强,bcl-2蛋白表达逐渐减弱。结论南瓜蛋白对人胰腺癌细胞CFPAC-1具有明显抑制作用;南瓜蛋白可能通过上调caspase-3及下调bcl-2蛋白表达诱导胰腺癌细胞凋亡。; 谢捷明杨爱琴张宝明黄鹤光陈明晃王丛菲; 关键词：胰腺肿瘤南瓜蛋白凋亡 CFPAC-1

Crystallization and Preliminary Crystallographic Analysis of β-Trichosanthin,an Isoform of Trichosanthin from the Root Tuber of Trichosanthe kirilowii: 2007年; β-Trichosanthin,a type 1 ribosome-inactivating protein (RIP) isolated from the root tuber of Trichosanthe kirilowii Maxim,is an isoform of trichosanthin. Here we report its crystal-lization in two crystal forms using the hanging-drop vapor-diffusion method. The form A and form B crystals belong to the orthorhombic space group P212121 and monoclinic space group P21,respectively. X-ray data have been collected to 1.6 and 1.2 resolution for form A and form B crystals,respectively,using a synchrotron source.; 侯晓敏陈明晃彭奇陈荔清Meehan Edward J黄明东; 关键词：核蛋白体天花粉蛋白

南瓜蛋白对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响被引量：4: 2012年; 目的观察南瓜蛋白对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法观察南瓜蛋白对PANC-1细胞生长抑制情况;非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷性小鼠(NOD/SCID)小鼠体内观察南瓜蛋白对胰腺原位移植瘤的抑瘤率;电镜观察南瓜蛋白作用后PANC-1细胞超微结构的改变;流式细胞仪定量检测其细胞周期和凋亡发生率的影响;ELISA法定量检测南瓜蛋白作用后PANC-1细胞Caspase-3活性变化。结果 0.125、0.25、0.5mg/kg的南瓜蛋白对小鼠移植瘤抑瘤率(%)分别为45.2、50.0、59.7(P<0.05)。南瓜蛋白10μg/mL作用PANC-1细胞24h,部分细胞开始凋亡,表现为核内染色质浓集,出现核碎裂,作用72h,凋亡细胞增多,表现为染色质聚集,部分核膜消失,凋亡小体出现;南瓜蛋白(0、2.5、10、40μg/mL)作用PANC-1细胞72h,流式细胞周期分析显示G0/G1期的比例(%)分别为46.56±5.08、53.33±5.05、67.50±6.50和77.00±6.73(P<0.05),annexin V/PI分析显示PANC-1细胞凋亡率(%)分别为2.50±0.13、8.30±1.23、23.40±2.45和48.50±3.65(P<0.05);Caspase-3活性分别为0.009±0.002、0.011±0.003、0.035±0.009和0.065±0.009酶活力单位(P<0.05),提示南瓜蛋白以浓度依赖性诱导PANC-1细胞凋亡;40μg/mL南瓜蛋白作用PANC-1细胞24、48、72h,G0/G1期的比例(%)分别为56.60±6.65、67.83±6.76和77.00±6.73(P<0.05),annexin V/PI分析显示PANC-1细胞凋亡率(%)分别为16.51±2.97、38.51±2.38和48.50±3.65(P<0.05),提示南瓜蛋白以时间依赖性诱导PANC-1细胞凋亡。结论南瓜蛋白对PANC-1细胞具有明显的抑制作用,诱导G0/G1周期阻滞和细胞凋亡可能是其主要机制。; 许春森黄鹤光陈明晃谢捷明; 关键词：南瓜蛋白胰腺肿瘤药物治疗细胞周期凋亡

南瓜蛋白经表皮生长因子受体信号通路诱导人胰腺癌细胞SW1990凋亡被引量：1: 2012年; 目的探讨南瓜蛋白诱导人胰腺癌细胞SW1990凋亡的作用机制。方法Westen blot法检测表皮生长因子受体（EGFR）、P13K、Akt、Bad、Caspase-9、mTOR、P70S6K-α、4E—BPl蛋白表达水平，RT-PCR检测EGFRmRNA表达水平。结果随着药物浓度的增高，EGFR、P13K、Akt、mTOR、P70S6K—α及4E—BP1蛋白表达下调，而Bad及Caspase-9蛋白表达升高。EC；FRmRNA表达无变化。结论南瓜蛋白下调EGFR蛋白表达，并通过抑制下游P13K／Akt／mTOR信号通路，诱导人胰腺癌细胞SW1990凋亡。; 张宝明黄鹤光谢捷明陈明晃王丛菲殷强杨爱琴; 关键词：胰腺肿瘤南瓜属

