江苏省科技支撑计划项目(BE2013387)
- 作品数：10 被引量：96H指数：4
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- 猪小肠上皮细胞分离培养与鉴定被引量：11
- 2015年
- 为建立功能性永生化的猪小肠上皮细胞系,并为猪肠道营养吸收与免疫调控以及仔猪肠道疾病发病机制的研究提供细胞模型,本试验采用组织块培养法来分离纯化猪小肠上皮细胞,并通过细胞角蛋白18、细胞增殖曲线、核型分析来鉴定猪小肠上皮细胞。结果表明:1)采用组织块培养法能够成功培养猪小肠上皮细胞并稳定传11代。2)本试验获得的猪小肠上皮细胞角蛋白18抗原鉴定为阳性,染色体核型为二倍体。3)倒置显微镜下观察培养至第11代的猪小肠上皮细胞仍然保持着上皮细胞的特征,呈现"铺路石"和上皮样形态。培养11代后的猪小肠上皮细胞间隙开始变大,规则不明显,细胞开始凋亡。第15代的猪小肠上皮细胞则出现大量凋亡并从瓶底脱落,仅有很少细胞贴壁生长。综上所述,采用组织块培养法能够获得生物学功能稳定的猪小肠上皮细胞系并能正常传11代,可为细胞的永生化提供试验素材。
- 詹康左晓昕陈银银贡笑笑占今舜赵国琦
- 关键词：功能性永生化
- 不同精粗比颗粒饲料对断奶公犊牛瘤胃发酵参数和微生物的影响被引量：55
- 2015年
- 本试验旨在研究不同精粗比颗粒饲料对中国荷斯坦断奶公犊牛瘤胃微生物蛋白、发酵参数和微生物数量的影响。选用12头3月龄大的中国荷斯坦断奶公犊牛,按照日龄相近(103.92±1.5 d)、体重相似(121.25±4.12kg)的原则随机分成4组,每组3头,分别饲喂精粗比为75∶25(Ⅰ)、70∶30(Ⅱ)、65∶35(Ⅲ)、60∶40(Ⅳ)的4种全价颗粒饲料。预试期14 d,正试期56 d。测定犊牛瘤胃微生物蛋白、发酵参数和微生物数量。结果表明,处理组Ⅳ的总挥发性脂肪酸和乙酸浓度最低,且显著低于处理组Ⅰ(P<0.05);处理组Ⅳ的丁酸浓度最高,且显著高于处理组Ⅰ、Ⅲ(P<0.05);处理组Ⅲ的乙酸/丙酸最大,且显著大于处理组Ⅳ(P<0.05)。处理组Ⅳ的白色瘤胃球菌、溶纤维丁酸弧菌和真菌的相对表达量最高,且显著高于其他各处理组(P<0.05);处理组Ⅲ的黄色瘤胃球菌的相对表达量最高,且显著高于其他各处理组(P<0.05)。综上所述,高精料全价颗粒饲料虽然能提高犊牛瘤胃总挥发性脂肪酸和乙酸的水平,但会抑制瘤胃纤维降解菌和厌氧真菌的生长。
- 杨宏波刘红占今舜林淼赵国琦
- 关键词：颗粒饲料微生物蛋白瘤胃发酵瘤胃微生物犊牛
- 不同精粗比日粮对犊牛组织中脂肪代谢相关酶基因表达的影响被引量：4
- 2015年
- 为研究不同精粗比全价颗粒饲料对犊牛不同组织中SREBP-1、FASN、SCD1和ApoA1mRNA表达的影响,选取日龄和体重相近的中国荷斯坦断奶公犊牛12头,分为4组,每组3头,各试验组精粗比分别为75∶25(Ⅰ)、70∶30(Ⅱ)、65∶35(Ⅲ)和60∶40(Ⅳ),预试期14d,正试期56d。结果表明,试验Ⅱ组肝脏、十二指肠和瘤胃中的SREBP-1和ApoA1mRNA相对表达量显著高于试验Ⅳ组(P<0.05);试验I组肝脏和十二指肠中的FASN mRNA相对表达量显著高于试验Ⅲ组(P<0.05),而在瘤胃和肌肉中的结果与之相反;试验Ⅰ组犊牛肝脏和十二指肠以及试验Ⅲ组瘤胃中的SCD1mRNA相对表达量显著高于其他各组(P<0.05)。以上结果说明,日粮高精粗比能够促进犊牛体内脂肪的形成。
- 占今舜郭静杨宏波詹康刘红刘明美赵国琦
- 关键词：荷斯坦牛基因表达精粗比
- 不同培养模式下奶牛乳腺上皮细胞形态及酪蛋白表达的差异被引量：1
- 2015年
