教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-07-575)
- 作品数：3 被引量：11H指数：3
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- 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
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- 新型软骨脱细胞基质海绵的制备及生物相容性评价被引量：4
- 2009年
- 目的探讨利用猪耳软骨脱细胞基质制备海绵状多孔支架材料的方法,及其用作组织工程关节软骨支架材料的可行性。方法取新鲜猪耳软骨低温粉碎后,筛取粒径90μm以下软骨微粒经低温脱细胞处理,冻干,用1.5%乙酸分散制备质量体积比为2%的胶状悬液,低温冻干成型。行理化性能检测测定其孔径、孔隙率及吸水率,并行组织学及扫描电镜观察。24只SD大鼠脊柱两侧皮下分别植入制备的软骨脱细胞基质海绵(实验组)和ColⅠ海绵(对照组);于术后1、2、4、8周取材行组织学观察,分析软骨脱细胞基质海绵在体内的吸收降解情况。取1周龄新西兰大白兔股骨骨髓,培养获取第3代BMSCs,分别采用浓度为50%(A组)及100%(B组)的软骨脱细胞基质海绵浸提液及DMEM培养液(C组)进行培养,于培养后2、4、6dMTT法测定细胞增殖。结果制备的软骨脱细胞基质海绵呈白色多孔状,组织学观察示材料中无软骨细胞碎片残留,主要由胶原构成。扫描电镜显示材料呈多孔蜂巢状,孔洞相互连接,孔径均匀。吸水率为2029%±253%,孔径为(90.66±21.26)μm,孔隙率为90.10%±2.42%。支架材料植入SD大鼠皮下后可见组织长入材料,血管生成,炎性反应较对照组轻,材料可按一定速率降解吸收。MTT法检测结果示,浸提液培养2、4d,3组间吸光度(A)值差异无统计学意义(P>0.05);6d,3组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论将软骨脱细胞基质进行改性处理制备的海绵支架材料脱细胞彻底,保留了软骨ECM主要成分,无毒,具备合适的孔径和孔隙率,孔隙分布均匀,生物相容性好,可作为软骨组织工程的支架材料。
- 刘天军谭波罗静聪邓力解慧琪
- 关键词：软骨组织工程生物相容性
- 铜离子对血管内皮细胞增殖与分化的影响被引量：4
- 2009年
- 目的评价Cu2+对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖与分化的影响。方法体外培养并传代HUVEC。将HUVEC以5×103个/孔密度接种于96孔板,根据向孔板中加入溶液浓度的不同将细胞随机分成3组,A组5μmol/L CuSO4,B组25μmol/L CuSO4,C组为空白对照,每组4个复孔,基础培养基为MCDB131,采用MTT法检测细胞增殖并绘制生长曲线。另取HUVEC以2×105个/孔密度接种于6孔板,分组同前,荧光定量RT-PCR检测3组HUVEC的内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因和Tie-1基因表达。结果生长曲线示前3d为指数增长期,第4天开始进入平台期。A组细胞增殖能力从第3天开始明显高于B、C组,B组在2d内高于C组,但从第4天开始显著低于C组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。荧光定量RT-PCR检测示作用48h后,A、B、C组eNOS基因表达分别为7.294±1.488、0.149±0.044和1.000±0.253,Tie-1基因的表达分别为1.481±0.137、1.131±0.191和1.000±0.177。A组与B、C组比较,2个基因的表达均有上调(P<0.05);B、C组比较,eNOS基因表达下调(P<0.05),Tie-1基因表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论5μmol/L Cu2+能有效促进HUVEC的增殖与分化。
- 罗堃范兆心冯喆李顺陈晓禾解慧琪
- 关键词：CU^2+人脐静脉血管内皮细胞细胞增殖基因表达
- 上皮细胞条件培养液对BMSCs分化的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨上皮细胞条件培养液(epithelial cell conditioned medium,ECCM)体外诱导犬BMSCs向上皮细胞分化的可行性。方法成年健康雄性比格犬1只,体重10kg。于犬髂后上棘采用骨髓穿刺法取骨髓5mL,分离培养BMSCs。取犬口腔黏膜下组织,剪成约4mm×4mm大小,制备ECCM。取第2代BMSCs以2×104个/孔细胞密度接种,实验组于ECCM中培养,对照组于低糖DMEM完全培养基中培养。观察两组细胞形态特征,MTT法绘制生长曲线,诱导培养21d免疫组织化学染色鉴定上皮细胞特异性标志物——细胞角蛋白19(cytokeratin19,CK-19)和细胞角蛋白AE1/AE3,透射电镜观察细胞超微结构。结果倒置相差显微镜下见两组细胞均呈长梭形,均匀分布,折光性较强,增殖迅速。两组细胞生长曲线均呈"S"形,实验组生长曲线较对照组右移,提示ECCM对细胞增殖有抑制作用。实验组CK-19和细胞角蛋白AE1/AE3免疫组织化学染色均呈阳性反应,对照组呈阴性。透射电镜下实验组细胞胞浆内可见紧密连接。结论ECCM体外有诱导同种BMSCs向上皮细胞分化的作用。
- 杨朋魏人前谭波李秀群王佳周昆鹏左潇李顺解慧琪
- 关键词：BMSCS上皮细胞诱导分化