南瓜蛋白诱导人胰腺癌细胞凋亡的线粒体机制被引量：2: 2015年; 目的探讨南瓜蛋白（CUS）诱导人胰腺癌细胞（PANC）-1凋亡的线粒体机制.方法 0、2.5、10.0、40.0 mg/L的CUS处理胰腺癌PANC-1 72 h,荧光显微镜和流式细胞仪观察线粒体膜电位（△Ψm）的变化,Western blot检测胞质细胞色素C（Cyt-C）的含量变化和细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-9（Caspase-9）和Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）蛋白的表达水平.结果 0、2.5、10.0、40.0 mg/L CUS处理PANC-1 72 h后,△Ψm逐渐下降,分别为167.23±8.27、123.56±7.26、83.25±5.36和40.45±5.87,差异有统计学意义（P＜0.05）;Western blot结果显示线粒体Cyt-C释放到细胞质的量逐渐增加,灰度值分别为0.29±0.05、1.69±0.35、1.87±0.40、2.47±0.32（P＜0.05）;Caspase-9、Caspase-3和bax蛋白的表达逐渐增强,且其作用呈剂量依赖性（Caspase-9灰度值分别为0.15±0.03、0.19±0.05、0.49±0.09、0.89±0.08,P＜0.05;Caspase-3灰度值分别为0.88±0.08、1.81±0.19、2.36±0.38、2.92±0.24,P ＜0.05;bax灰度值分别为0.79±0.18、1.66±0.31、2.61±0.41、3.67±0.24,P＜0.05）;而bcl-2蛋白表达无明显变化（bcl-2灰度值分别为0.88±0.08、0.82±0.18、0.84±0.04、0.82±0.13,P＞0.05）.结论线粒体途径在CUS诱导胰腺癌细胞凋亡中起重要作用,其机制可能是CUS通过激活促凋亡蛋白bax表达增加,降低△Ψm,促进线粒体Cyt-C的释放,从而激活Caspase系列酶,诱导胰腺癌细胞凋亡.; 许春森黄鹤光陈明晃谢捷明; 关键词：南瓜蛋白胰腺癌线粒体

核糖体失活蛋白抗血液病肿瘤的研究: 2010年; 核糖体失活蛋白是广泛存在于高等植物中能抑制核糖体翻译功能的一类毒蛋白。它能够对哺乳动物核糖体大亚基上的28SrRNA进行脱嘌呤作用,从而破坏核糖体的结构,抑制蛋白质的生物合成。本文就核糖体失活蛋白的生物学活性以及近年来在抗血液病肿瘤方面的研究进展做一综述。; 刘慧丽刘庭波谢捷明; 关键词：核糖体失活蛋白白血病血液病

南瓜蛋白联合常用化疗药物对人胰腺癌BxPC-3细胞的体外抑制作用: 2015年; 目的研究南瓜蛋白（CUS）联合胰腺癌常用化疗药物吉西他滨（GEM）、氟尿嘧啶（5-FU）、紫杉醇（erx）、顺铂（DDP）对人胰腺癌细胞株BxPC-3的增殖抑制作用。方法采用磺酰罗丹明B（SRB）比色法测定CUS分别与GEM、5-FU、PTX、DDP联用对体外培养的BxPC-3细胞的增殖抑制作用；应用集落形成实验测定CUS分别与GEM、5-FU、PTX、DDP联用对体外培养的BxPC-3细胞集落形成的影响；用金氏公式判断药物联用的协同效果。结果CUS联用GEM、5-FU、HIX、DDP对BxPC．3细胞的增殖抑制率均大于各药单用的抑制率，q〉0．85；CUS与胰腺癌常用化疗药物均在低浓度范围内联用的相加效果明显。CUS联用GEM、5-FU、PTX、DDP对BxPC-3细胞的集落形成抑制率均大于各药单用的抑制率，q〉1．15。结论CUS联合GEM、5-FU、PTX、DDP常用化疗药物对体外培养的BxPC-3细胞的生长抑制具有较好的协同作用。; 池其煜黄鹤光王丛菲谢捷明胡伟泽付明娟陈明晃; 关键词：南瓜蛋白胰腺癌化疗药物细胞增殖