- 本试验旨在研究二维和三维培养模式下奶牛乳腺上皮细胞形态及酪蛋白表达的差异。利用组织块培养细胞来分离奶牛乳腺上皮细胞,利用有限稀释法克隆奶牛乳腺上皮细胞。通过显微镜观察细胞在基质胶中的形态,并用Western blot法检测酪蛋白的诱导表达。结果表明:1)采用组织块培养细胞能够成功分离奶牛乳腺上皮细胞,克隆得到的细胞能稳定传至20代。2)细胞接种12h之后,二维培养的奶牛乳腺上皮细胞并没有形成明显的细胞簇,细胞间也没有相互连接;三维培养的奶牛乳腺上皮细胞形成明显的细胞簇,在基质胶内的层黏连蛋白作用下形成交织网状结构。培养2d细胞间交织网状结构逐渐消失,细胞开始形成单个的成细胞簇,使细胞间更加紧密的相连。3)二维培养奶牛乳腺上皮细胞不能诱导表达酪蛋白,但三维培养细胞可诱导表达κ-酪蛋白。综上所述,三维培养奶牛乳腺上皮细胞能够改变细胞的形态和功能,诱导κ-酪蛋白的表达,三维培养的奶牛乳腺上皮细胞可作为奶牛的泌乳机制研究的体外模型。
- 詹康左晓昕贡笑笑陈银银占今舜赵国琦
- 关键词：奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白体外模型
- 苜蓿生物活性物质在动物上的应用被引量：15
- 2015年
- 苜蓿中含有许多生物活性物质,能够显著影响动物的生长性能、繁殖机能和免疫功能,有些活性物质还可以作为人的保健品使用。本文主要介绍苜蓿皂苷、苜蓿多糖、苜蓿黄酮的生物学功能以及国内外学者对苜蓿中活性成分研究的最新成果。苜蓿中活性物质可以作为动物的饲料添加剂使用,一定剂量的苜蓿活性物质可以提高动物体内的淋巴细胞水平,增加免疫力;提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性,抑制丙二醛的水平,具有抗氧化功能;增加动物的生产性能和繁殖性能。
- 左晓昕姚丹丹占今舜赵国琦
- 关键词：苜蓿皂苷苜蓿多糖
- 饲粮精粗比对犊牛肠道小肽转运蛋白mRNA表达的影响被引量：1
- 2015年
- 本试验旨在研究不同精粗比颗粒料对犊牛肠道黏膜小肽转运蛋白Pep T1、Pep T2、PHT1和PHT2 mRNA表达的影响。选择日龄、体重相近的中国荷斯坦公犊牛6头,分为2个处理,每个处理3头,各处理精粗比分别为75∶25(Ⅰ)和65∶35(Ⅱ),预试期14 d,正试期56 d。结果表明:1)十二指肠和空肠Pep T1 mRNA表达丰度极显著高于回肠、盲肠和结肠(P<0.01);处理Ⅰ犊牛十二指肠和空肠Pep T1 mRNA表达丰度极显著高于处理Ⅱ(P<0.01);2)与Pep T1 mRNA相比,Pep T2 mRNA在犊牛肠道中表达丰度较低;处理Ⅰ十二指肠和结肠Pep T2 mRNA表达丰度极显著高于处理Ⅱ(P<0.01);3)处理Ⅰ盲肠PHT1 mRNA表达丰度极显著低于处理Ⅱ(P<0.01),处理Ⅰ犊牛回肠和结肠PHT1 mRNA表达丰度显著高于处理Ⅱ(P<0.05);4)处理Ⅰ犊牛盲肠PHT2 mRNA表达丰度极显著低于处理Ⅱ(P<0.01),处理Ⅰ犊牛十二指肠和结肠PHT2mRNA表达丰度极显著高于处理Ⅱ(P<0.01)。以上结果说明,与精粗比为65∶35的饲粮相比,精粗比为75∶25的饲粮更能够促进犊牛肠道中Pep T1、Pep T2、PHT1和PHT2 mRNA的表达。
- 郭静姚丹丹杨宏波霍永久赵国琦
- 关键词：PEPT1PEP小肽犊牛
- 犊牛组织中小肽转运体(POTs)的表达研究被引量：1
- 2015年
- 为研究犊牛部分组织中小肽转运体(proton-dependent oligopeptide transporters,POTs)(PepT1、PepT2、PHT1、PHT2)mRNA的表达,试验选用4头3月龄的中国荷斯坦犊牛进行屠宰,采用实时荧光定量PCR方法来定量组织中小肽转运蛋白表达水平。