南瓜蛋白对人胰腺癌SW1990细胞株的诱导凋亡作用被引量：6: 2011年; 目的探讨南瓜蛋白体外对人胰腺癌SW1990细胞株的诱导凋亡作用。方法 MTT法检测南瓜蛋白对SW1990细胞的增殖抑制作用,透射电镜观察细胞凋亡表现,流式细胞仪检测其凋亡率,Western blot法检测caspase-3蛋白的表达。结果不同浓度(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00及80.00μg/ml)南瓜蛋白作用不同时间(24、48及72 h)后,南瓜蛋白对胰腺癌细胞具有生长抑制作用,并呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。40.00μg/ml南瓜蛋白作用72 h后,透射电镜下可见细胞出现明显的凋亡改变,并可见凋亡小体;不同浓度(0、2.50、10.00、40.00μg/ml)南瓜蛋白作用72 h后,细胞的凋亡率分别为(0.30±0.11)%、(18.93±1.06)%、(28.00±2.07)%及(49.93±3.25)%,随着药物浓度的升高,细胞的凋亡率逐渐增加,呈浓度依赖性(P<0.05);caspase-3蛋白表达随着药物浓度的升高逐渐增强,呈浓度依赖性(P<0.05)。结论南瓜蛋白可能通过上调caspase-3蛋白的表达诱导胰腺癌细胞凋亡。; 殷强黄鹤光谢捷明陈明晃张宝明王丛菲; 关键词：胰腺肿瘤南瓜蛋白凋亡

南瓜蛋白联合吉非替尼对人胰腺癌BxPC-3细胞的抑制作用被引量：4: 2012年; 目的研究南瓜蛋白(cucurmosin,CUS)联合表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼(Gefitinib,GEF)对人胰腺癌细胞株Bx-PC-3的生长抑制作用。方法采用SRB法测定CUS与GEF联用对体外培养的BxPC-3细胞的增殖抑制作用;应用集落形成实验测定CUS与GEF联用对体外培养的BxPC-3细胞集落形成的影响;以Western blot技术检测CUS与GEF联用对体外培养的BxPC-3细胞EGFR的影响。结果 CUS联用GEF对BxPC-3细胞的增殖抑制率大于单用药物,q>0.85;CUS联用GEF对BxPC-3细胞的集落形成抑制率大于单用药物,q>1.15;CUS联合GEF干预BxPC-3细胞可明显下调其EGFR蛋白表达,q>2.0。结论 CUS联合GEF对人胰腺癌BxPC-3细胞的生长抑制具有协同作用。; 谢捷明杨爱琴王丛菲黄鹤光张宝明吴雪燕陈明晃; 关键词：南瓜蛋白吉非替尼胰腺癌 EGFR 药物协同作用

南瓜蛋白对人胰腺癌细胞系PANC-1的细胞毒性及化疗增敏作用被引量：10: 2009年; 目的观察南瓜蛋白(CUS)对人胰腺癌细胞系PANC-1的细胞毒性和化疗增敏作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,观察不同浓度(量效)的CUS及作用不同时间(时效)对胰腺癌细胞PANC-1的细胞毒性;采用Chou Talalay联合指数法判断CUS增加胰腺癌细胞对吉西他滨(GEM)的化疗敏感性。结果CUS对胰腺癌PANC-1细胞具有显著的增殖抑制作用,0.3125,0.625,1.25,2.5,5.0,10.0,20.0,40.0,80.0μg/mL的CUS作用于胰腺癌细胞24 h,其抑制率分别为9.16%,11.9%,14.4%,20.2%,32.0%,36.4%,44.1%,50.3%和58.6%,呈现明显的剂量依赖性;随着作用时间的延长,其抑制率明显增加,24,48,72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为40.24,8.24,1.17μg/mL,呈现明显的时间依赖性。两药在不同效应时各自所需浓度之间相互作用均为协同作用(CI<1),单吉西他滨用于胰腺癌细胞的IC50为36.76 nmol/L,CUS与其合用时的IC50为12.14 nmol/L,合用比单用时吉西他滨的剂量减少67.0%。结论CUS对胰腺癌的细胞毒性作用呈明显的剂量依赖性和时间依赖性,与吉西他滨联合使用可增加其细胞毒作用,起到化疗增敏效应。; 许春森黄鹤光陈明晃魏香兰何莉陈燕卿谢捷明; 关键词：南瓜蛋白吉西他滨化疗增敏

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