结果表明,犊牛PepT1 mRNA在瘤胃中表达丰度极显著高于心脏和肌肉(P<0.01);犊牛PepT2mRNA在肝脏和肾脏中表达丰度极显著高于心脏、脾脏、胸腺、肌肉、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃(P<0.01);犊牛PHT1mRNA在肺脏和脾脏中表达丰度极显著高于心脏和肌肉(P<0.01);犊牛PHT2mRNA在肺脏和胸腺中表达丰度显著高于心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肌肉、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃(P<0.05)。综上所述,PepT1、PepT2、PHT1、PHT2mRNA分别在犊牛瘤胃、肾脏和肝脏、脾脏和肺脏、肺脏和胸腺中表达量最高。
- 郭静杨宏波陈银岳刘红赵国琦
- 关键词：犊牛
- 二十二碳六烯酸的提取技术及其在动物生产中的应用被引量：1
- 2013年
- 二十二碳六烯酸(DHA)是一种具有预防心血管疾病、防治癌症、抑制发炎以及预防老年痴呆等功能的多不饱和脂肪酸。它能够改善动物的生产性能,提高繁殖性能以及生产富含DHA的动物产品。本文综述了DHA的提取技术及其在动物生产中的应用。
- 占今舜詹康赵国琦
- 关键词：DHA动物生产
- 不同精粗比对犊牛组织中PepT1和PHT1及PHT2表达的影响被引量：5
- 2015年
- 研究不同精粗比全价颗粒饲料对犊牛不同组织中PepT1、PHT2和PHT1 mRNA表达的影响。试验选取日龄相近、体重相近的中国荷斯坦断奶公犊牛12头,分为4组,每组3头,各试验组精粗比分别为75:25(Ⅰ)、70:30(Ⅱ)、65:35(Ⅲ)和60:40(Ⅳ),预试期14 d,正试期56 d。结果表明:脾脏中PHT1mRNA表达量最高,肺中的PHT2mRNA表迭量最高,瘤胃中的PepT1mRNA表达量最高,而它们在心脏中表达量均最低;试验Ⅰ和Ⅱ组肝脏、皱胃、瓣胃和瘤胃中的PHT1 mRNA表达量极显著高于试验Ⅳ组(P<0.01),而试验Ⅲ组网胃的PHT1 mRNA表达量极显著高于其他各组(P<0.01);试验Ⅲ组犊牛肝脏和网胃以及试验Ⅱ组皱胃中PHT2 mRNA表达量极显著高于其他各组(P<0.01),试验Ⅰ和Ⅳ组瘤胃和瓣胃中PHT2 mRNA表达量极显著高于其他2组(P<0.01);试验Ⅳ组犊牛肝脏中Pep T1 mRNA表达量极显著高于其他各组(P<0.01),试验Ⅰ组瘤胃、网胃和瓣胃中PepT1 mRNA表达量极显著高于试验Ⅲ和Ⅳ组(P<0.01)。结果表明,不同精粗比全价颗粒饲料对不同组织的PepT1、PHT1和PHT2表达具有一定的影响作用,其中高精粗料促进其表达。
- 王锦荣占今舜郭静赵国琦
- 关键词：荷斯坦牛基因表达精粗比荧光定量PCR
- 饲粮精粗比对犊牛组织中基因GLUT1和FATP4及PepT1 mRNA表达的影响被引量：3
- 2015年
- 为探明全价颗粒饲料精粗比与犊牛不同组织GLUT1、FATP4、PepT1 mRNA表达的关系,根据NRC(2001)营养需要,采用20型颗粒饲料机组,将质量比3∶1的苜蓿和小黑麦草混合,分别制成精粗比75∶25(Ⅰ)、70∶30(Ⅱ)、65∶35(Ⅲ)、60∶40(Ⅳ)的颗粒全价饲料,分别饲喂4组日龄相近、体重相近的中国荷斯坦断奶公犊牛(共12头,每组3头),预试期14 d,正试期56 d。结果表明:1)试验Ⅲ组犊牛肝脏、瘤胃、十二指肠、盲肠的GLUT1mRNA相对表达量显著高于试验Ⅳ组(P<0.05),而试验I组皱胃GLUT1 mRNA的相对表达量显著高于其他各组(P<0.05);2)试验Ⅲ组肝脏、盲肠和试验I组瘤胃、皱胃、十二指肠的FATP4 mRNA相对表达量均高于其他各组(P<0.05);3)试验I组瘤胃、皱胃、十二指肠和试验Ⅳ组肝脏及试验Ⅲ组盲肠的PepT1 mRNA相对表达量均高于其他各组。总体而言,不同精粗比全价颗粒饲料对不同组织GLUT1、FATP4、PepT1的表达具有一定的影响,精粗比为65∶35时更利于犊牛对葡萄糖、脂肪酸和蛋白质的吸收。
- 占今舜杨宏波詹康刘红刘明美赵国琦
- 关键词：犊牛荧光定量PCR
